title: Komisijas Direktīva 1999/27/EK (1999. gada 20. aprīlis) par Kopienas metožu ieviešanu amprolija, diklazurila un karbadoksa noteikšanai barībā, ar ko groza Direktīvu 71/250/EEK, 73/46/EEK, un atceļ Direktīvu 74/203/EEKDokuments attiecas uz EEZ

eurovoc_concepts:
analytical chemistry
animal nutrition
food additive
food inspection

text: 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 235 31999L0027 L 118/36 EIROPAS KOPIENU OFICIĀLAIS VĒSTNESIS 6. 5. 1999. KOMISIJAS DIREKTĪVA 1999/27/EK (1999. gada 20. aprīlis) par Kopienas metožu ieviešanu amprolija, diklazurila un karbadoksa noteikšanai barībā, ar ko groza Direktīvu 71/250/EEK, 73/46/EEK, un atceļ Direktīvu 74/203/EEK (Dokuments attiecas uz EEZ) (5) (6) tā kā ceturtajā Komisijas 1972. gada 5. decembra Direktīvā 73/46/EEK par Kopienas analīžu metodēm barības oficiālajai kontrolei (6), kurā jaunākie grozījumi izdarīti ar Direktīvu 98/54/EK (7), noteiktas attiecīgās analīžu metodes, tostarp sinepju eļļas un retinola (A vita- mīna) noteikšanas metode; tā kā, ņemot vērā zinātnes un tehnikas attīstību, minētā metode ir novecojusi un šim nolūkam kļuvusi nepiemērota; tā kā tādēļ attiecībā uz retinolu šī noteikšanas metode būtu jāatceļ; un tādu cietes lielmolekulāro tā kā piektajā Komisijas 1974. gada 25. marta Direktīvā 74/203/EEK par Kopienas analīžu metodēm barības oficiālajai kontrolei (8), kurā jaunākie grozījumi izdarīti ar Direktīvu 81/680/EEK (9), noteiktas analīžu metodes cietes noārdīšanās produktu analīzēm, ko satur barība, kuras sastāvā ir biešu atgriezumi, biešu mīkstums, kaltētas biešu galviņas un lapas, kartupeļu mīkstums, sausais raugs, produkti, kuri ir bagāti ar inulīnu vai dradžiem, amproliju, etopa- bātu, dinitolamīdu, nikarbazīnu un menadionu (K3 vita- mīna); tā kā, ņemot vērā zinātnes un tehnikas attīstību, visas minētajā direktīvā aprakstītās metodes ir noveco- jušas un tāpēc šim nolūkam kļuvušas nepiemērotas; tā kā tādēļ šī direktīva būtu jāatceļ; (7) tā kā šajā direktīvā paredzētie pasākumi Barības pastāvīgās komitejas atzinumu, saskan ar EIROPAS KOPIENU KOMISIJA, ņemot vērā Eiropas Kopienas dibināšanas līgumu, vērā Padomes 1970. gada ņemot jūlija Direktīvu 70/373/EEK par paraugu ņemšanas un analīžu Kopienas metožu ieviešanu barības oficiālajai kontrolei (1), kurā jaunākie grozījumi izdarīti ar Austrijas, Somijas un Zviedrijas Pievie- nošanās aktu, un jo īpaši tās 2. pantu, 20. tā kā Direktīva 70/373/EEK paredz, ka lai pārbaudītu, vai barība atbilst prasībām, kas izriet no normatīviem un administratīviem aktiem, kas reglamentē tās kvalitāti un sastāvu, oficiālo kontroli izmantojot Kopienas paraugu ņemšanas un analīžu metodes; jāveic, tā kā Padomes 1970. gada 23. novembra Direktīvā 70/524/EEK par barības piedevām (2), kurā jaunākie grozījumi izdarīti ar Komisijas Regulu 45/1999, noteikts, ka amprolija un diklazurila saturam jābūt norādītam attiecīgajā marķējumā gadījumos, kad šīs vielas pievieno premiksiem un barībai; tā kā karbadoksa lietošana barības piedevām aizliegta ar Komisijas 1998. gada 22. decembra Regulu 2788/98, ar ko groza Padomes Direktīvu 70/524/EEK par dažu barībai pievienojamo augšanas stimulatoru izmantošanas aizliegumu (3), un ir jāveic aizliegto vielu iespējamās izmantošanas oficiāla kontrole; (1) (2) (3) (4) tā kā jānosaka Kopienas analīžu metodes šo vielu notei- kšanai; IR PIEŅĒMUSI ŠO DIREKTĪVU. tā kā pirmajā Komisijas 1971. gada 15. jūnija Direktīvā 71/250/EEK, ar ko ievieš Kopienas analīžu metodes barības oficiālajai kontrolei (4), kurā jaunākie grozījumi izdarīti ar Direktīvu 98/54/EEK (5), noteiktas attiecīgās analīžu metodes, tostarp sinepju eļļas un teobromīna noteikšanas metode; tā kā, ņemot vērā zinātnes un tehnikas attīstību, minētās metodes ir novecojušas un šim nolūkam kļuvušas nepiemērotas; tā kā tādēļ šīs metodes būtu jāatceļ; 1. pants Dalībvalstis nosaka, ka amprolija, diklazurila un karbadoksa satura analīzes barības un premiksu oficiālajai kontrolei veic saskaņā ar šīs direktīvas pielikumā aprakstītajām metodēm. lpp. (1) OV L 170, 3. 8. 1970. , 2. (2) OV L 270, 14. 12. 1970. , 1. (3) OV L 6, 12. 1. 1999. , 3. lpp. (4) OV L 347, 23. 12. 1998. , 31. (5) OV L 155, 12. 7. 1971. , 13. lpp. lpp. lpp. (6) OV L 208, 24. 7. 1998. , 49. (7) OV L 83, 30. 3. 1973. , 21. (8) OV L 108, 22. 4. 1974. , 7. (9) OV L 246, 29. 8. 1981. , 32. lpp. lpp. lpp. lpp. 236 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. Direktīvu 71/250/EEK groza šādi: 2. pants 1. Direktīvas 1. pantā svītro vārdus “sinepju eļļa” un “teobro- mīns”. 2. Direktīvas pielikumā svītro 8. un 13. punktu. 3. pants Direktīvu 73/46/EEK groza šādi: 1. Direktīvā svītro 2. pantu. 2. Svītro direktīvas II pielikumu. Dalībvalstis 1. novembra. piemēro šos pasākumus no 1999. gada Kad dalībvalstis pieņem minētos pasākumus, tajos ietver atsauci uz šo direktīvu, vai arī šādu atsauci pievieno minēto pasākumu oficiālai publikācijai. Šādas atsauces pievienošanas kārtību paredz dalībvalstis. 6. pants Šī direktīva stājas spēkā divdesmitajā dienā pēc tās publicēšanas Eiropas Kopienu Oficiālajā Vēstnesī. 7. pants Tiek atcelta Direktīva 74/203/EEK. 4. pants Šī direktīva ir adresēta dalībvalstīm. 5. pants Briselē, 1999. gada 20. aprīlī Dalībvalstīs, vēlākais, līdz 1999. gada 31. oktobrim stājas spēkā normatīvi un administratīvi akti, kas vajadzīgi, lai izpil- dītu šīs direktīvas prasības. Par to dalībvalstis tūlīt informē Komisiju. Komisijas vārdā — Komisijas loceklis Franz FISCHLER 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 237 PIELIKUMS A DAĻA AMPROLIJA NOTEIKŠANA 1-[(4-amino-2-propil-5-pirimidinil)-metil]-2-pikolīna hlorīda hidrogēnhlorīds 1. Mērķis un izmantošanas joma Šo metodi izmanto amprolija satura noteikšanai barībā un premiksos. Metodes kvalitatīvās noteikšanas robeža ir 1 mg/kg, kvantitatīvās noteikšanas robeža – 25 mg/kg. 2. Princips Paraugu ekstrahē ar metanola un ūdens maisījumu. Pēc atšķaidīšanas ar kustīgo fāzi un membrānfiltrācijas, amprolija saturu nosaka ar katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfijas metodi (HPLC), izmantojot UV detektoru. 3. Reaģenti 3. 1. Metanols. 3. 2. Acetonitrils, HPLC kvalitātes ūdens. 3. 3. HPLC kvalitātes ūdens. 3. 4. Nātrija dihidrogēnfosfāta šķīdums, c = 0,1 mol/l. 1000 ml tilpuma mērkolbā ūdenī (3. 3. ) izšķīdina 13,80 g nātrija dihidrogenfosfāta monohidrāta, uzpilda līdz zīmei ar ūdeni (3. 3) un sajauc. 3. 5. Nātrija perhlorāta šķīdums, c = 1,6 mol/l: 1000 ml tilpuma mērkolbā ūdenī (3. 3. ) izšķīdina 224,74 g nātrija perhlorāta monohidrāta, uzpilda līdz zīmei ar ūdeni (3. 3) un sajauc. 3. 6. HPLC kustīgā fāze (sk. 9. 1 piezīmi). Acetonitrila (3. 2), nātrija dihidrogenfosfāta šķīduma (3. 4) un nātrija perhlorāta šķīduma (3. 5) maisījums 450 + 450 + 100 (v + v + v). Pirms lietošanas filtrē caur 0,22 µm membrānfiltru (4. 3) un šķīdumu degazē (piemēram, ultraskaņas vannā (4. 4) vismaz 15 minūtes). 3. 7. Standartviela: tīrs amprolijs, 1-[(4-amino-2-propil-5-pirimidinil)-metil]-2-pikolīna hlorīda hidrogēnhlorīds, E 750 (sk. 9. 2). 3. 7. 1. Amprolija rezerves standartšķīdums, 500 µg/ml Ar precizitāti līdz 0,1 mg iesver 50 mg amprolija (3. 7) 100 ml tilpuma mērkolbā, izšķīdina 80 ml metanola (3. 1) un kolbu uz 10 minūtēm ievieto ultraskaņas vannā (4. 4). Pēc iedarbības ar ultraskaņu, šķīdumu atdzesē līdz istabas temperatūrai, kolbu uzpilda līdz zīmei ar ūdeni un sajauc. Šķīdums 4°C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 7. 2. Amprolija darba standartšķīdums, 50 µg/ml Ar pipeti 5 ml rezerves standartšķīduma (3. 7. 1. ) pārnes 50 ml mērkolbā, uzpilda līdz zīmei ar ekstrakcijas šķīdinātāju (3. 8) un sajauc. Šķīdums 4 °C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 7. 3. Kalibrēšanas šķīdumi Attiecīgi 0,5 ml, 1 ml un 2 ml darba standartšķīduma (3. 7. 2) pārnes 50 ml tilpuma mērkolbās. Uzpilda līdz zīmei ar kustīgo fāzi (3. 6) un sajauc. Šādi pagatavoti šķīdumi atbilst attiecīgi 0,5, 1 un 2?g amprolija uz ml. Šie šķīdumi jāsagatavo tieši pirms lietošanas. 238 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. 3. 8. Ekstrakcijas šķīdinātājs Metanola (3. 1) maisījums ar ūdeni 2 + 1 (v + v). 4. Aparatūra 4. 1. Katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfs ar ievadīšanas sistēmu, kas piemērota 100 µl tilpuma ievadīšanai. 4. 1. 1. Katjonu apmaiņas šķidruma hromatogrāfijas kolonna, 125 mm x 4 mm, ar 10 µm Nukleozila 10 SA pildījumu, vai tai līdzvērtīga. 