title: RELAZIONE DELLA COMMISSIONE - SVILUPPO, CONVALIDA E ACCETTAZIONE LEGALE DEI METODI ALTERNATIVI ALLA SPERIMENTAZIONE ANIMALE NEL CAMPO DEI PRODOTTI COSMETICI - 1995

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animal experimentation
bioprocess
cosmetic product
protection of animals
research method

text: COMMISSIONE DELLE COMUNITÀ' EUROPEE > r I i Bruxelles, 24. 07. 1996 COM(96) 365 dei'. RELAZIONE DELLA COMMISSIONE SVILUPPO, CONVALIDA E ACCETTAZIONE LEGALE DEI METODI ALTERNATIVI ALLA SPERIMENTAZIONE ANIMALE NEL CAMPO DEI PRODOTTI COSMETICI 1995 SVILUPPO, CONVALIDA E ACCETTAZIONE LEGALE DEI METODI ALTERNATIVI ALLA SPERIMENTAZIONE ANIMALE NEL CAMPO DEI PRODOTTI COSMETICI 1995 Sunto I - INTRODUZIONE Obblighi della Commissione L'articolo 4(i) della direttiva 76/768/CEE, modificata dalla direttiva 93/35/CEE specifica che "gli Stati membri vietano la commercializzazione dei prodotti cosmetici contenenti. gli ingredienti o le combinazioni di ingredienti sperimentali su ammali a partire dal 1 ° gennaio 1998". L'ambiguità della formulazione "combinazioni di ingredienti" è stata successivamente eliminata per quanto riguarda la Commissione, la quale ritiene che il divieto riguarda anche i prodotti cosmetici finiti. L'attuazione di tale divieto è legata all'elaborazione di "metodi atti a sostituire in modo soddisfacente la sperimentazione animale. di cui sia stato scientificamente dimostrato che offrono al consumatore un grado di protezione equivalente". Allo scopo di fornire un'informazione regolare sugli sviluppi della situazione si specifica che "la Commissione presenta annualmente al Parlamento europeo ed al Consiglio una relazione sui progressi realizzati in materia di sviluppo, convalida e accettazione legale di metodi atti a sostituire la sperimentazione animale. La relazione contiene dati precisi sul numero e sul tipo di esperimenti concernenti prodotti cosmetici effettuati su animali". Relazione 1994 Una prima relazione è stata presentata nel 1994. Essa illustrava risultati interessanti ma limitati "che non permettevano di sostituire i modelli animali ma potevano contribuire alla riduzione del numero di animali utilizzati". Tuttavia, le prospettive erano ragionevolmente ottimistiche per la convalida di metodologie alternative in ordine ai test d'irritazione oculare, di assorbimento percutaneo, di fototossicità/fotoirritazione ed ai test di base di mutagenicità. Veniva inoltre sottolineato che "allo stadio attuale delle conoscenze era alquanto improbabile la prospettiva di sostituire interamente la sperimentazione animale negli studi tossicologici concernenti la valutazione del rischio sistemico", cioè legato a un'azione per via sanguigna sull'insieme dell'organismo dopo l'assorbimento percutaneo. II - RELAZIONE 1995 Gli obiettivi della relazione, la nozione di rischio potenziale per la salute umana rimangono gli stessi della relazione 1994. Le parti interessate dall'attuazione di tale disposizione rimangono: la Commissione europea: DG XI, DG-JRC, DG XXIV, DG XII l'industria europea rappresentata da COLIPA, Comité de Liaison Européen des Industries Cosmétiques il governo americano e la federazione americana di cosmetologia, CFTA il governo giapponese e la federazione giapponese di cosmetologia, JCIA L'OCSE 1 - Chiarificazione delle tappe della convalida La convalida è il processo attraverso il quale la pertinenza e l'affidabilità di una procedura sono definite in relazione ad un determinato obiettivo. Tale processo è risultato più complesso e richiederà più tempo del previsto. È stato necessario meglio definire le tappe della valutazione di nuovi test (elaborazione di un test e produzione di un protocollo; convalida preliminare, convalida propriamente detta; valutazione obiettiva e indipendente dello studio, progressione verso l'accettazione legale). 2 - Le iniziative Le varie parti interessate hanno preso numerose iniziative al fine di raggiungere gli obiettivi prescritti. DGXI La DG XI è responsabile da un lato della direttiva 86/609/CEE relativa alla protezione degli animali utilizzati a fini sperimentali o per altri scopi scientifici, ed in questo senso incaricata di raccogliere i dati statistici sugli animali utilizzati; e dall'altro della direttiva relativa alla classificazione e 67/548/CEE all'etichettatura delle sostanze chimiche pericolose e che nei suoi allegati definisce i metodi di test riconosciuti dall'UE. DG-JRC: ECVAM (European Centre for the Validation of Alternative Methods) ha già organizzato 14 seminari sullo sviluppo e sulla convalida dei metodi alternativi. Sette di essi, dei quali sono state pubblicate le rispettive relazioni, riguardavano la sicurezza dei prodotti cosmetici. Sono inoltre disponibili altre due relazioni sulle procedure di convalida preliminare e di convalida. ECB (European Chemicals Bureau) fornisce scientifico necessario alla DG XI il supporto tecnico e DG XXIV / CSC (Comitato Scientifico di Cosmetologia): La DG XXIV svolge un ruolo propulsore nelle azioni intraprese dovuto al fatto di essere responsabile della direttiva "Prodotti cosmetici" ed incaricata di preparare per la Commissione il progetto di misure intese a rinviare, qualora necessario, i termini del divieto dei test sugli animali. Il CSC e il suo sottogruppo più specificamente incaricato dei metodi alternativi hanno valutato vari documenti e pratiche presentati da COLIPA. Hanno inoltre adottato un documento su "L'informazione richiesta per la valutazione scientifica degli studi di convalida dei test alternativi ai fini della loro utilizzazione nella valutazione della sicurezza dei prodotti cosmetici". DGXH La DG XII ha finanziato vari programmi di ricerca sullo sviluppo e sulla convalida dei metodi alternativi. COLIPA/SCAAT (Steering Committee on Alternatives to Animal Testing) Oltre all'elaborazione delle pratiche e alla partecipazione a numerosi studi, COLIPA ha organizzato un convegno scientifico internazionale sulle alternative alla sperimentazione animale a Bruxelles il 29 e 30 novembre 1995. USA Il governo americano ricerca attivamente una cooperazione internazionale che consenta di emettere raccomandazioni. La FDA (Food and Drug Administration), agenzia responsabile della sicurezza dei prodotti cosmetici, ha espresso le proprie inquietudini per quanto riguarda la messa al bando della sperimentazione animale in sede di attuazione della direttiva 93/35/CEE. OCSE L'OCSE publica linee direttrici relative ai test di tossicità appprovate dai paesi membri. È attualmente in fase di discussione una linea direttrice relativa al controllo in vitro dell'assorbimento percutaneo. 3 - Statistiche sulla sperimentazione animale La raccolta di dati specificamente riguardanti gli ingredienti e i prodotti cosmetici è stata resa difficile dal fatto che non è stata concepita su base annuale la raccolta dei dati sul numero di animali utilizzati a fini sperimentali e per altri scopi scientifici in applicazione della direttiva 86/609/CEE. 8 Stati membri hanno dichiarato che sul loro territorio non venivano effettuati test su animali per i prodotti cosmetici finiti (Italia, Grecia, Belgio, Irlanda, Svezia, Finlandia, Lussemburgo, Germania). Ili 6 Stati membri hanno dichiarato che sul loro territorio non venivano effettuati test su animali per gli ingredienti cosmetici (Grecia, Paesi Bassi, Irlanda, Svezia, Finlandia, Lussemburgo). 3 Stati membri (Austria, Francia, Regno Unito) hanno comunicato dei dati, precisando nel contempo che tali cifre rivestivano un carattere di incertezza e che non erano interpretabili. Occorre inoltre osservare che taluni Stati membri non produttori di ingredienti possono utilizzare ingredienti sottoposti a test in altri Stati membri o in paersi terzi e che taluni ingredienti possono essere stati sottoposti a test per altri scopi. 4 - Conclusioni e Prospettive relative allo sviluppo di metodi alternativi per i vari test di tossicità utilizzati nella valutazione della sicurezza degli ingredienti e dei prodotti cosmetici. 