title: Директива 2000/33/ЕО на Комисията от 25 април 2000 година относно двадесет и седмо адаптиране към техническия прогрес на Директива 67/548/EИО на Съвета за сближаването на законовите, подзаконовите и административни разпоредби относно класификацията, опаковането и етикетирането на опасни веществатекст от значение за ЕИП.

formats: html pdf print xhtml

text: 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 125 32000L0033 L 136/90 ОФИЦИАЛЕН ВЕСТНИК НА ЕВРОПЕЙСКИТЕ ОБЩНОСТИ 8. 6. 2000 ДИРЕКТИВА 2000/33/ЕО НА КОМИСИЯТА от 25 април 2000 година относно двадесет и седмо адаптиране към техническия прогрес на Директива 67/548/EИО на Съвета за сближаването на законовите, подзаконовите и административни разпоредби относно класификацията, опаковането и етикетирането на опасни вещества (*) (текст от значение за ЕИП) КОМИСИЯТА НА ЕВРОПЕЙСКИТЕ ОБЩНОСТИ, ПРИЕ НАСТОЯЩАТА ДИРЕКТИВА: като взе предвид Договора за създаване на Европейската общност, Член 1 като взе предвид Директива 67/548/EИО на Съвета от 27 юни 1967 г. за сближаване на законовите, подзаконовите и админис- тративни разпоредби относно класификацията, опаковането и ети- кетирането на опасни вещества (1), последно изменена от Дирек- тива 1999/33/ЕО на Европейския парламент и на Съвета (2), и по-специално член 28 от нея, като има предвид, че: (1) (2) (3) (4) Приложение V към Директива 67/548/ЕИО урежда мето- за определяне на физикохимическите свойства, дите токсичността и екотоксичността препаратите. Необходимо е това приложение да се приведе в съответствие с постиженията на техническия прогрес. веществата на и Съгласно член 7, параграф 2 от Директива 86/609/ЕИО на Съвета от 24 ноември 1986 г. за сближаване на законовите, подзаконовите и административните разпоредби на държавите-членки относно защита на животните, изпол- звани за опитни и други научни цели (3), експеримент, при който се налага използването на животни не следва да бъде провеждан, ако съществува и е практически достъпен друг научен метод, с помощта на който да се постигнат търсените резултати. Комисията възнамерява да въведе в приложение V към Директива 67/548/ЕИО алтернативни тест-методи, при които не се използват животни, с цел запазването им за тестване на химични вещества в съответствие с член 3, параграф 1 от Директива 67/548/ЕИО. Предвидените в настоящата директива мерки са в съответ- ствие със Становището на Комитета по адаптиране към тех- ническия прогрес на директивите за премахване на техни- ческите пречки пред търговията с опасни вещества и препарати, Текстовете в приложение I и приложение II към настоящата директива се добавят към част Б на приложение V към Директива 67/548/ЕИО. Член 2 1. Държавите-членки въвеждат в сила не по-късно от 1 октомври 2001 г. законовите, подзаконовите и административните разпо- редби, необходими, за да се съобразят с настоящата директива. Те незабавно информират Комисията за това. Когато държавите-членки приемат тези разпоредби, в тях се съдържа позоваване на настоящата директива или то се извършва при официалното им публикуване. Условията и редът на позова- ване се определят от държавите-членки 2. Държавите-членки съобщават на Комисията текста на основ- ните разпоредби от националното законодателство в областта, уре- дена с настоящата директива, както и таблица на съответствието между разпоредбите на настоящата директива и приетите нацио- нални разпоредби. Член 3 Настоящата директива влиза в сила на третия ден от датата на публикуването ѝ(cid:65) в Официален вестник на Европейските общности. Адресати на настоящата директива са държавите-членки. Член 4 Съставено в Брюксел на 25 април 2000 година. За Комисията Margot WALLSTRÖM Член на Комисията (*) Приета преди 26-та адаптация. (1) ОВ L 196, 16. 8. 1967 г. , стр. 1. (2) ОВ L 199, 30. 7. 1999 г. , стр. 57. (3) ОВ L 358, 18. 12. 1986 г. , стр. 1. 126 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 ПРИЛОЖЕНИЕ 1 „Б. 40. КОРОЗИЯ НА КОЖАТА 1. 