4. 1. 2. UV detektors ar maināmu viļņa garumu vai ar diodu matricas detektoru. 4. 2. Membrānfiltrs, PTFE materiāla, 0,45?m. 4. 3. Membrānfiltrs, 0,22 µm. 4. 4. Ultraskaņas vanna. 4. 5. Mehāniskais kratītājs vai magnētiskais maisītājs. 5. Procedūra 5. 1. Vispārīgi noteikumi 5. 1. 1. Tukšā parauga analīze Veicot atgūstamības pārbaudi (5. 1. 2), analizē barības tukšo paraugu, lai pārbaudītu, vai paraugā nav amprolija vai traucējošu vielu. Tukšajam paraugam būtu jābūt līdzīgam analizējamajam paraugam pēc veida, un tam neva- jadzētu saturēt amproliju vai traucējošas vielas. 5. 1. 2. Atgūstamības pārbaude Atgūstamības pārbaudi veic, izmantojot barības tukšo kontrolparaugu, kas pastiprināts ar amproliju, kura dau- dzums ir līdzīgs analizējamajā paraugā esošajam amprolija daudzumam. Lai paraugu pastiprinātu līdz 100 mg/ kg, koniskā 250 ml tilpuma kolbā pārnes 10 ml rezerves standartšķīduma (3. 7. 1), un to ietvaicē līdz apmēram 0,5 ml. Pievieno 50 g barības tukšā parauga, rūpīgi sajauc un pirms ekstrakcijas posma (5. 2) atstāj uz 10 minūtēm, vairākas reizes sajaucot. Ja nav pieejams analizējamajam paraugam līdzīgs tukšais paraugs (sk. 5. 1. 1), atgūstamību nosaka pēc standart- piedevu metodes. Šādā gadījumā analizējamo paraugu pastiprina ar amprolija daudzumu, kas ir līdzīgs analizēja- majā paraugā jau esošajam daudzumam. Šo paraugu analizē kopā ar nepastiprinātu paraugu, un atgūstamību aprēķina pēc starpības. 5. 2. Ekstrakcija 5. 2. 1. Premiksi (ar amprolija saturu < 1 %) un barība Atkarībā no amprolija satura, ar precizitāti līdz 0,01 g nosver 5 līdz 40 g parauga, ko pārnes 500 ml tilpuma koniskā kolbā, un pievieno 200 ml ekstrakcijas šķīdinātāja (3. 8). Kolbu uz 15 minūtēm ievieto ultraskaņas vannā (4. 4). Kolbu izņem no ultraskaņas vannas un 1 stundu krata, izmantojot kratītāju vai magnētisko maisī- tāju (4. 5). Ekstrakta alikvotu atšķaida ar kustīgo fāzi (3. 6) līdz amprolija koncentrācijai 0,5-2 µg/ml un sajauc (sk. 9. 3 piezīmi). Šā atšķaidītā šķīduma 5 līdz 10 ml filtrē ar membrānas filtru (4. 2). Veic katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfiju (5. 3). 5. 2. 2. Premiksi (ar amprolija saturu ≥ 1 %) Atkarībā no amprolija satura, ar precizitāti līdz 0,001 g nosver 1 līdz 4 g premiksa, pārnes 500 ml tilpuma koniskā kolbā un pievieno 200 ml ekstrakcijas šķīdinātāja (3. 8). Kolbu uz 15 minūtēm ievieto ultraskaņas vannā (4. 4). Kolbu izņem no ultraskaņas vannas un 1 stundu krata, izmantojot kratītāju vai magnētisko maisītāju (4. 5). Ekstrakta alikvotu atšķaida ar kustīgo fāzi (3. 6) līdz amprolija koncentrācijai 0,5-2 µg/ml un sajauc. Šā atšķaidītā šķīduma 5 līdz 10 ml filtrē ar membrānas filtru (4. 2). Veic katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfiju (5. 3). 5. 3. Katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfija 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 239 5. 3. 1. Parametri Ieteicams ievērot šādus nosacījumus, citos apstākļos var strādāt, ja tie dod līdzvērtīgus rezultātus: Šķidruma hromatogrāfijas kolonna (4. 1. 1): Katjonu apmaiņas šķidruma hromatogrāfijas kolonna, 125 mm x 4 mm, ar 10 µm Nukleozila 10 SA pildījumu vai līdzvērtīgu. Kustīgā fāze (3. 6): Acetonitrila (3. 2), nātrija dihidrogenfosfāta šķīduma (3. 4) un nātrija perh- lorāta šķīduma (3. 5) maisījums 450 + 450 + 100 (v + v + v). Plūsmas ātrums: 0,7 līdz 1 ml/min. Noteikšanas viļņa garums: Ievadītais tilpums: 264 nm. 100 µl. Pārbauda hromatogrāfiskās sistēmas stabilitāti, vairākas reizes ievadot kalibrēšanas šķīdumu (3. 7. 3), kas satur 1,0 µg/ml, līdz iegūst vienādus pīķu augstumus un vienādu izdalīšanas laiku. 5. 3. 2. Kalibrēšanas grafiks Katru kalibrēšanas šķīdumu (3. 7. 3. ) ievada vairākas reizes un nosaka katrai koncentrācijai atbilstošo vidējo pīķa augstumu (vai laukumu). Konstruē kalibrēšanas līkni, uz ordinātu ass atzīmējot kalibrēšanas šķīdumu pīķu vidējos augstumus (vai laukumus), un uz abscisu ass attiecīgās koncentrācijas mg/ml. 5. 3. 3. Parauga šķīdums Vairākas reizes ievada parauga ekstraktu (5. 2. ), ņemot tādu pašu tilpumu kā kalibrēšanas šķīdumiem, un nosaka amprolija pīķu vidējo augstumu (laukumu). 6. Rezultātu aprēķināšana Izmantojot kalibrēšanas līkni (5. 3. 2), parauga ekstraktā pēc amprolija pīķa vidējā augstuma (vai laukuma) nosaka ampro- lija koncentrāciju parauga šķīdumā lg/ml. Amprolija saturu (w) analizējamajā paraugā aprēķina pēc šādas formulas: w ¼ V β f m (cid:2) (cid:1) mg=kg kur: V δ f = ekstrakcijas šķīdinātāja (3. 8) tilpums ml saskaņā 5. 2 punktu (t. i. , 200 ml) = amprolija koncentrācija parauga ekstraktā (5. 2) µg/ml = atšķaidījuma pakāpe atbilstīgi 5. 2 m = analizējamā parauga masa gramos 7. Rezultātu izvērtējums 7. 1. Identifikācija Analīta identitāti var apstiprināt paralēlā hromatogrāfiskajā analīzē vai, lietojot diodu matricas detektoru, ar kura palīdzību salīdzina parauga ekstrakta (5. 2) spektru ar tā kalibrēšanas šķīduma (3. 7. 3) spektru, kas satur 2,0?g/ml amprolija. 7. 1. 1. Paralēla hromatogrāfiskā analīze Parauga ekstraktu (5. 2) pastiprina, pievienojot attiecīgu daudzumu kalibrēšanas šķīduma (3. 7. 3). Pievienotā amprolija daudzumam jābūt aptuveni vienādam ar parauga ekstraktā noteikto amprolija daudzumu. Ņemot vērā pievienoto daudzumu un ekstrakta atšķaidījumu, būtu jāpalielinās tikai amprolija pīķa augstumam. Pīķa pusaugstuma platumam jābūt ± 10 % no sākotnēji nepastiprināta parauga ekstrakta amprolija pīķa pusaugstuma platuma. 240 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. 7. 1. 2. Noteikšana ar diodu matricas detektoru Rezultātus izvērtē pēc šādiem kritērijiem: a) parauga maksimālās absorbcijas un standartspektra viļņa garumam, ko reģistrē pīķa smailē hromatogrammā, detektora sistēmas izšķirtspējas robežās jābūt vienādam. Diodu matricas detektoram šīs robežas parasti ir ± 2 nm; b) no 210 līdz 320 nm, paraugs un standartspektri, kas reģistrēti hromatogrammas pīķa virsotnē, nedrīkst atšķirties tajās spektra daļās, kas ir 10 līdz -100 % relatīvās absorbcijas diapazonā. Šis kritērijs ir ievērots, ja maksimumi sakrīt, un nevienā novērojamā punktā novirze starp abiem spektriem nepārsniedz 15 % no nosa- kāmās vielas standarta absorbcijas; c) no 210 līdz 320 nm parauga ekstrakta radītā pīķa kāpuma, smailes un krituma spektri cits no cita nedrīkst atšķirties tajās spektra daļās, kas ir 10 līdz 100 % relatīvās absorbcijas diapazonā. Šis kritērijs ir ievērots, ja maksimumi sakrīt, un ja nevienā novērojamā punktā novirze starp spektriem nepārsniedz 15 % no pīķa smailes spektra absorbcijas. Ja kāds no šiem kritērijiem nav ievērots, nosakāmās vielas klātbūtne nav apstiprinājusies. 7. 2. Atkārtojamība No viena parauga divās paralēlās noteikšanās iegūto rezultātu atšķirības nedrīkst pārsniegt: — 15 % no lielākās noteiktās vērtības, ja amprolija saturs ir no 25 mg/kg līdz 500 mg/kg — 75 mg/kg, ja amprolija saturs ir no 500 mg/kg līdz 1000 mg/kg — 7,5 % no lielākās noteiktās vērtības, ja amprolija saturs pārsniedz 1000 mg/kg 7. 3. Atgūstamība Pastiprināta kontrolparauga (tukšā parauga) atgūstamība ir vismaz 90 %. 8. Salīdzinoša pētījuma rezultāti Tika sarīkota starplaboratoriju salīdzinošā testēšana, izmantojot trīs putnu barības paraugus (1. līdz 3. paraugs), viens minerālbarības paraugs (4. paraugs) un viens premiksa paraugs (5. paraugs). Salīdzinošās testēšanas rezul- tāti apkopoti tabulā: 1. paraugs (barības tukšais paraugs) 2. paraugs 3. paraugs 4. paraugs 5. paraugs 14 56 45,5 2,26 4,95 2,95 6,47 50 14 56 188 3,57 1,90 11,8 6,27 200 14 56 15 60 5 129 25 140 178 3,46 266 5,19 550 2,20 760 3,00 5 000 25 000 L n vidējā vērtība [mg/kg] Sr [mg/kg] CVr [%] SR [mg/kg] CVR [%] Nominālais saturs [mg/kg] 14 56 - - - - - - L: n: sr: CVr: SR: CVR: laboratoriju skaits atsevišķu vērtību skaits atkārtojamības standartnovirze atkārtojamības variācijas koeficients reproducējamības standartnovirze reproducējamības variācijas koeficients 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 241 9. 9. 1. 9. 2. 9. 3. Piezīmes Ja analizējamais paraugs satur tiamīnu, tiamīna pīķis hromatogrammā parādās īsi pirms amprolija pīķa. Analīzi veicot pēc šīs metodes, amprolijs un tiamīns ir jānodala. Ja amproliju un tiamīnu nenodala kolonnā (4. 1. 1), ko izmanto šajā metodē, kustīgajā fāzē (3. 