4-1 Ingredienti Fototossicità/fotoirritazione (reazione cutanea previa applicazione epicutanea di una sostanza chimica in presenza di radiazione UV). Ciò riguarda in particolare i filtri UV. I risultati della seconda fase dello studio internazionale di convalida EU/COLIPA sui test in vitro per la fotoirritazione hanno già consentito di compiere mportanti progressi. È prevista una terza fase. Sarà necessario uno studio complementare sui filtri UV. La convalida è prevedibile per un prossimo avvenire. Assorbimento percutaneo Una nuova linea direttrice relativa ai test in vitro per l'assorbimento percutaneo potrebbe essere accettata dagli Stati membri e dall'OCSE in un prossimo futuro. Irritazione cutanea Si propone di valutare l'irritazione cutanea degli igredienti cosmetici su volontari umani. Ciò sarebbe possibile qualora studi preliminari sui rischi tossici apportassero sufficienti garanzie. Sensibilizzazione cutanea La valutazione in vitro della sensibilizzazione cutanea richiede ricerche più approfondite sulla base meccanicistica della sensibilizzazione prima di poter prendere in considerazione uno studio di convalida. Irritazione oculare I risultati degli studi di convalida di metodi alternativi al test d'irritazione oculare di Draize sono stati deludenti (studio EU/Home Office e studio COLIPA) e nessuno dei test utilizzati ha risposto agli obiettivi dello studio. Si potrebbe W incoraggiare un più flessibile approccio della sperimentazione accettando combinazioni di metodi scientificamente convalidati e valutando la tossicità delle sostanze considerate in rapporto ad adeguate sostanze di controllo standard (benchmark substances). Fotomutageni cita (complesso delle modifiche del contenuto informativo del materiale genetico che intervengono in presenza di radiazione UV) Sono state proposte raccomandazioni circa i criteri da adottare al fine di definire protocolli di test in vitro. Corrosività cutanea Gli ingredienti corrosivi non vengono utilizzati nei prodotti cosmetici. Tuttavia, lo studio di convalida ECVAM di test in vitro sulla corrosività cutanea potrebbe servire per la fase di screening e fornire informazioni fondamentali prima di poter prendere in considerazione studi su volontari umani. Mutagenicità Vengono correntemente utilizzati i test in vitro che valutano il potenziale mutagenico degli ingredienti cosmetici. I test in vivo vengono praticati soltanto quando i test in vitro forniscono risultati dubbi. Sarà probabilmente impossible sostituire integralmente in un futuro prevedibile i test in vivo che valutano il rischio sistemico, quali i test di tossicità acuta, di tossicità subcronica, di cancerogenicità, di tossicità della riproduzione e dello sviluppo. Tuttavia, l'affinamento dei metodi impiegati ha già consentito di ridurre in maniera considerevole il numero di animali utilizzati. 4-2 Prodotti cosmetici finiti La tolleranza oculare e la tolleranza cutanea dei prodotti cosmetici finiti possono essere normalmente valutate in vitro se i dati relativi alla tossicità degli ingredienti ed alle loro proprietà fisico-chimiche sono noti e forniscono le necessarie garanzie. La compatibilità cutanea (assenza d'irritazione cutanea) dei prodotti cosmetici finiti può essere valutata nell'uomo se può collocarsi nel contesto di studi clinici strettamente controllati. È importante sottolineare che l'impiego di volontari umani quale metodo sostitutivo dei test sugli animali deve essere esaminato con la massima prudenza. Siffatti studi dei quali è evidente la dimensione etica dovrebbero essere autorizzati soltanto dopo che studi in vitro e in vivo abbiano dimostrato la mancanza di rischi di serie conseguenze. Nel complesso : - È prevedibile per un prossimo futuro la convalida di valutazione metodi alternativi per la dell'assorbimento percutaneo e della fotoirritazione nel caso degli ingredienti, per la valutazione della tolleranza oculare e della tolleranza cutanea per i prodotti finiti. alternativi per la L'elaborazione di metodi valutazione dell'irritazione oculare, dell'irritazione cutanea e della sensibilizzazione cutanea relativa agli ingredienti richiede lo svolgimento di studi preliminari. L'elaborazione di metodi in vitro in settori che comportano un rischio sistemico non è prevista per un prossimo futuro anche se risulta possibile una riduzione del numero di animali. Vi 11724/96/14640100. 1 >()() (|<R) / GLOSSARIO DELLE ABBREVIAZIONI CAPT. CAAT: CFTA: COLIPA: DEREK: ECB: ECVAM: ERGATT: ESAC: EU: EU/HO international validation study: Committee of Adaptation to Technical Progress Centre for Alternatives to Animal Testing (John Hopkins University. USA) Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (USA) European Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge European Chemicals Bureau European Centre for the Validation of Alternative Methods European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing ECVAM Scientific Advisory Committee European Union FDA: FDCA: FLT: FRAME: GLP: ICCVAM: European Union/Home Office international validation study Food and Drug Administration (USA) Food, Drug and Cosmetics Act (USA) Fluorescein Leakage Test Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments Good Laboratory Practice US Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods International Fund for Animal Welfare Interagency Regulatory Alternatives Group In Vitro Testing Industrial Platform Japanese Cosmetics Industry Association Joint Research Centre Modified Maximum Average Score Ministry for Health and Welfare (Japan) National Institute of Environmental Health Sciences (USA) Neutral Red Uptake Assay National Toxicology Program (USA) Prediction Model Organisation for Economic Cooperation and Development Quantitative Structure-Activity Relationships Red Blood Cell Haemolysis Test Steering Committee on Alternatives to Animal Testing Scientific Committee on Cosmetology Scweizerisches Institut fur Alternativen zu Tierversuchen Tissue Equivalent Assay Ultra Violet Zentrastelle und Bewertung von Ersatz und zur Erfassung IFAW: IRAG: IVTIP: JCIA: JRC: MMAS: MHW: NIEHS: NRU: NTP: PM: OECD: QSAR: RBC: SCAAT: SCC: SIAT: TEA: UV: ZEBET: Ergànzungsmethoden zum Tierversuch im Bundesgesundheitsamt VU INDICE PAGINA A B C. D. E. F G INTRODUZIONE CHIARIMENTI SULLE TAPPE DELLA CONVALIDA - Convalida dei metodi alternativi usati a fini diversi - Tappe nello valutazione dei nuovi test LE INIZIATIVE DEL 1995 Parti en causa Le iniziative 1. 2. 3. 4. Unione Europea DGXI DG CCR DG XXIV/CSC DG XII COLIPA/SCAAT USA Giappone OCSE STATO DI AVANZAMENTO DEI LAVORI STATISTICHE SULLA SPERIMENTAZIONE ANIMALE CONCLUSIONI PROSPETTIVE 2 2-5 3 3 5-13 5 6 6 6 7 8 11 11 12 13 13 13-17 17-18 18-19 19-20 A. INTRODUZIONE La presente è la seconda delle relazioni che la Commissione è incaricata di presentare ogni anno al Parlamento europeo e al Consiglio sui progressi realizzati nel campo dello sviluppo, della convalida e dell'accettazione legale dei metodi alternativi alla sperimentazione animale a fini di prova dei cosmetici. "La Commissione presenta annualmente al Parlamento europeo e al Consiglio una relazione sui progressi realizzati in materia di sviluppo, convalida e accettazione legale di metodi atti a sostituire la sperimentazione animale. La relazione contiene dati precisi sul numero e il tipo di esperimenti concernenti prodotti cosmetici effettuati su animali. Gli Stati membri sono tenuti a raccogliere tali informazioni in aggiunta alla raccolta dì statistiche che loro incombe in virtù della direttiva 86/609/CEE concernente la protezione degli animali utilizzati a fini sperimentali o ad altri fini scientifici. La Commissione vigila in particolare sullo sviluppo, la convalida e l'accettazione legale dei metodi sperimentali che non fanno ricorso ad animali viventi. " (direttiva 93/35/CEE, art. 4) (i). Ad eccezione degli obiettivi, delle parti in causa e della nozione di rischio potenziale per la salute