1. 1 METОД Въведение Двата теста ин витро за корозивност на кожата, едно изследване на транскутантната електрическа резистентност (TEР) при плъховете и един тест с използване на модела на човешката кожа са одобрени като научно обосновани от Европейския център за утвърждаване на алтернативни методи (ЕCVAM) (1) (2) (3). Проучването за утвърждаване, направено от ЕCVAM показва, че и двата теста дават възможност да се диференцират познатите кожни корозивни вещества от не-корозивните. Освен това, протоколът от теста, основаващ се на модела на човешката кожа, позволява точно разграничение между степените на корозивните ефекти (познати като тежки кожни корозиви, R35, и други кожни корозиви, R34) (2). Oписанията и процедурите по двата теста са дадени по-долу; изборът на определен тест зависи от специфичните изисквания и предпочитания на потребителя. Виж също „Общо въведение“, част Б. 1. 2. Дефиниции Корозия на кожата: необратимо увреждане на кожата, вследствие на прилагането на проучвания материал. 1. 3. Референтни вещества Не са уточнени, но виж т. 1. 5. 3. 4 и 1. 7. 2. 3. 1. 4. Принцип на тест-метода — кожен тест TEР при плъхове Материалът за тестване се поставя за 24 часа върху епидермалната повърхност на кожни проби, взети от необработени кожи на хуманно убити млади плъхове. Корозивните материали се идентифицират според способността им да предизвикват загуба на целостта при нормална слоеста структура на роговия слой, както и нарушаване на предпазната му функция, което се измерва като намаление на вродената TEР под определено прагово ниво(5 кΩ) (4) (5). Дразнещи и недразнещи материали не намаляват TEР под праговото ниво. В тестовата процедура може да се включи стъпка за свързване на повърхностно-активни и неутрални органични вещества (за дефиниция виж (6) с багрилно вещество, с цел намаляване на неверните положителните резултати, получавани специфично с тези химични видове (2) (7). 1. 5. Описание на тест — метода — кожен тест TEР при плъхове 1. 5. 1. Животни За подготовката на кожни проби се изискват млади (20—23 дневни) плъхове (от порода Wistar или подобна). Козината по гърба и хълбоците се отстранява внимателно с малки животински ножици. След това животните се измиват внимателно, като областта се обработва с антибиотичен разтвор (съдържащ, например стрептомицин, пеницилин, хлорамфеникол или амфотерицин в концентрация, инхибираща ефективно бактериалния растеж). Животните се измиват отново с антибиотичен разтвор на третия или четвъртия ден след първото измиване, и се използват в рамките на 3 дни (за да се използват за кожни проби, животните не трябва да са по-стари от 31 дни). 1. 5. 2. Подготовка на кожни проби Животните се убиват по хуманен начин. Отстранява се кожата от гърба на всяко животно, като излишната мазнина внимателно се отделя чрез обелване от кожния слой. Необработената кожа се поставя върху една политетрафлуоретиленов (РTFE) тръба така че повърхността на епидермиса да е в контакт с тръбата. Гумен пръстен с формата на буквата „О“ е вкаран плътно върху единия край на тръбата така че да държи кожата, а излишната тъкан се отстранява. Размерите на тръбата и на О-образния гумен пръстен са показани на фигура 1. Посредством гумения пръстен се запечатва единия край на тръбата с керосинов клей. Тръбата се поддържа от пружинен клипс(скоба) във вътрешността на рецепторна камера, съдържаща разтвор на магнезиев сулфат(154 mM) (фигура 2). 1. 5. 3. Процедура за тестване 1. 5. 3. 1. П р и л а г а н е н а м а т е р и а л а з а т е с т в а н е Проучваните течни вещества (150 µl) се прилагат върху епидермалната повърхност, намираща се в тръбата (фигура 2). Ако се тестват твърди материали, необходимо е да се приложи достатъчно количество от твърдия материал върху пробата, така че цялата повърхност на епидермиса да бъде покрита. Добавя се дейонизирана вода (150 µl) до върха на материала и тръбите внимателно се разклащат. Тестваните вещества следва да имат плътен контакт с кожата. За някои вещества това може да бъде постигнато посредством нагряването им до 30 °С с цел разтопяване на веществото или чрез стриване до получаване на гранули или прах. 