6) līdz 50 % acetonitrila aizstāj ar metanolu. Saskaņā ar britu farmakopeju, amprolija (0,02 mol/l) spektrs sālsskābes šķīduma sasniedz maksimumu pie 246 nm un 262 nm. Absorbcija pie 246 nm ir 0,84, bet pie 262 nm attiecīgi 0,80. Parauga ekstrakts noteikti jāatšķaida tikai ar kustīgo fāzi, citādi amprolija pīķa aiztures laiks var ievērojami mainīties jonu spēka izmaiņu dēļ. B DAĻA DIKLAZURILA NOTEIKŠANA 2,6-dihlor-α-(4-hlorfenil)-4-(4,5-dihidro-3,5-diokso-1,2,4-triazin-2-(3H)il)fenilacetonitrils 1. Mērķis un izmantošanas joma Metode paredzēta diklazurila noteikšanai barībā un premiksos. Metodes kvalitatīvās noteikšanas robeža ir 0,1 mg/kg, kvantitatīvās noteikšanas robeža – 0,5 mg/kg. 2. Princips Pēc iekšējā standarta pievienošanas paraugu ekstrahē ar paskābinātu metanolu. Barības ekstrakta alikvotu attīra, izmantojot C18 cietās fāzes ekstrakcijas kolonnu. Diklazurilu no kolonnas eluē ar paskābināta metanola un ūdens maisījumu. Pēc eluāta ietvaicēšanas, atlikumu izšķīdina DMFA/ūdenī. Premiksu ekstraktu ietvaicē, atli- kumu izšķīdina DMFA/ūdenī. Diklazurila saturu nosaka trīspakāpju gradienta apgrieztās fāzes augstas efektivi- tātes šķidruma hromatogrāfijā (HPLC), lietojot UV detektoru. 3. Reaģenti 3. 1. HPLC kvalitātes ūdens. 3. 2. Amonija acetāts. 3. 3. Tetrabutilamonija hidrogēnsulfāts (TBHS). 3. 4. HPLC kvalitātes acetonitrils. 3. 5. HPLC kvalitātes metanols. 3. 6. N,N-dimetilformamīds (DMFA). 3. 7. Sālsskābe, ρ20 = 1,19 g/ml. 3. 8. Standartviela: diklazurils II - 24: 2,6-dihlor-α-(4-hlorfenil)-4-(4,5-dihidro-3,5-diokso-1,2,4-triazīn-2-(3H)il)fenila- cetonitrils ar garantētu tīrību, E771. 3. 8. 1. Diklazurila rezerves standartšķīdums, 500 µg/ml Ar precizitāti līdz 0,1 mg 50 ml tilpuma mērkolbā iesver 25 mg diklazurila standartvielas (3. 8). Šķīdina DMFA (3. 6), uzpilda līdz zīmei ar DMFA (3. 6) un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā vai izmanto kolbu no tumša stikla un glabā ledusskapī. Šķīdums 4 °C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 242 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. 3. 8. 2. Diklazurila standartšķīdums, 50 µg/ml 5,00 ml rezerves standartšķīduma (3. 8. 1) iepilda 50 ml mērkolbā, uzpilda līdz zīmei ar DMFA (3. 6) un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā vai izmanto kolbu no tumša stikla un glabā ledusskapī. Šķīdums 4 °C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 9. Iekšējais standarts: 4-dihlor-α-(4-hlorfenil)2,6-(4,5-dihidro-3,5-diokso-1,2,4-triazin-2-(3H)il) α-metilfenilacetoni- trils. 3. 9. 1. Iekšējais rezerves standarta šķīdums, 500 µg/ml. Ar precizitāti līdz 0,1 mg 50 ml tilpuma mērkolbā iesver 25 mg iekšējā standarta vielas (3. 9). Šķīdina DMFA (3. 6), uzpilda līdz zīmei ar DMFA (3. 6), un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā vai izmanto kolbu no tumša stikla, to glabā ledusskapī. Šķīdums 4 °C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 9. 2. Iekšējais standarta šķīdums, 50 µg/ml. 5,00 ml iekšējā standarta šķīduma (3. 9. 1. ) pārnes 50 ml mērkolbā, uzpilda līdz zīmei ar DMFA (3. 6) un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā vai izmanto kolbu no tumša stikla, to glabā ledusskapī. Šķīdums 4°C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 9. 3. Iekšējā standarta šķīdums premiksu analīzēm, p/1000 mg/ml (p = diklazurila nominālais saturs premiksā, mg/ kg). Ar precizitāti līdz 0,1 mg iesver p/10 mg iekšējās standarta vielas 100 ml tilpuma mērkolbā, šķīdina DMFA (3. 6) ultraskaņas vannā (4. 6), uzpilda līdz zīmei ar DMFA un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā vai izmanto kolbu no tumša stikla, to glabā ledusskapī. Šķīdums 4 °C temperatūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 10. Kalibrēšanas šķīdums, 2 µg/ml. Ar pipeti 50 ml tilpuma mērkolbā pārnes 2,00 ml diklazurila standarta šķīduma (3. 8. 2) un 2,00 ml iekšējā standarta šķīduma (3. 9. 2). Pievieno 16 ml DMFA (3. 6), uzpilda līdz zīmei ar ūdeni un sajauc. Šis šķīdums jāga- tavo tieši pirms lietošanas. 3. 11. C18 cietās fāzes ekstrakcijas kolonna, piemēram, Bond Elut, izmērs: 1 cm3, sorbenta masa: 100 mg. 3. 12. Ekstrakcijas šķīdinātājs: paskābināts metanols. Ar pipeti 5,0 ml sālsskābes (3. 7) pievieno 1000 ml metanola (3. 5) un sajauc. 3. 13. HPLC Kustīgā fāze: Eluents A: amonija acetāta un tetrabutilamonija hidrogēnsulfāta šķīdums. 3. 13. 1. Izšķīdina 5 g amonija acetāta (3. 2) un 3,4 g TBHS (3. 3) 1000 ml ūdens (3. 1) un sajauc. 3. 13. 2. Eluents B: acetonitrils (3. 4). 3. 13. 3. Eluents C: metanols (3. 5). 4. Aparatūra 4. 1. Mehāniskais kratītājs. 4. 2. Iekārta trijpakāpju gradienta HPLC. 4. 2. 1. Šķidruma hromatogrāfijas kolonna 100 mm x 4,6 mm, ar 3 µm Hypersil ODS vai līdzvērtīgu pildījumu. 4. 2. 2. UV detektors ar maināmu viļņa garumu vai ar diodes matricas detektoru. 4. 3. Rotācijas vakuumietvaicētājs. 4. 4. Membrānas filtrs, 0,45?m. 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 243 4. 5. Vakuumkolektors. 4. 6. Ultraskaņas vanna. 5. Procedūra 5. 1. Vispārīgi noteikumi 5. 1. 1. Barības tukšais paraugs Analizē tukšo paraugu, lai pārliecinātos, ka tajā nav ne diklazurila, ne noteikšanu traucējošu vielu. Tukšais paraugs pēc veida ir līdzīgs analizējamajam paraugam un, pārbaudot to, nebūtu jāatklājas diklazurilam vai no- teikšanu traucējošām vielām. 5. 1. 2. Atgūstamības pārbaude Atgūstamību pārbauda, izmantojot barības tukšo kontrolparaugu, kas pastiprināts, pievienojot tādu daudzumu diklazurila, kas ir līdzīgs paraugā esošajam daudzumam. Lai paraugu pastiprinātu līdz 1 mg/kg, 50 g barības tukšajam paraugam pievieno 0,1 ml rezerves standartšķīduma (3. 8. 1), rūpīgi sajauc un atstāj uz 10 minūtēm, pirms ekstrakcijas (5. 2) vairākas reizes rūpīgi sajaucot. Ja nav analizējamajam paraugam līdzīga tukšā parauga (sk. 5. 1. 1), atgūstamību nosaka pēc standarta piedevu metodes. Šādā gadījumā analizējamo paraugu pastiprina ar diklazurila daudzumu, kas ir līdzīgs analizējamajā paraugā jau esošajam daudzumam. Šo paraugu analizē kopā ar nepastiprinātu paraugu, un atgūstamību aprēķina pēc starpības. 5. 2. Ekstrakcija 5. 2. 1. Barība Ar precizitāti līdz 0,01 g nosver apmēram 50 g lielu paraugu. Pārnes to 500 ml tilpuma koniskā kolbā, pievieno 1,00 ml iekšējā standarta šķīduma (3. 9. 2), 200 ml ekstrakcijas šķīdinātāja (3. 12), kolbu noslēdz ar aizbāzni. Maisījumu krata kratītājā visu nakti (4. 1). Nostādina 10 minūtes. Pārnes dzidrā šķīduma 20 ml alikvotu piemērotā stikla traukā un atšķaida ar 20 ml ūdens. Šo šķīdumu pārnes uz ekstrakcijas kolonnu (3. 11) un izlaiž cauri, izmantojot vakuumu (4. 5). Kolonnu skalo ar 25 ml ekstrakcijas šķīdinātāja (3. 12) un ūdens maisījumu tilpuma attiecībās 65 + 35 (v + v). Savāktās frakcijas izlej, un savienojumus eluē ar 25 ml ekstra- kcijas šķīdinātāja (3. 12) un ūdens maisījumu tilpuma attiecībā 80 + 20 (v + v). Šo frakciju ietvaicē sausu ar rotora ietveicētāja (4. 3) palīdzību pie 60 °C temperatūras. Atlikumu šķīdina 1,0 ml DMFA (3. 6), pievieno 1,5 ml ūdens (3. 1) un sajauc. Filtrē caur membrānas filtru (4. 4). Veic katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidruma hromatogrāfiju (5. 3). 5. 2. 2. Premiksi Ar precizitāti līdz 0,001 g nosver apmēram 1 g lielu paraugu. To pārnes 500 ml tilpuma koniskā kolbā, pievieno 1,00 ml iekšējā standarta šķīduma (3. 9. 3), 200 ml ekstrakcijas šķīdinātāja (3. 12) un kolbu noslēdz ar aizbāzni. Maisījumu visu nakti krata kratītājā (4. 1). Nostādina 10 minūtes. Dzidrā šķīduma alikvotu 10 000/p ml (p = diklazurila nominālais saturs premiksā, mg/kg) pārnes piemērota izmēra apaļkolbā. Ietvaicē to sausu, izmantojot rotora ietveicētāju (4. 3), pie 60 °C temperatūras. Atlikumu šķīdina 10,0 ml DMFA (3. 6), pievieno 15,0 ml ūdens (3. 1) un sajauc. Veic katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfiju (5. 3). 5. 3. HPLC noteikšana 5. 3. 1. Kritēriji Ieteicams ievērot šādus nosacījumus, citos apstākļos var strādāt, ja tajos iegūst līdzvērtīgus rezultātus: — Šķidruma hromatogrāfijas kolonna (4. 2. 1): 100 mm x 4,6 mm, ar 3 µm Hypersil ODS, vai tam līdzvērtīgu pildī- jumu — Kustīgā fāze: Eluents A (3. 13. 1): Amonija acetāta un tetrabutilamo- nija hidrogēnsulfāta ūdens šķīdums Eluents B (3. 13. 2): Eluents B (3. 13. 