dell'uomo e che sono rimasti gli stessi, sono presi in esame i punti sviluppati nella prima relazione annuale (COM(94)606): Chiarimenti sulle tappe della convalida (B) Iniziative del 1995 (C) Lo stato di avanzamento dei lavori (D) Statistiche relative alla sperimentazione animale (E) Conclusioni (F) Prospettive (G) B. CHIARIMENTI SULLE TAPPE DELLA CONVALIDA L'obiettivo principale della Commissione rimane quello di incoraggiare lo sviluppo, e l'adozione legale di metodologie alternative atte ad offrire al la convalida consumatore un livello di protezione equivalente a quanto ottenuto tramite la gli studi sugli animali. La convalida è il processo attraverso il quale la pertinenza e l'affidabilità di un test sono definite in relazione ad un determinato obiettivo. Le tappe da superare per raggiungere questo risultato si rivelano più numerose e il procedimento si dimostra più complesso di quanto previsto inizialmente. Il primo seminario di Amden (Svizzera) è servito a determinare la base teorica essenziale del processo di convalida, ovvero: una convalida intralaboratorio, una valutazione interlaboraton, lo sviluppo di basi dati, la valutazione dei risultati. L'esperienza acquisita grazie agli studi di convalida effettuati successivamente al 1990 ha dimostrato la necessità di definire meglio i vari obiettivi degli studi di convalida e di integrare nuove tappe nel processo di valutazione dei nuovi test. L'ECVAM (Centro europeo per la convalida dei metodi alternativi), Unità del Centro comune di ricerca (ISPRA), è al centro delle discussioni e importanti contributi sono stati forniti per i seguenti settori. * * * aspetti pratici della convalida schema di convalida preliminare discussioni internazionali con 1TCCVAM (USA - Inter-Agency Coordinating Committee for tha Validation of Alternative Methods) e con l'OCSE (Organismo di cooperazione e sviluppo economico) sull'armonizzazione dei criteri di convalida e di accettazione. In occasione del secondo seminario di Amden (24-28 gennaio 1994), organizzato congiuntamente da ECVAM e ERGATT (il gruppo di ricerca europeo sulle prove alternative di tossicità) sono state formulate raccomandazioni — esposte nella relazione seminariale ECVAM n. 5 — riguardanti gli aspetti pratici e logistici della convalida dei test alternativi. Convalida dei metodi alternativi usati a fini diversi Gli studi di convalida dei test alternativi sono effettuati allo scopo di raggiungere quattro tipi di obiettivi principali. Si distinguono pertanto: 1. La convalida di procedure alternative per uso in studi non regolamentari. 2. 3. 4. La convalida di test alternativi nell'ambito di linee guida regolamentari. La convalida di test alternativi per sostituire le linee guida esistenti. La convalida di test alternativi destinati a fornire una parte delle informazioni richieste da linee guida regolamentari. Tappe nello valutazione dei nuovi test 1. Messa a punto di un test ed elaborazione di un protocollo. I criteri presi in considerazione in sede di sviluppo di un test comprendono principalmente la descrizione della base su cui si fonda il metodo, la definizione del suo obiettivo scientifico, la specificazione e la misurazione della finalità biologica, l'espressione e l'interpretazione dei risultati, attraverso un modello di predizione (PM). II modello di predizione deve consentire di convertire ogni risultato ottenuto mediante un metodo alternativo in una predizione corretta di tossicità in vivo. Il modello di predizione risulta critico ai fini della corretta e soddisfacente attuazione di un programma di convalida. Esso consente di provare una ipotesi chiaramente definita, di valutare obiettivamente le prestazioni del test e serve inoltre da guida per la pianificazione dello studio di convalida. 2. Preconvalida L'esperienza ha mostrato che i risultati di studi di convalida estesi e costosi possono essere compromessi se i loro gestori non insistono sul fatto che i protocolli di test ottimizzati e la prova della loro efficacia siano presentati prima dell'inizio di uno studio formale di convalida. Gli obiettivi della preconvalida, e uno schema del processo di preconvalida, sono descritti nella prima relazione della "Task Force Preconvalida ECVAM". La preconvalida si prefigge di: - ottimizzare e standardizzare il protocollo valutare la trasferibilità del metodo L'esercizio di preconvalida comprende tre fasi: un affinamento del protocollo, che implica una collaborazione tra il laboratorio che ha messo a punto il metodo e quello destinato per ottimizzarlo; il trasferimento del protocollo che implica la collaborazione tra i due primi laboratori e il laboratorio designato per il trasferimento; uno studio cieco che implica almeno la partecipazione di questi 3 laboratori destinati a studiare le prestazioni del protocollo. - - 3. Convalida La convalida comprende uno studio interlaboratori formale Le tappe principali sono: - - - - - - la descrizione dello studio la selezione dei test la selezione dei laboratori la selezione e la distribuzione dei materiali di test la raccolta e l'analisi dei risultati la valutazione dello studio. 4. Valutazione indipendente dell'esecuzione e dei risultati dello studio Tale valutazione comprende una valutazione oggettiva del valore dei test scientificamente convalidati per comparazione con altri test, tenendo conto degli obiettivi di convalida. 5. Processo in vista dell'accettazione legale. È essenziale che ogni nuovo metodo ritenuto adeguatamente convalidato quale sostituto di un metodo esistente abbia un riconoscimento internazionale il più ampio possibile. Per esempio, le linee guida OCSE sono di particolare rilievo al proposito, essendo usate per test eseguiti in paesi membri in Europa e in America settentrionale, nonché in Giappone, Australia e Nuova Zelanda. Inoltre, ai sensi dell'Accordo OCSE sulla reciproca accettazione dei dati, i paesi membri hanno convenuto di accettare dati che risultano da test eseguiti in conformità delle linee guida OCSE in materia di test, purché siano rispettati i principi della Buona prassi di laboratorio (GLP). L'OCSE ha definito una procedura per l'aggiornamento delle linee guida in materia di test l'introduzione di nuovi metodi di test. C. LE INIZIATIVE DEL 1995 PARTI IN CAUSA Promemoria, le parti in causa nel campo dell'incoraggiamento della ricerca, dello sviluppo e della convalida dei metodi alternativi sono: 1. L'UNIONE EUROPEA La Commissione europea: Vari servizi della Commissione sono impegnati in problemi relativi alla sperimentazione animale e allo sviluppo di metodi alternativi. La DG XI, Ambiente, sicurezza nucleare e protezione civile, gestisce la direttiva 86/609/CEE concernente la protezione degli animali impiegati a fini sperimentali o ad altri fini scientifici e la direttiva 67/548/CEE, sulla classificazione, l'imballaggio e l'etichettatura delle sostanze pericolose. // CCR, Centro comune di ricerca • ECVAM, Centro europeo per la convalida dei metodi alternativi • ESAC, Comitato scientifico consultivo dell'ECVAM • ECB, Ufficio europeo delle sostanze chimiche La DG XXIV: Politica dei consumatori • Unità 4, Politica di qualità e mercato dei prodotti, gestisce la direttiva "cosmetici" • CSC: Comitato scientifico di cosmetologia, comitato consultivo della Commissione. La DG XII, Scienza, ricerca e sviluppo sovvenziona programmi di ricerca: L'Industria europea COLIPA - Si tratta del Comitato di collegamento europeo delle industrie del settore dei cosmetici, dei prodotti da toilette e della profumeria, che ha posto in atto lo SCAAT • SCAAT - Steering Committee on Alternatives to Animal Testing (Comitato d'indirizzo sulle alternative alla sperimentazione animale), cura la supervisione degli studi di convalida del COLIPA e il coordinamento degli sforzi di convalida dell'industria dei cosmetici, su base mondiale. 