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 127 За всяко проучвано вещество се използват по три кожни проби. Проучваните вещества се прилагат в продължение на 24 часа (виж също 1. 5. 3. 4). Тестваното вещество се отстранява на струя течаща вода при температура до 30 °С до пълното отстраняване на материала. Отстраняването на втвърдилите се в тръбата проучвани вещества може да се улесни чрез измиването им със струя вода с температура приблизително 30 °С. 1. 5. 3. 2. И з м е р в а н и я н а Т Е Р ТЕР се измерва като се използва мост с нисковолтов, променлив ток (AIM 401 или 6401, или еквивалентен на тях). Преди измерване на електрическото съпротивление повърхностното напрежение на кожата се намалява, като епидермисът се покрива достатъчно добре със 70 % разтвор от етанол (етилов алкохол). След няколко секунди етанолът се отстранява, като тръбата се обръща и тъканта се хидратира с добавяне на 3 ml. разтвор на магнезиев сулфат (154 mM). Електродите на измервателния мост се поставят от двете страни на кожната проба, за да се получи измерване на съпротивлението в кΩ/кожна проба (диск) (фигура 2). Размерите на електродите, а също и размерите на непокритата им част под „крокодилските“ клипси, са показани на фигура 1. По време на измерване на съпротивлението придържащият вътрешния (дебел) електрод „крокодилски“ клипс, остава на върха на тефлоновата тръба, така че да осигури потопяването на достатъчна дължина от електрода в разтвора от магнезиев сулфат. Външният (тънък) електрод се поставя във вътрешността на рецепторната камера, така че да опира на нейното дъно. Разстоянието от долната повърхност на пружинения клипс до дъното на тефлоновата тръба се поддържа постоянно (фиг. 1), тъй като то влияе на измереното съпротивление. Да се има предвид, че ако измереното съпротивление надвишава 20 кΩ, това може да се дължи на слоя проучвано вещество, покриващо епидермалната повърхност на кожния диск. Отстраняването на този слой може да се извърши, като например тефлоновата тръба се запуши с пръст от ръкавица, след това се разклати за около 10 секунди; разтворът от магнезиев сулфат се отстранява и измерването на резистентността (съпротивлението) се повтаря с нов магнезиев сулфат. Получените средни резултати за ТЕР се приемат при условие че едновременно проведените положителни и отрицателни контроли попадат в рамките на допустимите за метода. Предложените контролни вещества и съответните им допустими области за транскутанна електрическа резистентност според възприетата методология и апаратура, са дадени по-долу: Контрола Вещество Положителна 10 М солна киселина(36 %) Отрицателна Дестилирана вода Област на резистентност (кΩ) 0,5—1,0 10—25 1. 5. 3. 3. П р о м е н е н а п р о ц е д у р а з а п о в ъ р х н о с т н о - а к т и в н и и н е у т р а л н и о р г а н и ч н и в е щ е с т в а Ако стойностите на ТЕР за проучваните вещества, които са или повърхностно-активни или неутрални органични вещества, са по-малки или равни на 5 кΩ, следва да се направи оценка на степента на проникване на багрилното вещество в тъканта. Тази процедура определя дали резултатите са невярно положителни (2). 1. 5. 3. 3. 1. Приложение и отстраняване на багрилото сулфородамин Б След начална обработка с проучваното вещество, 150 µl от 10 %(w/v) разтвор на сулфородамин Б в дестилирана вода, се прилага върху епидермалната повърхност на всеки кожен диск в продължение на 2 часа. След това кожните дискове се измиват на струя течаща вода при стайна температура за около 10 секунди, за да се отстрани излишното(несвързано) багрило. Всеки кожен диск се изважда от тефлоновата тръба и се поставя в стъкленица (20 ml стъклен чист съд), съдържаща дейонизирана вода (8ml). Стъклениците се разклащат внимателно за около 5 