3): acetonitrils metanols 244 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. — Eluēšanas režīms: — lineārs gradients — sākumā: A + B + C = 60 + 20 + 20 (v + v + v) — pēc 10 minūtēm gradienta eluēšanas 30 minūtes: A + B + C = 45 + 20 + 35 (v + v + v) Skalo ar B 10 minūtes — Plūsmas ātrums: — Ievadītais tilpums: — Detektora viļņa garums: 1,5 – 2 ml/min 20 µl 280 ml Pārbauda hromatogrāfiskās sistēmas stabilitāti, vairākas reizes ievadot kalibrēšanas šķīdumu (3. 10), kas satur 2 µg/ml, līdz iegūst vienāda augstuma pīķus un vienādu izdalīšanas laiku. 5. 3. 2. Kalibrēšanas šķīdums Vairākas reizes ievada pa 20 µl kalibrēšanas šķīduma un nosaka diklazurila un iekšējā standarta pīķu vidējo augstumu (laukumu). 5. 3. 3. Parauga šķīdums Vairākas reizes ievada pa 20 µl parauga šķīduma (5. 2. 1. vai 5. 2. 2. ) un nosaka diklazurila un iekšējā standarta pīķa vidējo augstumu (laukumu). 6. Rezultātu aprēķināšana 6. 1. Barība Diklazurila saturu w (mg/kg) paraugā aprēķina pēc formulas: β d,c10V m hd,shi,c hi,shd,c w ¼ x (cid:1) mg=kg (cid:2) kur hd,s = parauga šķīduma (5. 2. 1) diklazurila pīķa augstums (laukums) hi,s = parauga šķīduma (5. 2. 1) iekšējā standarta pīķa augstums (laukums) hd,c = kalibrēšanas šķīduma (3. 10) diklazurila pīķa augstums (laukums) hi,c = kalibrēšanas šķīduma (3. 10) iekšējā standarta pīķa augstums (laukums) d,c = diklazurila koncentrācija µg/ml kalibrēšanas šķīdumā (3. 10) δ m = analizējamā parauga masa gramos. V = saskaņā ar 5. 2. 1 iegūtā parauga ekstrakta tilpums (t. i. , 2,5 ml) 6. 2. Premiksi Diklazurila saturu w (mg/kg) paraugā aprēķina pēc formulas: w ¼ hd,chi,c hi,shd,c β d,c0,002Vp m x (cid:2) (cid:1) mg=kg kur hd,c = kalibrēšanas šķīduma (3. 10) diklazurila pīķa augstums (laukums) hi,c = kalibrēšanas šķīduma (3. 10) iekšējā standarta pīķa augstums (laukums) hd,s = parauga šķīduma (5. 2. 1) diklazurila pīķa augstums (laukums) hi,s = parauga šķīduma (5. 2. 1) iekšējā standarta pīķa augstums (laukums) δ d,c = diklazurila koncentrācija kalibrēšanas šķīdumā (3. 10) m = analizējamā parauga masa gramos. V p = saskaņā ar 5. 20. 2 iegūtā parauga ekstrakta tilpums (t. i. , 2,5 ml) = diklazurila nominālais saturs mg/kg premiksā 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 245 7. Rezultātu izvērtējums 7. 1. Identifikācija Nosakāmās vielas identitāti var apstiprināt paralēlā hromatogrāfiskajā analīzē vai, lietojot diodu matricas detek- toru, ar kura palīdzību salīdzina parauga ekstrakta (5. 2. 1 vai 5. 2. 2) spektru ar kalibrēšanas šķīduma (3. 10) spektru. 7. 1. 1. Paralēla hromatogrāfiskā analīze Parauga ekstraktu (5. 2. 1 vai 5. 2. 2) pastiprina, pievienojot attiecīgu daudzumu kalibrēšanas šķīduma (3. 10). Pievienotā diklazurila daudzumam jābūt aptuveni vienādam ar parauga ekstraktā noteikto diklazurila daudzumu. Ņemot vērā pievienoto daudzumu un ekstrakta atšķaidījumu, būtu jāpalielinās tikai diklazurila un iekšējā stan- darta pīķa augstumam. Pīķa pusaugstuma platumam jābūt ± 10 % no sākotnējā parauga ekstrakta diklazurila vai iekšējā standarta pīķa pusaugstuma platuma. 7. 1. 2. Atklāšana ar diodu matricas detektoru Rezultātus vērtē pēc šādiem kritērijiem: a) parauga maksimālās absorbcijas un standartspektra viļņa garumam, ko reģistrē pīķa smailē hromatogrammā, atklāšanas sistēmas izšķirtspējas noteiktās robežās jābūt vienādam. Diodu matricas detektoram šīs robežas parasti ir ± 2 nm; b) starp 230 un 320 nm paraugs un standartspektri, kas reģistrēti hromatogrammas pīķa virsotnē, nedrīkst atšķirties tajās spektra daļās, kas ir 10 līdz 100 % relatīvās absorbcijas diapazonā. Atbilstība šim kritērijam ir panākta, ja maksimumi sakrīt un nevienā novērojamā punktā novirze starp abiem spektriem nepārsniedz 15 % no nosakāmās vielas standarta absorbcijas; c) no 230 līdz 320 nm parauga ekstrakta kāpuma, smailes un krituma spektri cits no cita nedrīkst atšķirties tajās spektra daļās, kas ir no 10 līdz 100 % relatīvās absorbcijas diapazonā. Atbilstība šim kritērijam ir panākta, ja maksimumi sakrīt, un ja nevienā novērojamā punktā novirze starp spektriem nepārsniedz 15 % no pīķa smailes spektra absorbcijas. Ja nav atbilstības kādam no šiem kritērijiem, nosakāmās vielas klātbūtne nav apstiprinājusies. 7. 2. Atkārtojamība No viena parauga divās paralēlās noteikšanās iegūto rezultātu atšķirība nedrīkst pārsniegt: — 30 % no lielākās noteiktās vērtības, ja diklazurila saturs ir no 0,5 mg/kg līdz 2,5 mg/kg, — 0,75 mg/kg, ja diklazurila saturs barībā ir no 2,5 mg/kg līdz 5 mg/kg, — 15 % no lielākās noteiktās vērtības, ja diklazurila saturs pārsniedz 5 mg/kg. 7. 3. Atgūstamība Pastiprināta tukšā parauga atgūstamībai vajadzētu būt vismaz 80 %. 8. Salīdzinoša pētījuma rezultāti Tika organizēta starplaboratoriju salīdzinošā testēšana, kurā 11 laboratorijās analizēja 5 paraugus. Divi analizē- jamie paraugi bija premiksi, viens ar organisku matricu (O 100), otrs ar neorganisku matricu (A 100). Abu paraugu teorētiskais diklazurila saturs ir 100 mg/kg. Trīs mājputniem domātas kombinētās barības paraugus ir ražojuši atšķirīgi ražotāji (NL) (L1/Z1/K1). Tajos teorētiskais diklazurila saturs ir 1 mg/kg. Laboratorijām tika dots norādījums visus paraugus analizēt vienu vai divas reizes. (Sīkāku informāciju par šīs starplaboratoriju salī- dzinošās testēšanas rezultātiem sk. Journal of AOAC International, Volume 77, Nr. 6, 1994, p. 1359[hyphen]1361). Rezultāti apkopoti tabulā: 246 LV L n vidējā vērtība Sr [mg/kg] CVr [%] SR [mg/kg] CVR [%] Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. 1. paraugs A 100 2. paraugs O 100 3. paraugs L 1 4. paraugs Z 1 5. paraugs K 1 11 19 11 18 100,8 103,5 5,88 5,83 7,59 7,53 7,64 7,38 7,64 7,38 11 19 0,89 0,15 17,32 0,17 18,61 1 11 19 1,15 0,02 1,92 0,11 9,67 1 6 12 0,89 0,03 3,34 0,12 13,65 1 Nominālais saturs [mg/kg] 100 100 L: n: sr: CVr: SR: CVR: laboratoriju skaits atsevišķu vērtību skaits atkārtojamības standartnovirze atkārtojamības variācijas koeficients reproducējamības standartnovirze reproducējamības variācijas koeficients 9. Piezīmes Vispirms jāparāda, ka diklazurila signāla izmaiņas mērāmo koncentrāciju diapazonā ir lineāras. C DAĻA KARBADOKSA NOTEIKŠANA Metil-3-(2-hinoksanililmetilēn)karbazāta N1,N4-dioksīds 1. Mērķis un izmantošanas joma Šo metodi izmanto karbadoksa satura noteikšanai dzīvnieku barībā, premiksos un preparātos. Metodes kvalita- tīvās noteikšanas robeža ir 1 mg/kg, bet kvantitatīvās noteikšanas robeža – 10 mg/kg. 2. Princips Paraugu līdzsvaro ar ūdeni un ekstrahē ar metanola un acetonitrila maisījumu. Analizējot barību, filtrēta ekstrakta alikvotu attīra alumīnija oksīda kolonnā. Analizējot premiksus un preparātus, filtrēta ekstrakta alikvotu līdz vajadzīgajai koncentrācijai atšķaida ar ūdeni, metanolu un acetonitrilu. Karbadoksa saturu nosaka apgrieztās fāzes augstas efektivitātes šķidruma hromatogrāfijā (HPLC), lietojot UV detektoru. 3. Reaģenti 3. 1. Metanols. 3. 2. Acetonitrils ar HPLC tīrības pakāpi. 3. 3. Etiķskābe, w = 100 %. 3. 4. Alumīnija oksīds: neitrāls, I aktivitātes klases. 3. 5. Metanola un acetonitrila maisījums 1 + 1 (v + v). Sajauc 500 ml metanola (3. 1) ar 500 ml acetonitrila (3. 2). 3. 6. Etiķskābe, σ = 10 %. Atšķaida 10 ml etiķskābes (3. 3) līdz 100 ml tilpumam ar ūdeni. 3. 7. Nātrija acetāts, CH3COONa. 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 247 3. 8. HPLC kvalitātes ūdens 3. 9. Acetāta buferšķīdums, c = 0,01 mol/l, pH = 6,0. Izšķīdina 0,82 g nātrija acetāta (3. 7) 700 ml ūdens (3. 8), un ar etiķskābi (3. 6) noregulē tā reakciju līdz pH 6,0. Pārnes 1000 ml tilpuma mērkolbā, uzpilda līdz zīmei ar ūdeni (3. 8) un sajauc. 3. 10. Kustīgā fāze HPLC Sajauc 825 ml acetāta buferšķīduma (3. 9) ar 175 ml acetonitrila (3. 2). Šķīdumu filtrē caur 0,22 µm filtru (4. 5) un degazē (piemēram, 10 minūtes apstrādājot ar ultraskaņu). 3. 11. Standartviela Tīrs karbadokss: Metil-3-(2-hinoksanililmetilēn)karbazāta N1,N4-dioksīds, E 850. 3. 11. 1. Karbadoksa rezerves standartšķīdums 100 µg/ml (sk. procedūras 5. punktā): Ar precizitāti līdz 0,1 mg 250 ml tilpuma mērkolbā iesver 25 mg karbadoksa standartvielas (3. 11). Apstrā- dājot ar ultraskaņu (4. 7), izšķīdina metanola un acetonitrila maisījumā (3. 5). Pēc iedarbības ar ultraskaņu, šķīdumu atdzesē līdz istabas temperatūrai, uzpilda līdz zīmei ar metanola un acetonitrila maisījumu (3. 5) un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā vai izmanto kolbu no tumša stikla, to glabā ledusskapī. Šķīdums 4 °C tempe- ratūrā ir stabils vienu mēnesi. 3. 11. 