2. USA CTFA - Cosmetic, toiletry and fragrance association, appoggia le azioni del CAAT 3. GIAPPONE JCIA - Japanese Cosmetic Industry Association 4. ORGANIZZAZIONE PER LO SVILUPPO E LA COOPERAZIONE ECONOMICA (OCSE) L'OCSE pubblica linee guida in materia di test, approvate per consenso dai paesi membri. Esse sono quasi identiche ai metodi di test dell'allegato V dell'UE, e in combinazione col principio di reciproca accettazione dei dati, danno l'opportunità di un'armonizzazione internazionale e di un approccio razionale all'applicazione delle Tre R. LE INIZIATIVE 1. UNIONE EUROPEA DGXI La DG XI, Ambiente, sicurezza nucleare e protezione civile ha convenuto con gli Stati membri il migliore orientamento da adottare per raccogliere, su base biennale, i dati statistici imposti dagli articoli 13 e 26 della direttiva 86/609/CEE, riguardante la protezione degli animali impiegati a fini sperimentali o a ad altri fini scientifici. Le tabelle che devono essere completate dagli Stati membri a tal fine riguardano i cosmetici a livello globale. La DG XI è inoltre responsabile della direttiva 67/548/CEE e dei metodi di test dell'UE, in base a quanto esposto in dettaglio nella direttiva della Commissione 87/302/CEE e nell'allegato alla direttiva della Commissione 92/69/CEE (Parte B - Metodi per la determinazione della tossicità). La DG XI ha sostenuto lo studio internazionale UE/HO di convalida sulle alternative al test Draize di irritazione degli occhi, nonché lo studio internazionale UE/COLIPA di convalida sulla fototossicità in vitro. CCR ECVAM (Centro europeo per la convalida dei metodi alternativi) è al servizio di tutte le DG interessate alla problematica dei metodi alternativi. ECVAM è stato costituito dalla Commissione europea in conformità di una Comunicazione dalla Commissione al Consiglio e al Parlamento europeo dell'ottobre del 1991, nonché a seguito dell'articolo 23 della direttiva 86/609/CEE, che afferma quanto segue: "La Commissione e gli Stati membri dovrebbero incoraggiare la ricerca intesa a sviluppare e rendere più efficaci tecniche alternative atte a fornire lo stesso livello d'informazione degli esperimenti su animali ma che prevedano l'utilizzo di un minor numero di animali o comportino procedimenti meno dolorosi e prendono tutte le misure che ritengono opportune per favorire la ricerca in questo settore. La Commissione e gli Stati membri seguono l'evoluzione dei metodi sperimentali". ECVAM è stato costituito per: 1. 2. coordinare la convalida dei metodi alternativi a livello di Unione europea; fungere da punto focale per lo scambio di informazioni sullo sviluppo dei metodi alternativi; costituire, mantenere e gestire una banca dati sulle procedure alternativi; promuovere il dialogo tra legislatori, industrie, scienziati biomedici, organizzazioni dei consumatori e gruppi di protezione degli animali, nell'ottica di sviluppare, convalidare e riconoscere a livello internazionale metodi alternativi per i test. 3. 4. Il simposio di inaugurazione di ECVAM organizzato a Ispra il 18 ottobre 1994 era dedicato alla convalida di metodi alternativi di sostituzione. In occasione del simposio è stato discusso il ruolo di ECVAM in sede di elaborazione, convalida e accettazione di test alternativi e di strategie di sperimentazione, che può essere riassunto come segue: - - contributo all'elaborazione di linee direttrici da parte del processo stesso di convalida, dei suoi rapporti con lo sviluppo e dall'accettazione di test pertinenti e affidabili per obiettivi specifici; individuare le priorità tenendo conto del progresso scientifico in particolari campi; assicurarsi che i testi alternativi implichino finalità biologiche semplici, distine e ben definite, con sufficiente comprensione delle loro basi meccanicistiche; promuovere un approccio pluridisciplinare per l'elaborazione di strategie di test integrati che comportino rapporti quantitativi struttura/attività (QSAR), la biocinetica e i modelli cellulari e tessutali; affrontare le difficoltà derivanti dalla mancanza di materiali sperimentali con dati di qualità in vivo combinati; incoraggiare una rivalutazione delle attuali linee direttrici e procedure regolamentari; raggiungere un consenso lavorando con le adeguate organizzazioni governative, industriali, accademiche e altre; stabilire criteri di convalida, valutazione indipendente dei risultati degli studi di convalida o di accettazione legale di test alternativi e delle strategie sperimentali, tramite cooperazione attiva con, per esempio, l'OCSE e l'ICCVAM (Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods negli USA). Fino ad oggi, ECVAM ha organizzato seminari relativi allo sviluppo e alla convalida di test alternativi ed ha pubblicato le relazioni di 13 di tali seminari. Per ragioni politiche, ECVAM ha riconosciuto una priorità alle alternative per i test dei cosmetici. Le relazioni che presentano un interesse diretto per la valutazione della sicurezza dei cosmetici sono: - relazione 2 - relazione 5 - relazione 6 - relazione 7 - - In vitro phototoxicity testing (1994) Practical aspects of the validation of toxicity tests procedures (1995) A prevalidation study on in vitro skin corrosivity testing (1995) - Development and validation of non-animal tests and testing strategies: the identification of a coordinated response to the challenge and the opportunity presented by the sixth amendment to the Cosmetic directive (1995) - relazione 8 - The integrated use of alternative approaches for predicting toxic hazard (1995) - relazione 11 - relazione 13 - The three Rs: The Way Forward (1995) - Methods for assessing percutaneous absorption (1995) Nel 1995 sono stati pubblicati due fascicoli sui temi seguenti convalida dei metodi altemativi di sperimentazione (comunicazione congiunta di ECVAM e ECB) prima relazione della Task force di preconvalida dell'ECVAM. Tra i temi prioritari di ECVAM per gli anni 1995-1998 dobbiamo inoltre ricordare: la tossicità dello sviluppo il metabolismo la corrosività la fototossicità la penetrazione dermica irritazione oculare e dermica sensibilizzazione. L'ECB (Ufficio europeo delle sostanze chimiche) fornisce sostegno tecnico e scientifico alla DG XI in materia di classificazione ed etichettatura della sostanze pericolose, notifica di nuove sostanze, sostanze chimiche esistenti, controllo dell'importazione ed esportazione delle sostanze pericolose, e metodi di prova (ai sensi dell'allegato V della direttiva 67/548/CEE). Tra ECB ed ECVAM si sta sviluppando un'efficace collegamento in relazione ai metodi di prova alternativi e sostitutivi, nonché alle modifiche delle procedure relative agli animali la sofferenza di animali intese a ridurre necessariamente utilizzati in conformità di regolamenti e linee guida. il numero di animali richiesti o ridurre DG XXIV/CSC La DG XXIV - Politica dei consumatori, che gestisce la direttiva "cosmetici" (direttiva 76/768/CEE), ha proseguito il suo ruolo motore ed ha moltiplicato le azioni allo scopo di rispettare al meglio le disposizioni della direttiva 93/35/CEE nei termini previsti. 