2. Kalibrēšanas šķīdumi Attiecīgi 2,0 ml, 5,0 ml, 10,0 ml un 20,0 ml rezerves standartšķīduma (3. 11. 1) pārnes 100 ml tilpuma mērkolbās. Pievieno 30 ml ūdens, uzpilda līdz zīmei ar metanola un acetonitrila maisījumu (3. 5) un sajauc. Kolbu ietin alumīnija folijā. Šādi pagatavoto šķīdumu karbadoksa koncentrācija attiecīgi ir 2,0, 5,0, 10 un 20,0 µg/ml. Kalibrēšanas šķīdumi jāsagatavo tieši pirms lietošanas. Piezīme: Ja barībā karbadoksa saturs nepārsniedz 10 mg/kg, jāpagatavo kalibrēšanas šķīdumi ar koncentrāciju zem 2 µg/ml. 3. 12. Ūdens - [metanola – acetonitrila] (3. 5) maisījums, 300 + 700 (v + v). 300 ml ūdens sajauc ar 700 ml metanola un acetonitrila maisījuma (3. 5). 4. Aparatūra 4. 1. Laboratorijas kratītājs vai magnētiskais maisītājs. 4. 2. Stiklašķiedras filtrpapīrs (GF/A Vatmans vai līdzvērtīgs). 4. 3. Stikla kolonna (garums 300 līdz 400 mm, iekšējais diametrs aptuveni 10 mm) ar keramikas-stikla starpsienu un noteces krānu. Piezīme: var izmantot arī stikla kolonnu ar krānu vai sašaurinātu apakšdaļu; tādā gadījumā kolonnas apakšējā daļā ievieto nelielu stiklašķiedras aizbāzni, ko sablīvē ar stikla spieķīti. 4. 4. Katjonu apmaiņas augstas efektivitātes šķidrumu hromatogrāfs ar ievadīšanas sistēmu, kas piemērota 20 µl tilpuma ievadīšanai. 4. 4. 1. 4. 4. 1. Šķidrumu hromatogrāfijas kolonna: 300 mm x 4 mm, C18, 10 µm pakojums vai līdzvērtīgs. 4. 4. 2. 4. 4. 2. UV detektors ar maināmu viļņa garumu, vai diodu matricas detektors, kas darbojas viļņu garuma diapa- zonā no 225 līdz 400 nm. 4. 5. 4. 6. Membrānas filtrs, 0,22 µm. Membrānas filtrs, 0,45 µm. 4. 7. Ultraskaņas vanna 5. Procedūra Piezīme: Karbadokss ir gaismasjutīgs. Visas procedūras veic samazinātā apgaismojumā, lieto tumša stikla traukus vai arī tos ietin alumīnija folijā. 5. 1. Vispārīgi noteikumi 248 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. 5. 1. 1. Barības tukšais paraugs. Veicot atgūstamības pārbaudi (5. 1. 2), analizē tukšo paraugu, lai pārbaudītu, vai paraugā nav karbadoksa vai traucējošu vielu. Tukšajā paraugā, kas ir līdzīgs analizējamajam paraugam, nebūtu jākonstatē karbadokss vai no- teikšanu traucējošas vielas. 5. 1. 2. Atgūstamības pārbaude Atgūstamības pārbaudi veic, analizējot barības tukšo paraugu (5. 1. 1. ), kas pastiprināts, pievienojot tādu dau- dzumu karbadoksa, kas ir līdzīgs paraugā esošajam. Tukšā parauga pastiprināšanai līdz 50 mg/kg, ņem 5,0 ml rezerves standartšķīduma (3. 11. 1. ), ko pārnes 200 ml tilpuma koniskā kolbā. Slāpekļa atmosfērā šķīdumu ietvaicē līdz aptuveni 0,5 ml tilpumam. Pirms ekstrakcijas (5. 2) pievieno 10 g tukšā barības parauga, samaisa un atstāj uz 10 minūtēm. Ja nav analizējamajam paraugam līdzīga tukšā parauga (sk. 5. 1. 1), atgūstamību var noteikt pēc standarta piedevu metodes. Šādā gadījumā analizējamo paraugu pastiprina ar karbadoksa daudzumu, kas ir līdzīgs analizējamajā paraugā jau esošajam daudzumam. Šo paraugu analizē kopā ar nepastiprinātu paraugu, un atgūstamību aprēķina pēc starpības. 5. 2. Ekstrakcija 5. 2. 1. Barība Ar precizitāti līdz 0,01 g iesver apmēram 10 g parauga, ko pārnes 200 ml tilpuma koniskā kolbā. Pievieno 15,0 ml ūdens, sajauc un atstāj uz 5 minūtēm. Pievieno 35,0 ml metanola un acetonitrila maisījuma (3. 5), kolbu noslēdz ar aizbāzni un uz 30 minūtēm ievieto kratītājā vai maisa ar magnētisko maisītāju (4. 1). Šķīdumu filtrē caur stiklašķiedras filtrpapīru (4. 2). Šo šķīdumu glabā attīrīšanai (5. 3. ). 5. 2. 2. Premiksi (0,1 līdz 2,0 %). Ar precizitāti līdz 0,01 g nosver apmēram 1 g parauga, ko pārnes 200 ml tilpuma koniskā kolbā. Pievieno 15,0 ml ūdens, samaisa un atstāj uz 5 minūtēm. Pievieno 35,0 ml metanola un acetonitrila maisījuma (3. 5), kolbu noslēdz ar aizbāzni un uz 30 minūtēm ievieto kratītājā vai maisa ar magnētisko maisītāju (4. 1). Šķīdumu filtrē caur stiklašķiedras filtrpapīru (4. 2). Ar pipeti filtrāta alikvotu pārnes 50 ml tilpuma mērkolbā. Pievieno 15,0 ml ūdens, uzpilda līdz zīmei ar metanola un acetonitrila maisījumu (3. 5) un sajauc. Karbadoksa koncentrā- cija pagatavotajā šķīdumā ir apmēram 10 µg/ml. Alikvotu filtrē caur 0,45 µm filtru (4. 6). Veic HPLC hromato- grāfiju (5. 4). 5. 2. 3. Preparāti (> 2 %) Ar precizitāti līdz 0,001 g nosver apmēram 0,2 g nemalta parauga, ko pārnes 250 ml tilpuma koniskā kolbā. Pievieno 45,0 ml ūdens, sajauc un atstāj uz 5 minūtēm. Pievieno 105,0 ml metanola un acetonitrila maisījuma (3. 5), kolbu noslēdz ar aizbāzni un tās saturu homogenizē. Paraugu 15 minūtes apstrādā ar ultraskaņu ultra- skaņas vannā (4. 7), pēc tam 15 minūtes krata vai maisa (4. 1). Šķīdumu filtrē caur stiklašķiedras filtrpapīru (4. 2). Filtrāta alikvotu atšķaida ar ūdens, metanola un acetonitrila maisījumu (3. 12) līdz karbadoksa koncentrācijai 10- 15 µg/ml (10 % preparātiem filtrātu atšķaida 10 reizes). Alikvotu filtrē caur 0,45 µm filtru (4. 6). Veic HPLC hromatogrāfiju (5. 4). 5. 3. Attīrīšana 5. 3. 1. Alumīnija oksīda kolonnas sagatavošana. Nosver 4 g alumīnija oksīda (3. 4) un pārnes stikla kolonnā (4. 3). 5. 3. 2. Parauga attīrīšana. 15 ml filtrētā ekstrakta (5. 2. 1) pārnes alumīnija oksīda kolonnā un pirmos 2 ml eluāta izlej. Nākamos 5 ml eluāta savāc un tā alikvotu filtrē caur 0,45 µm filtru (4. 6). Veic HPLC hromatogrāfiju (5. 4). 5. 4. HPLC noteikšana 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 249 5. 4. 1. Kritēriji Ieteicams ievērot šādus nosacījumus, lai gan var izmantot arī citus, ja tie dod līdzvērtīgus rezultātus. Šķidruma hromatogrāfijas kolonna (4. 1. 1): 300 mm x 4 mm, C18, 10 µm pakojums vai līdzvērtīgs Kustīgā fāze (3. 10): Acetāta buferšķīduma (3. 9) un acetonitrila (3. 2) maisījums 825 + 175 (v + v). Plūsmas ātrums: 1,5-2 ml/min. Viļņa garums noteikšanai: 365 nm. Ievadītais tilpums: 20 µl. Pārbauda hromatogrāfijas sistēmas stabilitāti, vairākas reizes ievadot kalibrēšanas šķīdumu (3. 11. 2. ) ar koncentrā- ciju 5,0 µg/ml, līdz sasniedz nemainīgus pīķa augstums (vai laukumu) un izdalīšanas laiku. 5. 4. 2. Kalibrēšanas grafiks Visus kalibrēšanas šķīdumus (3. 11. 2. ) ievada vairākas reizes un izmēra katrai koncentrācijai atbilstošo pīķa augstumu (laukumu). Konstruē kalibrēšanas līkni, uz ordinātu ass atzīmējot kalibrēšanas šķīdumu pīķu vidējo augstumu (vai laukumu) un uz abscisu ass attiecīgo koncentrāciju µg/ml. 5. 4. 3. Parauga šķīdums Vairākas reizes ievada parauga ekstraktu [(5. 3. 2) barība, (5. 2. 2) premiksi un (5. 2. 3) preparāti] un nosaka karba- doksa pīķu vidējo augstumu (vai laukumu). 6. Rezultātu aprēķināšana Izmantojot kalibrēšanas grafiku (5. 4. 2), pēc karbadoksa pīķu vidējā augstuma (vai laukuma) nosaka parauga šķīduma koncentrāciju µg/ml. 6. 1. Barība: Karbadoksa saturu w (mg/kg) paraugā aprēķina pēc šādas formulas: w ¼ β x V1 m (cid:2) (cid:1) mg=kg kur: δ = karbadoksa koncentrācija µg/ml parauga ekstraktā (5. 3. 2). V1 = ekstrakta tilpums ml (, t. i. , 50). M = parauga masa g. 6. 2. Premiksi un preparāti. Karbadoksa saturu w (mg/kg) paraugā aprēķina pēc formulas: w ¼ β x V2xf m (cid:1) mg=kg (cid:2) kur: δ = karbadoksa koncentrācija µg/ml parauga ekstraktā (5. 2. 2 vai 5. 2. 3). V2 = ekstrakta tilpums ml (, t. i. , 50, analizējot premiksus, un 150, analizējot preparātus). F = atšķaidījuma pakāpe saskaņā ar 5. 2. 2 (premiksi) vai 5. 2. 3 (preparāti). M = analizējamā parauga masa g. 250 LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 03/25. sēj. 7. Rezultātu izvērtējums 7. 1. Identifikācija Nosakāmās vielas identitāti var apstiprināt paralēlā hromatogrāfiskajā analīzē vai, lietojot diodu matricas detek- toru, ar kura palīdzību salīdzina parauga ekstrakta spektru ar tā kalibrēšanas šķīduma (3. 11. 2. ) spektru, kas satur 10,0 µg/ml. 7. 1. 1. Paralēla hromatogrāfiskā analīze Parauga ekstraktu pastiprina, pievienojot attiecīgu daudzumu kalibrēšanas šķīduma (3. 11. 2). Pievienotā karba- doksa daudzumam būtu jābūt aptuveni vienādam ar parauga ekstraktā noteikto karbadoksa daudzumu. Ņemot vērā pievienoto daudzumu un atšķaidījumu, būtu jāpalielinās tikai karbadoksa pīķa augstumam. Pīķa pusaugstuma platums nedrīkst mainīties vairāk par 10 % salīdzinot ar sākotnējo platumu. 7. 1. 2. Atklāšana ar diodu matricas detektoru Rezultātus vērtē pēc šādiem kritērijiem: a) parauga maksimālās absorbcijas viļņa garumam un standarta spektram, ko reģistrē pīķa smailē hromato- grammā, atklāšanas sistēmas izšķirtspējas noteiktajās robežās ir jābūt vienādiem. Diodu matricas detektoram šīs robežas parasti ir ± 2 nm; b) no 225 līdz 400 nm parauga un standarta spektri, kas reģistrēti hromatogrammas pīķa virsotnē, nedrīkst atšķirties tajās spektra daļās, kurās relatīvā absorbcija ir 10 līdz 100 %. Atbilstība šim kritērijam ir ievērota, ja maksimumi sakrīt un nevienā novērojumu punktā novirze starp abiem spektriem nepārsniedz 15 % no nosakāmās vielas standarta absorbcijas; c) no 225 līdz 400 nm parauga ekstrakta kāpuma, smailes un krituma spektri cits no cita nedrīkst atšķirties tajās spektra daļās, kurās relatīvā absorbcija ir no 10 līdz 100 %. Atbilstība šim kritērijam ir ievērota, ja maksimumi sakrīt un ja nevienā novērojumu punktā spektru atšķirības nepārsniedz 15 % no absorbcijas vērtības maksimuma smailē. Ja nav atbilstības kādam no šiem kritērijiem, nosakāmās vielas klātbūtne nav apstiprinājusies. 7. 2. Atkārtojamība. Ja karbadoksa saturs analizējamajā paraugā ir 10 mg/kg vai augstāks, divu paralēlu analīžu rezultāti nedrīkst atšķirties vairāk par 15 % no lielākā rezultāta vērtības. 7. 3. Atgūstamība Pastiprināta tukšā parauga atgūstamībai vajadzētu būt vismaz 90 %. 8. Salīdzinoša pētījuma rezultāti Tika organizēta starplaboratoriju salīdzinošā testēšana, kurā astoņās laboratorijās analizēja sešus barības paraugus, četrus premiksus un trīs preparātus. Visus paraugus analizēja divas reizes. (Sīkāku informāciju par šīs starplaboratoriju salīdzinošās testēšanas rezultātiem sk. 490. lpp. ). Analīžu rezultāti (izņemot izkritušos) apkopoti tabulā: Journal of AOAC, Volume 71, Nr. 1988, 484. — 1. tabula. Baribas analiu starplaboratoriju salidzinošas testešanas rezultati L n vidējā vērtība (mg/kg) Sr (mg/kg) CVr (%) SR (mg/kg) CVR (%) 1. paraugs 2. paraugs 3. paraugs 4. paraugs 5. paraugs 6. paraugs 8 50,0 15 2,90 5,8 3,92 7,8 8 47,6 14 2,69 5,6 4,13 8,7 8 48,2 15 1,38 2,9 2,23 4,6 8 49,7 15 1,55 3,1 2,58 5,2 8 46,9 15 1,52 3,2 2,26 4,8 8 49,7 15 2,12 4,3 2,44 4,9 Nominālais saturs (mg/kg) 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 03/25. sēj. LV Eiropas Savienības Oficiālais Vēstnesis 251 2. tabula. Premiksu un preparatu analiu starplaboratoriju salidzinošas testešanas rezultati L n Vidējā vērtība (g/kg) Sr (g/kg) CVr (%) SR (g/kg) CVR (%) Premiksi Preparāti. 7 14 7 14 7 14 7 14 8,89 0,37 4,2 0,37 4,2 9,29 0,28 3,0 0,28 3,0 9,21 0,28 3,0 0,40 4,3 8,76 0,44 5,0 0,55 6,3 8 16 8 16 8 16 94,6 98,1 104 4,1 4,3 5,4 5,7 5,1 5,2 6,4 6,5 7,7 7,4 7,7 7,4 Nominālais saturs (g/kg) 10,0 10,0 10,0 10,0 100 100 100 L: n: sr: CVr: SR: CVR: laboratoriju skaits atsevišķo vērtību skaits atkārtojamības standartnovirze atkārtojamības variācijas koeficients reproducējamības standartnovirze reproducējamības variācijas koeficients


title: PERGUNTA ESCRITA n. 1054/99 do Deputado Angela BILLINGHAM Europeiskt resepass för äldre medborgare

eurovoc_concepts:
elderly person
feasibility study
intra-EU transport
rail transport
railway tariff
tariff reduction
tourism
travel

formats: html print


title: Κανονισμός (ΕΚ) αριθ. 822/1999 της Επιτροπής, της 20ής Απριλίου 1999, για την πώληση, με τιμή που καθορίζεται κατ’αποκοπή εκ των προτέρων, βοείου κρέατος που κατέχεται από ορισμένους οργανισμούς παρέμβασης για να μεταποιηθεί στην Κοινότητα με σκοπό την επισιτιστική βοήθεια

eurovoc_concepts:
beef
food aid
intervention agency
meat processing industry
price fixed in advance
sale

formats: html pdf print

text: 21. 4. 1999 EL Ep(cid:148)sglg Evgleq(cid:148)da tym Euqypa(cid:152)j(cid:150)m Joimot(cid:147)tym L 104/9 JAMOMISLOS (EJ) aqih. 822/1999 TGS EPITQOPGS tgr 20(cid:147)r Apqik(cid:148)ou 1999 cia tgm p(cid:150)kgsg, le til(cid:147) pou jahoq(cid:148)fetai jat’ apojop(cid:147) ej tym pqot(cid:146)qym, boe(cid:148)ou jq(cid:146)ator pou jat(cid:146)wetai ap(cid:149) oqisl(cid:146)mour oqcamislo(cid:151)r paq(cid:146)lbasgr cia ma letapoighe(cid:148) stgm Joim(cid:149)tgta le sjop(cid:149) tgm episitistij(cid:147) bo(cid:147)heia G EPITQOPG TYM EUQYPA(cid:136)JYM JOIMOTGTYM, (cid:130)womtar up(cid:149)xg: tg sumh(cid:147)jg cia tgm (cid:148)dqusg tgr Euqypa(cid:152)j(cid:147)r Joim(cid:149)tgtar, tom jamomisl(cid:149) (EOJ) aqih. 805/68 tou Sulbouk(cid:148)ou, tgr 27gr Ioum(cid:148)ou 1968, peq(cid:148) joim(cid:147)r oqcam(cid:150)seyr acoq(cid:145)r stom tol(cid:146)a tou boe(cid:148)ou jq(cid:146)ator (1), (cid:149)pyr tqopopoi(cid:147)hgje tekeu- ta(cid:148)a ap(cid:149) tom jamomisl(cid:149) (EJ) aqih. 1633/98 (2), jai id(cid:148)yr to (cid:145)qhqo 7 paq(cid:145)cqavor 3, Ejtil(cid:150)mtar: (cid:149)ti g evaqloc(cid:147) tym l(cid:146)tqym paqelb(cid:145)seyr stom tol(cid:146)a tou boe(cid:148)ou jq(cid:146)ator dgliouqce(cid:148) apoh(cid:146)lata se pokk(cid:145) jq(cid:145)tg l(cid:146)kg· (cid:149)ti, cia ma apoveuwhe(cid:148) upeqbokij(cid:147) paq(cid:145)tasg tgr apohelatopo(cid:148)gsgr, pq(cid:146)pei l(cid:146)qor tym apohel(cid:145)tym ma tehe(cid:148) pqor p(cid:150)kgsg le diacymisl(cid:149), le sjop(cid:149) ma letapoighe(cid:148) stgm Joim(cid:149)tgta le st(cid:149)wo ma tehe(cid:148) stg di(cid:145)hesg ecjejqil(cid:146)mym vikamhqypij(cid:150)m oqcam(cid:150)seym le sjop(cid:149) tgm episitistij(cid:147) bo(cid:147)heia· (cid:149)ti g p(cid:150)kgsg aut(cid:147) ha pq(cid:146)pei ma up(cid:145)cetai stour jam(cid:149)mer pou jahoq(cid:148)fomtai ap(cid:149) tour jamomislo(cid:151)r tgr Epitqop(cid:147)r (EOJ) aqih. 2173/79 (3), (cid:149)pyr tqopopoi(cid:147)hgje tekeuta(cid:148)a ap(cid:149) tom jamomisl(cid:149) (EJ) aqih. 2417/95 (4), (EOJ) aqih. 3002/ 92 (5), (cid:149)pyr tqopopoi(cid:147)hgje tekeuta(cid:148)a ap(cid:149) tom jamomisl(cid:149) (EJ) aqih. 770/96 (6), jai (EOJ) aqih. 2182/77 (7), (cid:149)pyr tqopopoi(cid:147)hgje tekeuta(cid:148)a ap(cid:149) tom jamomisl(cid:149) (EJ) aqih. 2417/95, le tgm epiv(cid:151)kang oqisl(cid:146)mym eidij(cid:150)m enaiq(cid:146)seym k(cid:149)cy tgr eidij(cid:147)r wq(cid:147)sgr stgm opo(cid:148)a up(cid:149)jeimtai ta em k(cid:149)cy pqo(cid:152)(cid:149)mta· (cid:149)ti, cia ma enasvakishe(cid:148) tajtij(cid:147) jai oloi(cid:149)loqvg diadija- s(cid:148)a p(cid:150)kgsgr, pq(cid:146)pei ma evaqlosho(cid:151)m id(cid:148)yr oi diat(cid:145)neir pou pqobk(cid:146)pomtai stom t(cid:148)tko I tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2173/79· (cid:149)ti, cia ma diasvakishe(cid:148) g oijomolij(cid:147) diawe(cid:148)qisg tym apohel(cid:145)tym, e(cid:148)mai amacja(cid:148)o ma pqobkevhe(cid:148) (cid:149)ti oi oqcami- slo(cid:148) paq(cid:146)lbasgr pyko(cid:151)m jat(cid:145) pqoteqai(cid:149)tgta ta jq(cid:146)ata, tym opo(cid:148)ym g di(cid:145)qjeia apohelatopo(cid:148)gsgr e(cid:148)mai lecak(cid:151)- teqg· (cid:149)ti pq(cid:146)pei ma pqobkevho(cid:151)m paqejjk(cid:148)seir stir diat(cid:145)neir tou (cid:145)qhqou 2 paq(cid:145)cqavor 2 de(cid:151)teqo ed(cid:145)vio tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2173/79, kalbamol(cid:146)mym up(cid:149)xg tym dioijg- tij(cid:150)m dusweqei(cid:150)m pou dgliouqce(cid:148) g evaqloc(cid:147) tou edav(cid:148)ou auto(cid:151) sta jq(cid:145)tg l(cid:146)kg pou avoq(cid:145)· (cid:149)ti, cia ma diasvakiste(cid:148) o b(cid:146)ktistor (cid:146)kecwor cia tom pqoo- qisl(cid:149) tou boe(cid:148)ou jq(cid:146)ator paq(cid:146)lbasgr, pq(cid:146)pei ma pqobke- vho(cid:151)m, ejt(cid:149)r ap(cid:149) ta l(cid:146)tqa pou pqobk(cid:146)pomtai ap(cid:149) tom (1) EE L 148 tgr 28. 6. 1968, s. 24. (2) EE L 210 tgr 28. 7. 1997, s. 17. (3) EE L 251 tgr 5. 10. 1979, s. 12. (4) EE L 248 tgr 14. 10. 1995, s. 39. (5) EE L 301 tgr 17. 10. 1992, s. 17. (6) EE L 104 tgr 27. 4. 1996, s. 13. (7) EE L 251 tgr 1. 10. 