8 Se non sono stati scientificamente convalidati e legalmente accettati metodi alternativi, la DG XXTV è incaricata di preparare per conto della Commissione un progetto recante provvedimenti per rinviare la scadenza di divieto dei test su animali secondo la procedura stabilita dal Comitato per l'adeguamento al progresso tecnico (art. 10, dir. 768/CEE). Tale Comitato (C. A. P. T. ) è composto di rappresentanti degli Stati membri ed è presieduto da un rappresentante della Commissione. Quest'ultimo trasmette al Comitato un progetto in cui sono indicati i provvedimenti da adottare. Il parere è formulato a maggioranza qualificata. Conformemente alla nuova procedura di codecisione, il Parlamento europeo sarà informato contemporaneamente e nelle stesse condizioni di ogni progetto relativo a provvedimenti da adottare, trasmesso al CAPT. "Qualora non siano stati compiuti progressi sufficienti nella messa a punto di metodi atti a sostituire in modo soddisfacente la sperimentazione sugli animali e segnatamente qualora, malgrado ogni ragionevole sforzo, non sia stato scientificamente dimostrato che i metodi sperimentali alternativi offrono al consumatore un grado di protezione equivalente, tenuto conto delle direttive dell'OCSE in materia di prove di tossicità, la Commissione presenta, al più tardi il 1° gennaio 1997, un progetto di misure miranti a rinviare la data di attuazione della presente disposizione di un periodo di tempo sufficiente e comunque non inferiore a due anni, conformemente alla procedura di cui all'articolo 10. Prima di proporre i progetti in questione, la Commissione consulta il Comitato scientifico di cosmetologia" (art. 4(i) della direttiva 76/768/CEE, modificata dalla direttiva 93/35/CEE)". La DG XXTV ha varie volte pregato gli Stati membri di rispettare i loro obblighi riguardo alla raccolta di dati precisi sugli esperimenti condotti su animali per ingredienti e prodotti cosmetici finiti. Le tabelle che dovevano essere compilate dagli Stati membri per rispettare gli obblighi della direttiva 86/609 riguardano i cosmetici ad un livello globale. Tuttavia, la raccolta di dati statistici imposta dalla direttiva 93/35 va oltre questi dati di base per quanto riguarda i cosmetici ed è stato chiesto agli Stati membri di trasmettere risultati più dettagliati a scadenze annuali (cfr. tabella in allegato). La DG XXIV ha mantenuto rapporti regolari principalmente con la DG XI ed ECVAM ed ha facilitato la comunicazione fra tutte le parti in causa. CSC: H Comitato scientifico di cosmetologia, comitato consultivo della Commissione, è incaricato di trasmettere un parere scientifico alla DG XXIV sull'applicabilità dei metodi altemativi, convalidati nel processo di valutazione della sicurezza dei cosmetici per uso umano. D sottocomitato Metodi alternativi/linee guida del CSC ha organizzato due riunioni di lavoro (2 febbraio, 11 maggio) e due riunioni in comune con SCAAT/COLIPA (19 settembre, 1° dicembre) durante le quali sono state sviluppate le seguenti azioni: 1. Valutazione dei documenti e dei fascicoli presentati da COLIPA Fotoirritazione in vitro (progetto UE/COLIPA) L'analisi dei dati comunicati da COLIPA, e cioè dei risultati parziali pubblicati nelle riviste scientifiche, della fase di preconvalida e un'informazione parziale sulla fase II, degli studi di convalida non ha consentito al CSC di esprimere un'opinione scientifica sull'insieme del progetto. Il CSC sottolinea comunque che i modelli animali risultano inadeguati a formulare previsioni sugli effetti fototossici sull'uomo e considera che lo studio del potenziale fototossico "in vitro" sia una passo importante nel processo di valutazione della sicurezza dei cosmetici che contengono filtri UV. Assorbimento percutaneo in vitro (COLIPA) In base all'analisi dei documenti presentati da COLIPA, e cioè delle linee guida per i test di assorbimento percutaneo in vitro, dei protocolli standard e di una panoramica generale delle correlazioni in vitro/in vivo, il CSC raccomanda di presentare la metodologia di assorbimento percutaneo "in vitro" in modo uniforme e di completarla con i risultati intralaboratorio e interlaboratori ottenuti su materiali di test e veicoli scelti convenientemente. Fotomutagenicità (COLIPA) Le raccomandazioni di COLIPA nella relazione finale trasmessa al CSC, indicano i criteri sui quali basarsi nella definizione dei protocolli di sperimentazione. Il CSC esprime il suo rammarico per non aver potuto ancora fondare la valutazione del potenziale fotomutagenico dei filtri UV su metodi debitamente convalidati, malgrado il fatto di aver messo a punto criteri generali per la realizzazione di test di fotomutagenicità nel 1990 (SPC/803/90). 2. Informazioni richieste per la valutazione scientifica degli studi di convalida dei test alternativi, in vista del loro impiego per la definizione della sicurezza dei cosmetici Prendendo in considerazione i problemi relativi alla convalida delle metodologie alternative, il CSC ha ritenuto pertinente redigere un documento che costituisce un contributo diretto agli studi futuri di convalida. Nella relazione si tiene conto degli aspetti qualitativi e quantitativi dei problemi di convalida. I criteri prescelti: riguardano la convalida scientifica dei test consentono di misurare un grado di tossicità sono applicabili agli ingredienti cosmetici comportano la definizione della terminologia statistica. 10 È posta in evidenza la necessità di fornire le prove dell'ottimizzazione dei protocolli e di formalizzare la relazione fra i dati in vitro e quelli in vivo, sotto forma di una relazione matematica. DGXII La DG XII, Scienza, ricerca e sviluppo sovvenziona programmi di ricerca che comprendono in particolare lo sviluppo e la convalida di metodi alternativi, in conformità della decisione n. 1110/94/CE del Parlamento europeo e del Consiglio del 26 aprile 1994 relativa al IV Programma quadro per la ricerca e lo sviluppo tecnologico, che riporta le seguenti, chiare istruzioni: "Ogni volta che è possibile, la sperimentazione e i testi sugli animali devono essere sostituiti da metodi in vitro o altri metodi. ". La DG XII ha sostenuto e sostiene diversi programmi sullo sviluppo e la convalida di test in vitro. Alcuni progetti possono risultare utili al settore dei cosmetici: BRIDGE - Relazione finale (EUR 15777, pubblicata nel 1995) Sviluppo di un test predittivo in vitro per il rilevamento dei composti con effetto di sensibilizzazione. BIOTECH (1992-1994) Alcuni progetti riguardano la tossicologia dello sviluppo in vitro. BIOTECH (1994-1998) Il programma di lavoro prevede attività di ricerca prenormativa sulle alternative in vitro alla sperimentazione animale in farmatossicologia. IVTIP (In Vitro Testing Industrial Platform): forum organizzato pe migliorare i contatti tra produttori e utenti di tecnologia. Nel 1995 sono state organizzate due riunioni, relative al progresso effettuato nell'ambito del IV Programma quadro e ad una rassegna dei progressi in materia di convalida. COLIPA/SCAAT SCAAT ha creato, per ciascun settore d'investigazione, gruppi di lavoro specifici che riuniscono vari esperti ai fini della realizzazione della convalida. Un simposio scientifico intemazionale sulle alternative alla sperimentazione animale, organizzata da COLIPA ha riunito a Bruxelles il 29 e 30 novembre 1995 i rappresentanti dell'industria, della comunità scientifica, della Commissione e del Parlamento europeo, nonché delle società di protezione degli animali. La prima sessione dedicata alla CONVALIDA ha posto in evidenza il ruolo critico dei modelli di predizione e ha fatto il punto degli studi di convalida in corso, sulla fotoirritazione e sull'irritazione oculare. La sessione è terminata con una tavola rotonda sulle prospettive di orientamento normativo. 11 La seconda sessione, dedicata allo SVILUPPO, comprendeva presentazioni sull'assorbimento percutaneo, sulla compatibilità e sulla sensibilizzazione cutanea La terza sessione, sul tema della VALUTAZIONE DELLA SICUREZZA ha trattato le iniziative prese dal CSC e l'orientamento delle autorità responsabili della normativa nel Regno Unito e in Germania. È stata quindi sottolineata l'importanza della messa a disposizione dei dati scientifici su cui si basano gli studi e le strategie inteme dell'industria cosmetica a fini di valutazione della sicurezza del prodotto finito I vari interventi sono stati completati da una mostra di manifesti. Nell'ambito di tale mostra, è stato posto a disposizione dei partecipanti un opuscolo in cui è schematizzato l'orientamento dellTFAW (International fund for Animal Welfare). Dato che appare con chiarezza che non è possibile sostituire un test su animali con un semplice test in vitro, l'IFAW presenta una strategia articolata su varie tappe, basata essenzialmente su alternative di sostituzione che privilegiano l'impiego di cellule di tessuti di origine umana, escludendo il ricorso ad ogni sperimentazione animale in vivo e a test in vivo su volontari umani. II simposio ha posto in evidenza il ruolo rilevante di COLIPA (Industria cosmetica europea) nell'organizzazione dei lavori di ricerca, sviluppo e convalida di metodi alternativi. Gli sforzi posti in atto dalle grandi società europee di cosmetici sono assai onerosi rispetto al numero di animali impiegati nella sperimentazione dei cosmetici e le conoscenze acquisite rivestono una utilità fondamentale per le altre industrie. Inoltre, il simposio ha contribuito a informare in modo scientifico ed esatto le varie parti in causa ed ha aperto un interessante confronto di opinioni. Le conclusioni richiamano un orientamento comune dell'industria e della Commissione inteso a sostituire rapidamente i test sugli animali sotto il profilo della compatibilità cutanea, della fotoirritazione e dell'assorbimento percutaneo. 