1977, s. 60. jamomisl(cid:149) (EOJ) aqih. 3002/92, l(cid:146)tqa ek(cid:146)cwou pou bas(cid:148)- fomtai se vusijo(cid:151)r ek(cid:146)cwour poi(cid:149)tgtar jai pos(cid:149)tgtar· (cid:149)ti ta l(cid:146)tqa pou pqobk(cid:146)pomtai sto paq(cid:149)mta jamomisl(cid:149) e(cid:148)mai s(cid:151)lvyma le tg cm(cid:150)lg tgr epitqop(cid:147)r diawe(cid:148)qisgr boe(cid:148)ou jq(cid:146)ator, ENEDYSE TOM PAQOMTA JAMOMISLO: (cid:129)qhqo 1 1. (cid:130)womtar yr sjop(cid:149) ehmij(cid:146)r dqastgqi(cid:149)tgter episiti- stij(cid:147)r bo(cid:147)heiar, t(cid:148)hemtai pqor p(cid:150)kgsg, le sjop(cid:149) tg leta- po(cid:148)gs(cid:147) tour stgm Joim(cid:149)tgta, ta pqo(cid:152)(cid:149)mta paq(cid:146)lbasgr pou (cid:146)woum acoqashe(cid:148) s(cid:151)lvyma le to (cid:145)qhqo 6 tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 805/68 ta opo(cid:148)a am(cid:146)qwomtai se peq(cid:148)pou 500 t(cid:149)mour boe(cid:148)ou jq(cid:146)ator wyq(cid:148)r j(cid:149)jaka pou jat(cid:146)womtai ap(cid:149) tom iqkamdij(cid:149) oqcamisl(cid:149) paq(cid:146)lbasgr. Keptoleq(cid:147) stoiwe(cid:148)a swetij(cid:145) le ta pqo(cid:152)(cid:149)mta jai tir til(cid:146)r p(cid:150)kgs(cid:147)r tour, paqat(cid:148)hemtai sto paq(cid:145)qtgla I. 2. Le tgm epiv(cid:151)kang tym diat(cid:145)neym tou paq(cid:149)mtor jamo- mislo(cid:151), ta pqo(cid:152)(cid:149)mta pou amav(cid:146)qomtai stgm paq(cid:145)cqavo 1 pyko(cid:151)mtai s(cid:151)lvyma le tir diat(cid:145)neir tym jamomisl(cid:150)m (EOJ) aqih. 2173/79, jai id(cid:148)yr tym t(cid:148)tkym I jai III, (EOJ) aqih. 2182/77 jai (EOJ) aqih. 3002/92. 3. Oi pkgqovoq(cid:148)er swetij(cid:145) le tir pos(cid:149)tgter jai tour t(cid:149)pour (cid:149)pou e(cid:148)mai apohelatopoigl(cid:146)ma ta pqo(cid:152)(cid:149)mta lpo- qo(cid:151)m ma kgvho(cid:151)m ap(cid:149) tour emdiaveq(cid:149)lemour stir dieuh(cid:151)m- seir pou amav(cid:146)qomtai sto paq(cid:145)qtgla II tou paq(cid:149)mtor jamomislo(cid:151). 4. Cia j(cid:145)he pqo(cid:152)(cid:149)m pou amav(cid:146)qetai sto paq(cid:145)qtgla I, oi swetijo(cid:148) oqcamislo(cid:148) paqelb(cid:145)seyr pyko(cid:151)m jat(cid:145) pqote- qai(cid:149)tgta ta jq(cid:146)ata tym opo(cid:148)ym g di(cid:145)qjeia apohelatopoi(cid:147)- seyr e(cid:148)mai g lecak(cid:151)teqg. 5. Jat(cid:145) paq(cid:146)jjkisg ap(cid:149) to (cid:145)qhqo 2 paq(cid:145)cqavor 2 de(cid:151)- teqo ed(cid:145)vio tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2173/79, stir ait(cid:147)seir acoq(cid:145)r dem pq(cid:146)pei ma up(cid:145)qwei (cid:146)mdeing tgr (cid:147) tym xujtij(cid:150)m ecjatast(cid:145)seym (cid:149)pou bq(cid:148)sjetai to jq(cid:146)ar pou apoteke(cid:148) amtije(cid:148)lemo tgr a(cid:148)tgsgr. (cid:129)qhqo 2 1. G a(cid:148)tgsg acoq(cid:145)r isw(cid:151)ei l(cid:149)mom e(cid:145)m (cid:146)wei upobkghe(cid:148) ap(cid:149) vusij(cid:149) (cid:147) molij(cid:149) pq(cid:149)sypo (cid:147) cia kocaqiasl(cid:149) tou, to opo(cid:148)o, jat(cid:145) to dydej(cid:145)lgmo pqim ap(cid:149) tgm (cid:146)maqng isw(cid:151)or tou paq(cid:149)mtor jamomislo(cid:151), aswoke(cid:148)to le tgm paqacyc(cid:147) letapoigl(cid:146)mym pqo(cid:152)(cid:149)mtym pou peqi(cid:146)woum b(cid:149)eio jq(cid:146)ar jai to opo(cid:148)o e(cid:148)mai eccecqall(cid:146)mo sto ehmij(cid:149) lgtq(cid:150)o VPA. Epipk(cid:146)om, g em k(cid:149)cy a(cid:148)tgsg pq(cid:146)pei ma upob(cid:145)kketai ap(cid:149) letapoigtij(cid:147) ecjat(cid:145)stasg, ecjejqil(cid:146)mg dum(cid:145)lei tou (cid:145)q- L 104/10 EL Ep(cid:148)sglg Evgleq(cid:148)da tym Euqypa(cid:152)j(cid:150)m Joimot(cid:147)tym 21. 4. 1999 hqou 8 tgr odgc(cid:148)ar 77/99/EOJ tou Sulbouk(cid:148)ou (1), (cid:147) cia kocaqiasl(cid:149) tgr. 2. Jat(cid:145) paq(cid:146)jjkisg ap(cid:149) to (cid:145)qhqo 3 paq(cid:145)cqavoi 1 jai 2 tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2182/77, g pqosvoq(cid:145) pq(cid:146)pei ma sumode(cid:151)etai ap(cid:149): (cid:190) (cid:146)ccqavg am(cid:145)kgxg upowq(cid:146)ysgr tou acoqast(cid:147), pou ama- v(cid:146)qei (cid:149)ti ha letapoi(cid:147)sei ta jq(cid:146)ata sto pqo(cid:152)(cid:149)m pou jahoq(cid:148)fetai, l’ auto(cid:151)r tour (cid:149)qour, emt(cid:149)r tgr pqohesl(cid:148)ar pou amav(cid:146)qetai sto (cid:145)qhqo 3 paq(cid:145)cqavor 2 tou jamo- mislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2182/77, (cid:190) tgm ajqib(cid:147) (cid:146)mdeing tgr ecjat(cid:145)stasgr (cid:147) tym ecjatast(cid:145)- seym (cid:149)pou ha letapoigho(cid:151)m ta jq(cid:146)ata pou acoq(cid:145)stg- jam. 3. O acoqast(cid:147)r pou amav(cid:146)qetai stgm paq(cid:145)cqavo 1 d(cid:151)matai ma amah(cid:146)tei cqapt(cid:150)r se amtipq(cid:149)sypo ma paqak(cid:145)- bei cia kocaqiasl(cid:149) tou ta pqo(cid:152)(cid:149)mta pou acoq(cid:145)fei. Stgm peq(cid:148)ptysg aut(cid:147), o amtipq(cid:149)sypor upob(cid:145)kkei tgm a(cid:148)tgsg acoq(cid:145)r tou acoqast(cid:147) pou amtipqosype(cid:151)ei, jah(cid:150)r jai tgm (cid:146)ccqavg enousiod(cid:149)tgsg pou amav(cid:146)qetai amyt(cid:146)qy. Jat(cid:145) paq(cid:146)jjkisg ap(cid:149) to (cid:145)qhqo 18 paq(cid:145)cqavor 1 tou 4. jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2173/79, g pqohesl(cid:148)a am(cid:145)kgxgr tym pqo(cid:152)(cid:149)mtym e(cid:148)mai d(cid:151)o l(cid:147)mer. 5. Oi acoqast(cid:146)r jai oi emtokod(cid:149)woi pou amav(cid:146)qomtai stir pqogco(cid:151)lemer paqacq(cid:145)vour tgqo(cid:151)m jai emgleq(cid:150)moum kocistij(cid:145) bibk(cid:148)a sta opo(cid:148)a jahisto(cid:151)m elvam(cid:147) tom pqoo- qisl(cid:149) jai tg wq(cid:147)sg tym pqo(cid:152)(cid:149)mtym, id(cid:148)yr em(cid:149)xei enajqib(cid:150)- seyr tgr amtistoiw(cid:148)ar tym posot(cid:147)tym pou (cid:146)woum acoqashe(cid:148) le aut(cid:146)r pou (cid:146)woum letapoighe(cid:148). (cid:129)qhqo 3 To jq(cid:146)ar pou pyke(cid:148)tai b(cid:145)sei tou paq(cid:149)mtor jamomi- 1. slo(cid:151) pq(cid:146)pei ma letapoighe(cid:148) se pqo(cid:152)(cid:149)mta pou amtapojq(cid:148)mo- mtai stour oqislo(cid:151)r tym pqo(cid:152)(cid:149)mtym «A» pou amav(cid:146)qomtai stgm paq(cid:145)cqavo 2. Yr «pqo(cid:152)(cid:149)m A», oq(cid:148)fetai to letapoigl(cid:146)mo pqo(cid:152)(cid:149)m pou 2. up(cid:145)cetai stour jydijo(cid:151)r SO 1602 10 00, 1602 50 31, 1602 50 39 (cid:147) 1602 50 80, to opo(cid:148)o peqi(cid:146)wei l(cid:149)mom jq(cid:146)ar booeid(cid:150)m le amakoc(cid:148)a jokkac(cid:149)mou/pqyte(cid:155)mgr pou dem upeq- ba(cid:148)mei to 0,45 % (2), jai peqi(cid:146)wei jat(cid:145) b(cid:145)qor touk(cid:145)wistom 20 % (3) (cid:145)pawo jq(cid:146)ar [ejt(cid:149)r ap(cid:149) ta paqapqo(cid:152)(cid:149)mta sva- c(cid:148)ym (4) jai ta k(cid:148)pg], to de jq(cid:146)ar jai g pgjt(cid:147) apoteko(cid:151)m touk(cid:145)wistom to 85 % tou sumokijo(cid:151) jahaqo(cid:151) b(cid:145)qour. (1) EE L 26 tgr 31. 1. 1977, s. 85. (2) Pqosdioqisl(cid:149)r tgr peqiejtij(cid:149)tgtar cia jokkac(cid:149)mo: peqiejti- j(cid:149)tgta se jokkac(cid:149)mo heyqe(cid:148)tai g peqiejtij(cid:149)tgta se udqonupqo- k(cid:148)mg pokkapkasiaf(cid:149)lemg ep(cid:148) tom sumtekest(cid:147) 8. G peqiejti- j(cid:149)tgta se udqonupqok(cid:148)mg pq(cid:146)pei ma pqosdioq(cid:148)fetai s(cid:151)lvyma le tg l(cid:146)hodo ISO 3496-1994. (3) G peqiejtij(cid:149)tgta se (cid:145)pawo b(cid:149)eio jq(cid:146)ar, lg sulpeqikalbamo- l(cid:146)mou tou k(cid:148)pour, jahoq(cid:148)fetai s(cid:151)lvyma le tg diadijas(cid:148)a pou peqicq(cid:145)vetai sto paq(cid:145)qtgla tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2429/ 86 tgr Epitqop(cid:147)r (EE L 210 tgr 1. 8. 1986, s. 39). (4) Sta paqapqo(cid:152)(cid:149)mta svac(cid:148)ym peqikalb(cid:145)momtai ta en(cid:147)r: jev(cid:145)kia jai tel(cid:145)wia aut(cid:150)m (sulpeqikalbamol(cid:146)mym tym auti(cid:150)m), p(cid:149)dia, ouq(cid:146)r jaqdi(cid:146)r, lasto(cid:148), suj(cid:150)tia, mevq(cid:145), ckuj(cid:145)dia (h(cid:151)lor ad(cid:146)mar jai p(cid:145)cjqear), luak(cid:145), pmeul(cid:149)mia, kailo(cid:148), diavq(cid:145)clata, spk(cid:147)mer, ck(cid:150)sser, sj(cid:146)per, mytia(cid:148)oi lueko(cid:148), bq(cid:150)silo d(cid:146)qla, (cid:149)qcama amapaqacyc(cid:147)r (dgkad(cid:147) l(cid:147)tqer, yoh(cid:147)jer jai (cid:149)qweir), huqoeide(cid:148)r ad(cid:146)mer, upov(cid:151)seir. To pqo(cid:152)(cid:149)m pq(cid:146)pei ma upob(cid:145)kketai se jat(cid:145)kkgkg heqlij(cid:147) epeneqcas(cid:148)a, cia ma enasvak(cid:148)fetai g p(cid:147)ng tym pqyte(cid:152)m(cid:150)m jq(cid:146)ator se (cid:149)ko to pqo(cid:152)(cid:149)m jai sto opo(cid:148)o, (cid:145)qa, dem elvam(cid:148)- fomtai (cid:148)wmg qof(cid:146) ucqo(cid:151) stgm joll(cid:146)mg pkeuq(cid:145), (cid:149)tam to pqo(cid:152)(cid:149)m j(cid:149)betai jat(cid:145) l(cid:147)jor cqall(cid:147)r pou di(cid:146)qwetai ap(cid:149) to pio paw(cid:151) sgle(cid:148)o