2. USA Il governo USA auspica una cooperazione internazionale per raccomandare un orientamento e definire i criteri di adozione normativa di nuovi metodi alternativi, che stabiliscano con chiarezza le condizioni d'impiego dei metodi stessi (finalità biologiche, pertinenza per classi di sostanze, ecc. ). ICCVAM ha organizzato, nel 1995 ad Arlington, Virginia, un seminario sulla convalida e l'accettazione regolamentare di metodi alternativi di prova tossicologica, sponsorizzato dall'Istituto nazionale delle scienze della salute ambientale (NIEHS) e dal Programma nazionale di tossicologia (NTP). Il seminario si prefiggeva di discutere il progetto di relazione dell'ICCVAM contenente raccomandazioni in materia di criteri e processi di convalida e accettazione regolamentare di metodi nuovi e riveduti di prova tossicologica. La FDA (Food and Drug Administration: Ente alimenti e farmaci) è l'agenzia USA responsabile in materia di sicurezza dei cosmetici. La FDA mantiene rapporti interattivi con le agenzie pubbliche e private che si occupano dello sviluppo e della convalida dei test alternativi e si concentra su metodi che generano solidi dati scientifici. La FDA esprime inquietudini per quanto riguarda il divieto della sperimentazione animale nell'attuazione della direttiva 93/35/CEE. Taluni cosmetici prodotti nell'UE 12 potrebbero non soddisfare le condizioni di sicurezza (per la salute) definite dall'US-FDCA (Food, Drug and Cosmetic Act: Legge sugli alimenti, i farmaci e i cosmetici). 3. GIAPPONE Il Ministero giapponese per la salute e il benessere è responsabile per i test e le pertinenti linee guida in Giappone. I gruppi di ricerca giapponesi sono implicati in particolare nella convalida dei test alternativi al test Draize. L'accettazione delle alternative dipende dal loro impiego specifico nella valutazione dell'irritazione oculare (screening o sostituzione; test individuale o batteria di test). La JCIA prevede che sarà difficile raccomandare a fini di prove normative per la valutazione della sicurezza dei cosmetici un test o una batteria di test, il cui grado di predizione sarebbe inferiore a quello dei metodi in vitro. 4. OCSE Nell'ottobre del 1994, la 5a riunione dei Coordinatori nazionali del Programma OCSE di linee guida in materia di test ha convenuto sull'opportunità di tentare di armonizzare a livello intemazionale i diversi concetti pubblicati e suggeriti per la convalida dei metodi di prova alternativi. Nell'ottica del dibattito intemazionale in materia, è stato ritenuto che per l'OCSE fosse il momento di inserirvisi e proporre una piattaforma per tutte le parti in causa, tale da rendere possibile pervenire ad un consenso intemazionale sui criteri di convalida e accettazione. I Coordinatori nazionali hanno sottolineato chele proposte esistenti possono essere utilizzate come base per un approccio accettabile a livello intemazionale, piuttosto che per lo sviluppo di un altro concetto. Al proposito è stato oggetto di riconoscimento positivo l'operato di centri come il CAAT (Centro di alternative alle prove sugli animali della Johns Hopkins University) negli USA, ECVAM nell'UE, ERGATT e vari centri e comitati nazionali (per esempio FRAME nel Regno Unito, IRAG e ICCVAM negli USA, NCA nei Paesi Bassi, SIAT in Svizzera, ZIBET in Germania). I Coordinatori nazionali hanno convenuto che un Seminario OCSE sarebbe l'approccio migliore, offrendo a tutte le parti interessate in materia ampie opportunità di discussione e di ricerca del consenso. Inoltre, è stato ritenuto di rilevanza decisiva il fatto che i paesi membri designino tra l'altro persone con responsabilità nel settore normativo. La Svezia si è offerta per ospitare il seminario. Nel gennaio del 1995 è stato costituito un Comitato d'indirizzo incaricato di consigliare il Segretariato OCSE in ordine alla portata e alla struttura del seminario, nonché di assistere nello sviluppo del programam del seminario, previsto per il 22-24 gennaio 1996 a Solna, Svezia. ECVAM e ZEBET sono rappresentati nel Comitato d'indirizzo. D. STATO DI AVANZAMENTO DEI LAVORI METODI IN CORSO DI SVILUPPO E DI CONVALIDA 13 Sensibilizzazione cutanea La sensibilizzazione costituisce un settore di ricerca considerevole e di estrema rilevanza per la sicurezza dei cosmetici. Un orientamento interessante per valutare la sensibilizzazione cutanea in vitro è stato presentato in occasione del simposio organizzato da COLIPA (29-30 novembre 1995). Nel 1995 si è tenuto un seminario ECVAM sulla la sensibilizzazione cutanea, la cui relazione sarà pubblicata nel 1996. La struttura chimica e il potenziale sensibilizzante di vari composti sono stati esaminati diffusamente e i sistemi informatici esperti come DEREK (Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge) consentono di paragonare sullo schermo l'informazione strutturale e la descrizione delle sottostrutture molecolari o degli allarmi strutturali, correlati al potenziale sensibilizzante. Un orientamento predittivo può essere basato sulla misurazione dei segnali molecolari indotti da sostanze sensibilizzanti su colture di cellule. In particolare in questo settore è opportuno sottolineare che la predizione del potenziale di sensibilizzazione nell'uomo rimane un problema di rilievo in ragione della variabilità individuale delle risposte. Fotomutagenicità - Convalida (COLIPA) Dal 1990 in poi, COLIPA ha presentato fascicoli di studio sui filtri UV contenenti dati di fotomutagenicità ottenuti in base a vari tipi di test. Questa istanza ha organizzato un ring test per la definizione di un protocollo adatto che prevede l'impiego di due sostanze aventi un potenziale fotomutageni co noto, attivate dagli UVA, nonché vari ceppi batterici. I risultati di questo ring test hanno consentito di mettere a punto raccomandazioni riguardanti i criteri di scelta dei ceppi batterici o delle colture cellulari, il simulatore solare, la tecnica di irradiazione dei campioni, le dosi di irraggiamento singolo o molteplice UV, le dosi di sostanze da sperimentare, l'impiego di controlli positivi. Assorbimento percutaneo ECVAM, COLIPA e OCSE hanno cooperato per facilitare l'adozione intemazionale di una linea guida in materia di test di assorbimento percutaneo in vitro. Fotoirritazione/fototossicità; convalida: fase II (UE/COLIPA) ECVAM e la DG XI sono rappresentati nel Comitato direttivo dello studio, coordinato da ZEBET, che esamina la possibilità di uno studio supplementare di convalida destinato a predire il potenziale fotoirritante dei filtri UV. Nella prima fase (preconvalida), l'analisi dei risultati ottenuti con un test di viabilità cellulare ha consentito di determinare un fattore limite che distingue le sostanze fotoirritanti da quelle che non lo sono. L'obiettivo della seconda fase (convalida) programmata come prova cieca era di determinare se un test di tossicità cellulare e un test di misurazione dei danni cellulari, combinato RBC2 impiegati tratta del NRU1 correntemente e del test (si NRU: Neutral red uptake assay, impiega le cellule come bersaglio e la tossicità cellulare come finalità 2RBC. biologica. Red blood cell haemolysis test, valuta i danni alle membrane cellulari. 14 (fotoemolisi+ossidazione dell'emoglobina)) sono in grado di predire correttamente il potenziale fotoirritante per l'uomo di 32 sostanze chimiche, somministrate nell'uomo per via sistemica o per via topica. I risultati preliminari della seconda fase, portata a termine nel 1995, sono limitati al test NRU impiegato in tutti i laboratori. Il protocollo RBC è stato impiegato soltanto in tre laboratori. Ulteriori valutazioni statistiche sono svolte da un biostatistico indipendente e saranno disponibili nel corso del primo semestre 1996. Irritazione oculare - Relazione finale dello studio EU/HO sui metodi alternativi al test di irritazione oculare di Draize Questo studio aveva lo scopo di stabilire se nove test alternativi, da soli o in combinazione, potevano sostituire il test di Draize per materiali di test fortemente irritanti o per valutare il potenziale irritante di sostanze chimiche, con o senza rapporto con la classe chimica e in tutta la gamma dei potenziali misurabili. Sono state così analizzate indipendentemente 60 sostanze chimiche, in 37 laboratori. I risultati sono stati comparati con i MMAS (Modified maximum average score) ottenuti con il test di Draize e sottoposti a valutazione statistica. Ad eccezione della predizione del potenziale irritante dei surfattanti, nessuno dei nove test ha raggiunto l'obiettivo previsto. Lo studio ha arrecato numerose, preziose lezioni, di cui si è tenuto conto nella pianificazione dello studio COLIPA. Esse hanno inoltre condotto ad un seminario ECVAM sugli aspetti pratici della convalida, nonché allo sviluppo di uno schema di preconvalida ECVAM. La variabilità dei dati in vivo è stata individuata come ostacolo di rilievo al raggiungimento di rilevanza e affidabilità nei test in vivo. Irritazione oculare: convalida (COLIPA) L'esercizio di convalida è stato realizzato su 23 ingredienti cosmetici (surfattanti, alcoli, conservatori), 20 dei quali sono comuni allo studio EU/HO sopra citato e su 32 formulazioni cosmetiche (con un'ampia gamma di forme fìsicochimiche). I materiali di test sono stati sperimentati in vivo, conformemente alle linee guide dell'OCSE (OCSE405). Gli obiettivi specifici di questo studio erano di determinare se i dati ottenuti in base a 10 protocolli in vitro correntemente impiegati nell'industria cosmetica (di cui 5 valutati anche nello studio EU/HO): - - - dimostrano una correlazione accettabile con il MMAS (modified maximum average score) forniscono una correlazione accettabile con le notazioni individuali e il tempo di recupero, quali figurano nella linea guida OCSE 405 predicono correntemente il potenziale di irritazione oculare dell'occhio di coniglio in base ad algoritmi alternativi. 15 Per la prima volta in uno studio di convalida, sono stati definiti modelli di predizione (PM) prima dell'inizio dello studio. Essi definiscono esattamente le finalità biologiche ottenute per ciascun metodo in vitro e le modalità secondo quali convertire ciascuna finalità biologica in vitro in predizione di un potenziale di irritazione oculare. I PM impiegati in questo studio sono basati su dati storici disponibili per ingredienti e formulazioni di interesse per l'industria cosmetica e in particolare per sostanze aventi un potenziale di irritazione da modesto a moderato. Il programma non ha consentito una convalida completa per via del numero ristretto di laboratori che hanno partecipato ad esperimenti particolari del programma. Nessuno dei metodi sperimentati può ancora sostituire validamente il test di irritazione oculare di Draize. L'affidabilità dei PM è stata valutata determinando se i risultati interiaboratori erano riproducibili e se i dati erano distribuiti negli intervalli di predizione dei PM predefiniti. Il test RBC mostra una buona riproducibilità interlaboratori, soddisfacendo inoltre i criteri di affidabilità. Tre dei protocolli sperimentati si conformano ragionevolmente ai loro modelli di predizione (FLT3, RBC, TEA4) ma sono necessari lavori supplementari per risolvere molteplici questioni tecniche associate con i PM, prima che possano essere stabilite conclusioni definitive sulle loro prestazioni. Questo studio di convalida dimostra l'importanza dei "dati in vivo di buona qualità". I dati in vivo disponibili sono adeguati alla valutazione del rischio, tuttavia, per paragonare i dati in vivo e in vitro le due serie di dati dovrebbero teoricamente presentare una variabilità quanto più piccola possibile, per consentire una valutazione statistica precisa. L'esperienza ha dimostrato che ciò non avviene sempre. L'esame dei risultati indica che taluni dei PM potrebbero essere affinati e sottoposti a sperimentazione in un prossimo studio. Corrosività cutanea: preconvalida (ECVAM) I tre test di corrosività cutanea allo studio sono oggetto di una valutazione e di un lavoro di ottimizzazione (TER= dosaggio della resistenza elettrica transcutanea riferito alla pelle dei ratti, CORROSITEX™, Skin2™ e EPISKJN™) nell'intento di elaborare un programma di convalida formale. Compatibilità cutanea (COLIPA) FLT: 4TEA: Tissue equivalent assay, misura il tempo necessario alla diminuzione del 50% della vitalità cellulare Fluoresceine leakage test, misura i danni causati ad una barriera cellulare. di cellule umane in colture comuni. 16 La compatibilità cutanea si definisce quale l'assenza di irritazione cutanea in condizioni normali di impiego e in condizioni ragionevolmente prevedibili di cattivo impiego. Sette compagnie affiliate alla COLIPA valutano la compatibilità cutanea dei loro prodotti finiti per l'uomo, in condizioni controllate, perché il potenziale irritante della maggior parte dei prodotti cosmetici è assai basso. COLIPA ha messo a punto linee guida per la valutazione della compatibilità dei prodotti cosmetici finiti per la pelle umana: - - tenendo conto di esigenze etiche: gli studi sull'uomo devono essere condotti coerentemente con la Dichiarazione di Helsinki (1964, 1989); è essenziale un orientamento prudente della sperimentazione, tappa dopo tappa; precisando la necessità di una conoscenza preliminare della composizione e della stabilità dei prodotti sperimentati, nonché di una valutazione preventiva dei dati di tossicità degli ingredienti che rientrano nella composizione dei prodotti. Sono attualmente in corso di elaborazione linee guida sulla compatibilità cutanea dei prodotti cosmetici. Studi su volontari umani (ECVAM) Tra i metodi sostitutivi delle prove su animali sono spesso citati anche gli studi su volontari umani. I problemi di ordine etico, giuridico, logistico, scientifico e di sicurezza connessi a simili studi sono all'esame dell'ECVAM, in collaborazione con l'università di Pavia, l'università di Nottingham e diverse imprese del settore cosmetico. E. STATISTICHE SULLA SPERIMENTAZIONE ANIMALE La raccolta dei dati sul numero di animali utilizzati a fini sperimentali o altri fini scientifici in applicazione degli articoli 13 e 26 della direttiva 86/609/CEE non è impostata su base annuale. Ciò spiega in parte le difficoltà incontrate nel raccogliere annualmente i dati relativi specificamente agli ingredienti e prodotti cosmetici. La Commissione ha comunque insistito a più riprese presso gli Stati membri per ottenere le statistiche richieste, e ciò è stato ribadito anche nelle attività della DG XXIV e della DG XI. 1) 2) 3) 8 Stati membri hanno dichiarato che sul loro territorio non sono effettuati test su animali per i prodotti cosmetici finali (Italia, Grecia, Belgio, Irlanda, Svezia, Finlandia, Lussemburgo, Germania). 6 Stati membri hanno dichiarato che sul loro territorio non sono effettuati test su animali per ingredienti cosmetici (Grecia, Paesi Bassi, Irlanda, Svezia, Finlandia, Lussemburgo). Solo 3 Stati membri (Austria, Francia, Regno Unito) hanno comunicato dati sul numero di animali utilizzati, precisando talora che le cifre non sono suscettibili d'interpretazione e che permangono incertezze sulla loro verità. In siffatte circostanze, 3 17 la presente relazione non può riportare tabelle comparative con dati numerici, che darebbero un'immagine erronea e falsa della realtà. 