tou. (cid:129)qhqo 4 1. Ta jq(cid:145)tg l(cid:146)kg hesp(cid:148)foum s(cid:151)stgla vusijo(cid:151) ek(cid:146)cwou jai ek(cid:146)cwou tym eccq(cid:145)vym, cia ma enasvakiste(cid:148) (cid:149)ti (cid:149)ka ta jq(cid:146)ata letapoio(cid:151)mtai s(cid:151)lvyma le tir diat(cid:145)neir tym (cid:145)qhqym 2 jai 3. To s(cid:151)stgla pq(cid:146)pei ma peqikalb(cid:145)mei vusijo(cid:151)r ek(cid:146)cwour tgr pos(cid:149)tgtar jai tgr poi(cid:149)tgtar jat(cid:145) tgm (cid:146)maqng, jat(cid:145) tg di(cid:145)qjeia jai let(cid:145) to t(cid:146)kor tgr letapo(cid:148)gsgr. Cia to sjop(cid:149) aut(cid:149), oi letapoigt(cid:146)r pq(cid:146)pei opoiad(cid:147)pote sticl(cid:147) ma e(cid:148)mai se h(cid:146)sg ma apode(cid:148)noum tgm taut(cid:149)tgta jai tg wq(cid:147)sg tou jq(cid:146)a- tor l(cid:146)sy tym jat(cid:145)kkgkym lgtq(cid:150)ym paqacyc(cid:147)r. Jat(cid:145) tg di(cid:145)qjeia tou tewmijo(cid:151) ek(cid:146)cwou, tgr leh(cid:149)dou paqacyc(cid:147)r ap(cid:149) tgm aql(cid:149)dia aqw(cid:147), sto bahl(cid:149) pou e(cid:148)mai apaqa(cid:148)tgto, lpoqo(cid:151)m ma kalb(cid:145)momtai up(cid:149)xg oi ap(cid:150)keier ucq(cid:150)m jai najqidi(cid:150)m jq(cid:146)ator. Cia ma enajqibyhe(cid:148) g poi(cid:149)tgta tou tekijo(cid:151) pqo(cid:152)(cid:149)mtor jai g amtistoiw(cid:148)a le tgm l(cid:146)hodo tou letapoigt(cid:147), ta jq(cid:145)tg l(cid:146)kg kalb(cid:145)moum amtipqosypeutij(cid:145) de(cid:148)clata jai pqaclato- poio(cid:151)m amak(cid:151)seir tym pqo(cid:152)(cid:149)mtym. To j(cid:149)stor tym eqcasi(cid:150)m aut(cid:150)m baq(cid:151)mei to swetij(cid:149) letapoigt(cid:147). To (cid:145)qhqo 1 tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2182/77 dem 2. evaql(cid:149)fetai. (cid:129)qhqo 5 1. To pos(cid:149) tgr ecc(cid:151)gsgr pou pqobk(cid:146)petai sto (cid:145)qhqo 15 paq(cid:145)cqavor 1 tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2173/79 jahoq(cid:148)- fetai se 12 euq(cid:150) am(cid:145) 100 wiki(cid:149)cqalla. To pos(cid:149) tgr ecc(cid:151)gsgr pou pqobk(cid:146)petai sto (cid:145)qhqo 4 2. paq(cid:145)cqavor 1 tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2182/77 jahoq(cid:148)- fetai se 700 euq(cid:150) am(cid:145) t(cid:149)mo. Jat(cid:145) paq(cid:146)jjkisg ap(cid:149) to (cid:145)qhqo 5 paq(cid:145)cqavor 3 tou 3. jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2182/77, g letapo(cid:148)gsg (cid:149)kou tou acoqash(cid:146)mtor jq(cid:146)ator se tekij(cid:145) pqo(cid:152)(cid:149)mta, (cid:149)pyr amav(cid:146)qe- tai stgm a(cid:148)tgsg acoq(cid:145)r, apoteke(cid:148) basij(cid:147) apa(cid:148)tgsg. Basij(cid:147) apa(cid:148)tgsg apoteke(cid:148) ep(cid:148)sgr g dyqe(cid:145)m am(cid:145)kgxg (cid:149)kym tym paqawh(cid:146)mtym letapoigl(cid:146)mym pqo(cid:152)(cid:149)mtym ap(cid:149) ecjejqi- l(cid:146)mg ap(cid:149) tir iqkamdij(cid:146)r aqw(cid:146)r lg jubeqmgtij(cid:147) oqc(cid:145)mysg le sjop(cid:149) tgm episitistij(cid:147) bo(cid:147)heia. Ap(cid:149)deing tgr ejpk(cid:147)qysgr tgr apa(cid:148)tgsgr aut(cid:147)r apoteke(cid:148) (cid:146)ccqavo pou ejd(cid:148)detai jai upocq(cid:145)vetai ap(cid:149) tgm em k(cid:149)cy oqc(cid:145)mysg sto opo(cid:148)o ama- cq(cid:145)vetai g pos(cid:149)tgta tym dyqe(cid:145)m amakgvh(cid:146)mtym letapoig- l(cid:146)mym pqo(cid:152)(cid:149)mtym. 21. 4. 1999 EL Ep(cid:148)sglg Evgleq(cid:148)da tym Euqypa(cid:152)j(cid:150)m Joimot(cid:147)tym L 104/11 (cid:129)qhqo 6 Jat(cid:145) paq(cid:146)jjkisg ap(cid:149) to (cid:145)qhqo 9 tou jamomislo(cid:151) (EOJ) aqih. 2182/77, epipk(cid:146)om tym emde(cid:148)neym pou amav(cid:146)qomtai stom jamomisl(cid:149) (EOJ) aqih. 3002/92: (cid:190) G h(cid:146)sg 104 tou amtit(cid:151)pou ek(cid:146)cwou T5 pq(cid:146)pei ma peqi- kalb(cid:145)mei (cid:146)ma (cid:147) peqiss(cid:149)teqa ap(cid:149) ta aj(cid:149)kouha stoiwe(cid:148)a: (cid:190) Para transformaci(cid:155)n [Reglamentos (CEE) no 2182/ 77 y (CE) no 822/1999] (cid:190) Til forarbejdning (forordning (EØF) nr. 2182/77 og (EF) nr. 822/1999) Verarbeitung (cid:190) Zur bestimmt (Verordnungen (EWG) Nr. 2182/77 und (EG) Nr. 822/1999) (cid:190) Cia letapo(cid:148)gsg [jamomislo(cid:148) (EOJ) aqih. 2182/77 jai (EJ) aqih. 822/1999] (cid:190) For processing (Regulations (EEC) No 2182/77 and (EC) No 822/1999) (cid:190) Destin(cid:130)s (cid:133) la transformation [r(cid:138)glements (CEE) no 2182/77 et (CE) no 822/1999] (cid:190) Destinate alla trasformazione [regolamenti (CEE) n. 2182/77 e (CE) n. 822/1999] (cid:190) Bestemd om te worden verwerkt (Verordeningen (EEG) nr. 2182/77 en (EG) nr. 822/1999) (cid:190) Para transforma(cid:135)(cid:209)o [Regulamentos (CEE) n. o 2182/ 77 e (CE) n. o 822/1999] (cid:190) Jalostettavaksi (Asetukset (ETY) N:o 2182/77 ja (EY) N:o 822/1999) (cid:190) F(cid:148)r bearbetning (F(cid:148)rordningarna (EEG) nr 2182/ 77 och (EG) nr 822/1999). (cid:190) G h(cid:146)sg 106 tou amtit(cid:151)pou ek(cid:146)cwou T5 pq(cid:146)pei ma tgm gleqolgm(cid:148)a tgr s(cid:151)lbasgr sulpkgq(cid:150)metai le p(cid:150)kgsgr. (cid:129)qhqo 7 O paq(cid:150)m jamomisl(cid:149)r aqw(cid:148)fei ma isw(cid:151)ei tgm ep(cid:149)lemg gl(cid:146)qa ap(cid:149) tg dglos(cid:148)eus(cid:147) tou stgm Ep(cid:148)sglg Evgleq(cid:148)da tym Euqypa(cid:152)j(cid:150)m Joimot(cid:147)tym. O paq(cid:150)m jamomisl(cid:149)r e(cid:148)mai desleutij(cid:149)r yr pqor (cid:149)ka ta l(cid:146)qg tou jai isw(cid:151)ei (cid:145)lesa se j(cid:145)he jq(cid:145)tor l(cid:146)kor. Bqun(cid:146)kker, 20 Apqik(cid:148)ou 1999. Cia tgm Epitqop(cid:147) Franz FISCHLER L(cid:146)kor tgr Epitqop(cid:147)r L 104/12 EL Ep(cid:148)sglg Evgleq(cid:148)da tym Euqypa(cid:152)j(cid:150)m Joimot(cid:147)tym 21. 4. 1999 ANEXO I (cid:190) BILAG I (cid:190) ANHANG I (cid:190) PAQAQTGLA I (cid:190) ANNEX I (cid:190) ANNEXE I (cid:190) ALLEGATO I (cid:190) B(cid:246)LAGE I (cid:190) ANEXO I (cid:190) LIITE I (cid:190) BILAGA I Estado miembro Medlemsstat Mitgliedstaat Jq(cid:145)tor l(cid:146)kor Member State (cid:144)tat membre Stato membro Lidstaat Estado-membro J(cid:132)senvaltio Medlemsstat Productos Produkter Erzeugnisse Pqo(cid:152)(cid:149)mta Products Produits Prodotti Producten Produtos Tuotteet Produkter Cantidad aproximada (toneladas) Tilnærmet mængde (tons) Ungef(cid:132)hre Mengen (Tonnen) Jat(cid:145) pqos(cid:146)ccisg pos(cid:149)tgta (t(cid:149)moi) Approximate quantity (tonnes) Quantit(cid:130) approximative (tonnes) Quantit(cid:133) approssimativa (tonnellate) Hoeveelheid bij benadering (ton) Quantidade aproximada (toneladas) Arvioitu m(cid:132)(cid:132)r(cid:132) (tonneina) Ungef(cid:132)rlig kvantitet (ton) Precio de venta expresado en euros por tonelada Salgspriser i EUR/ton Verkaufspreise, ausgedr(cid:129)ckt in EUR/Tonne Til(cid:146)r p(cid:150)kgsgr ejvqaf(cid:149)lemer se Euq(cid:150) am(cid:145) t(cid:149)mo Selling prices expressed in EUR per tonne Prix de vente exprim(cid:130)s en euros par tonne Prezzi di vendita espressi in euro per tonnellata Verkoopprijzen uitgedrukt in euro per ton Pre(cid:135)o de venda expresso em euros por tonelada Myyntihinta euroina tonnilta F(cid:148)rs(cid:132)ljningspris i euro per ton IRELAND (cid:190) Intervention shank (INT 11) (cid:190) Intervention shin (INT 21) (cid:190) Intervention forequarter (INT 24) 150 150 200 500 500 750 ANEXO II (cid:190) BILAG II (cid:190) ANHANG II (cid:190) PAQAQTGLA II (cid:190) ANNEX II (cid:190) ANNEXE II (cid:190) ALLEGATO II (cid:190) B(cid:246)LAGE II (cid:190) ANEXO II (cid:190) LIITE II (cid:190) BILAGA II Direcciones de los organismos de intervenci(cid:155)n (cid:190) Interventionsorganernes adresser (cid:190) Anschriften der Interventionsstellen (cid:190) Dieuh(cid:151)mseir tym oqcamisl(cid:150)m paqelb(cid:145)seyr (cid:190) Addresses of the intervention agencies (cid:190) Adresses des organismes d’intervention (cid:190) Indirizzi degli organismi d’intervento (cid:190) Adressen van de interventiebureaus (cid:190) Endere(cid:135)os dos organismos de interven(cid:135)(cid:209)o (cid:190) Interventio- elinten osoitteet (cid:190) Interventionsorganens adresser IRELAND Department of Agriculture and Food Johnstown Castle Estate County Wexford Ireland Tel. : Telefax: (353 53) 428 42 (353 53) 634 31