4) Per quanto riguarda le dichiarazioni di assenza dei test, occorre inoltre segnalare che taluni Stati membri, non produttori d'ingredienti, possono utilizzare ingredienti testati in altri Stati membri o in paesi terzi e che taluni ingredienti utilizzati per i prodotti cosmetici possono essere stati testali per altri fini. La Commissione esprime vivo rammarico per la mancata disponibilità attuale di dati più precisi, ma per la loro raccolta essa dipende dagli Stati membri. F. CONCLUSIONI I progressi registrati nel 1995 per i metodi di prova alternativi e la loro convalida possono essere riassunti come segue: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. La relazione sulla Fase II dello studio intemazionale di convalida UE/COLIPA sui test in vitro per la fototossicità (potere fotoirritante) sarà resa disponibile nel 1996, ma è già chiaro che la convalida del test di cultura cellulare NRU ha avuto ottimo esito. Gli addetti allo studio confidano che si possa produrre una linea guida OCSE accettabile entro due anni, ovvero dopo la pubblicazione della relazione finale e dopo aver proceduto a lievi affinamenti ai protocolli. L'esperienza accumulata dall'Industria cosmetica europea nel settore critico dell'assorbimento cutaneo si è concretizzata in una proposta di linea guida OCSE per un test in vitro. ECVAM e COLIPA lavorano con l'OCSE e altri al fine di agevolare l'adozione da parte dei paesi membri OCSE di una linea guida per l'assorbimento percutaneo in vitro. I risultati dello studio intemazionale di convalida UE/HO delle alternative al test di irritazione oculare di Draize sono deludenti, dato che nessuno dei test ha raggiunto gli obiettivi dello studio. Tuttavia, lo studio ha permesso l'apprendimento di molte lezioni preziose, che consentiranno di migliorare sensibilmente la qualità degli studi futuri di convalida. Sono stati ottenuti risultati più promettenti, per una gamma di materiali ridotta rispetto allo studio UE/HO, nella prima fase dello studio di convalida COLIPA delle alternative al test di irritazione oculare di Draize, che ha mostrato l'utilità di inserire modelli di predizione nei protocolli di test. A seguito dello studio COLIPA, sono state formulate raccomandazioni per i criteri da rispettare nella definizione dei protocolli di test di fotomutagenicità in vitro. A seguito di un altra iniziativa COLIPA, sono state elaborate linee guida per i test sulla compatibilità cutanea di prodotti cosmetici e loro ingredienti sull'uomo. Il ricorso a volontari umani quale alternativa di sostituzione merita ulteriore esame, ma si deve sottolineare che studi simili devono essere condotti solo dopo che i 18 risultati di precedenti studi in vivo e/o in vitro permettono di evitare il rischio di eventuali conseguenze gravi. La convalida si è rivelata più difficile e più onerosa ~ in termini di tempo e di denaro ~ di quanto previsto. Ancora in corso è il dibattito su cosa di fatto significhi la convalida e su come si possa definire la rilevanza e affidabilità di metodi alternativi. ECVAM è al centro del dibattito, e in diversi modi sono stati fatti contributi di particolare rilievo. Lo schema di preconvalida ECVAM, attualmente sottoposto a valutazione intemazionale, dovrebbe migliorare il tasso di successo degli studi di convalida e ridurre il tempo necessario ad effettuarli, nonché i loro costi. 8. 9. 10. In ambito europeo, ma anche con gli USA e il Giappone, hanno avuto luogo discussioni la convalida e l'accettazione di metodi di prova alternativi di sostituzione. intemazionali sull'armonizzazione dei criteri per G. PROSPETTIVE 1. 2. 3. 4. 5. 6. L'emergere di aspettative più realistiche nei confronti del processo di convalida, e il successo delle discussioni internazionali sui criteri per la convalida e l'accettazione di metodi alternativi di sostituzione dovrebbero condurre in futuro a progressi considerevoli. Dopo la conclusione di un ulteriore, piccolo studio sulle sostanze chimiche di particolare interesse per il CSC, è lecito aspettarsi la produzione di un progetto di linee guida normative in materia di testi in vitro di fototossicità, da sottoporre all'accettazione delle autorità normative. Si auspica che nuove linee guida in materia di test in vitro dell'assorbimento percutaneo siano accettate in tempi brevi dagli Stati membri dell'UE e dai paesi membri dell'OCSE. È probabile un'accelerazione del progresso verso lo sviluppo di metodi in vitro standardizzati e appropriati per il rilevamento del potenziale di sensibilizzazione. Sarà essenziale riesaminare cosa ci si attende dai test (in vivo e in vitro) di irritazione oculare. Nel frattempo si potrebbe incoraggiare un approcci più flessibile alle prove, per esempio accettando la valutazione delle tossicità di nuovi prodotti e ingredienti per comparazione con le conoscenze relative ad appropriate sostanze di valutazione. Si potrebbe fare più ampio ricorso al fatto che la tolleranza oculare e cutanea dei prodotti cosmetici finali può essere valutata in vitro, purché siano rispettate le condizioni cruciali, cioè la precedente conoscenza dei dati di tossicità pertinenti gli ingredienti e le loro proprietà fisico-chimiche. Inoltre, la compatibilità dei prodotti cosmetici finali può essere valutata nel contesto di studi clinici rigorosamente controllati. 19 7. 8. Un buon esito dovrebbe caratterizzare Io studio di convalida ECVAM sui test di corrosività cutanea, che potrebbero essere in seguito utilizzati, per esempio, per fornire parte delle informazioni ritenute essenziali prima che siano giudicati ammissibili studi su volontari umani. Maggiore accento sarà posto sull'uso integrato di vari approcci diversi (per esempio, predizioni basate su elaborazioni informatiche, test in vitro) e di strategie gerarchiche di prova, per ridurre, affinare e sostituire il ricorso ad animali a fini sperimentali. D Sesto emendamento alla direttiva 76/768/CEE fornisce un'opportunità unica di considerevole progresso verso la sostituzione della sperimentazione animale nel settore dei cosmetici. D progresso è in corso, ma la sua prosecuzione dipende dal mantenimento di buone relazioni e di un'efficace collaborazione tra tutte le parti in causa, ovvero la Commissione e i suoi comitati consultivi, gli Stati membri, l'industria cosmetica e le autorità normative. 20 ISSN 0254-1505 COM(96) 365 def. DOCUMENTI IT 10 15 05 03 N. di catalogo : CB-CO-96-366-IT-C ISBN 92-78-07195-1 Ufficio delle pubblicazioni ufficiali delle Comunità europee L-2985 Lussemburgo X\


title: REGOLAMENTO (CE) N. 1442/96 DELLA COMMISSIONE del 24 luglio 1996 che fissa l'importo massimo della restituzione all'esportazione di zucchero bianco per la quarantanovesima gara parziale effettuata nell'ambito della gara permanente di cui al regolamento (CE) n. 1813/95

eurovoc_concepts:
award of contract
export refund
white sugar


title: REGULAMENTO (CE) Nº 1441/96 DA COMISSÃO de 24 de Julho de 1996 que fixa os preços representativos e os montantes dos direitos adicionais aplicáveis na importação dos melaços no sector do açúcar

eurovoc_concepts:
CCT duties
customs regulations
import
import policy
molasses
representative price


title: Règlement (CE) n 1523/96 de la Commission du 24 juillet 1996 modifiant le règlement (CEE) nº 1617/93 concernant l'application de l'article 85 paragraphe 3 du traité à certaines catégories d'accords, de décisions ou de pratiques concertées ayant pour objet la planification conjointe et la coordination des horaires, l'exploitation de services en commun, les consultations tarifaires pour le transport de passagers et de fret sur les services aériens réguliers et la répartition des créneaux horaires dans les aéroports

eurovoc_concepts:
air freight rate
air transport
competition
inter-company agreement
intra-EU transport
transport planning

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