минути с цел отстраняване на останалото излишното(несвързано) багрило. Тази процедура на изплакване се повтаря, след което кожните дискове се изваждат и поставят в стъкленици, съдържащи 5 ml от 30 %(W/v) разтвор на натриев додецилсулфат (НДС) в дестилирана вода, и се инкубират в продължение на една нощ при температура 60 °С. След инкубирането всеки кожен диск се отделя и отстранява, като останалият разтвор се центрофугира в продължение на 8 мин. при температура 21 °С (относителна центрофугираща сила ~ 175). Проба от 1 ml суперанатант се разрежда в отношение 1 в 5(v/v) (т. е. 1 ml + 4 ml) със 30 % (w/v) НДС в дестилирана вода. Оптичната плътност на разтвора се измерва при дължина на вълната около 565 nm. 1. 5. 3. 3. 2. Изчисляване съдържанието на багрилото Съдържанието на багрилото сулфородамин Б във всяка проба се изчислява според стойностите на оптичната плътност (коефицентът на моларна екстинкция на сулфородамин Б при дължина на вълната 565 nm = 8,7 × 104; молекулярно тегло = 580). Съдържанието на сулфородамин Б се определя за всеки кожен диск по отделно, след което за повторните тестове се изчислява средна величина. Средните резултати за свързването на багрилото се приемат при условие че стойностите на едновременно извършените контролни тестове, попадат в обсега на допустимите за метода. Предлаганите приемливи области за съдържание на багрилото в контролните вещества по отношение на методологията и апаратурата, са дадени по-долу: 128 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 Контрола Вещество Положителна 10 М солна киселина(36 %) Отрицателна Дестилирана вода 1. 5. 3. 4. Д о п ъ л н и т е л н а и н ф о р м а ц и я Област на съдържа- нието на багрилото (µg/проба) 40-100 15-35 Проучваните вещества могат да бъдат приложени върху кожните дискове за по-кратки периоди (например 2 часа) с цел идентифициране на онези материали, които са силно корозивни. Проучване за установяване на валидност открива, че определянето на ТЕР надценява корозивния потенциал на няколко проучвани химически вещества след прилагането им върху кожните дискове за период от 2 часа (2), въпреки, че точно са идентифицирани корозивните и не-корозивните вещества след 24 - часово прилагане. Свойствата и размерите на опитната апаратура и използваната експериментална процедура могат да окажат влияние върху получените стойности за ТЕР. Прагът за корозивност от 5 кΩ е уточнен според данните, получени със специалната апаратура и процедура, описани в този метод. В случай, че опитните условия са променени значително, то тогава се използват друг праг и контролни стойности. Ето защо се препоръчва методологията и стойността на прага на резистентност да бъдат калибрирани посредством тестуване на серия от референтни стандарти, избрани от химическите вещества, използвани в проучването за валидност (3). 1. 6. Принцип на тест — метода — анализ на човешкия модел на кожата Проучваните материали се прилагат в продължение на 4 часа локално, към три измерен модел на човешката кожа, представляващ реконструиран епидермис с функционален рогов слой. Корозивните материали се идентифицират според тяхната способност да предизвикват намаляване на жизнеността на клетките (определя се например, чрез използването на теста за намаляване на МТТ) под определени прагови нива при определени експозиционни периоди. Принципът на опита е в съответствие с хипотезата, че корозивните химически вещества са тези, които са способни да проникнат в роговия слой (чрез дифузия или ерозия) и са достатъчно цитотоксични, за да причинят смърт на клетките в подлежащите клетъчни слоеве. 1. 7. Описание на метода за тестване — анализ на човешкия модел на кожата 1. 7. 1. Модели на човешката кожа Моделите на човешката кожа произхождат от различни източници и трябва да отговарят на определени критерии. Моделът следва да притежава функционален рогов слой с подлежащ слой от живи клетки. Пазещата (бариерната) функция на роговия слой следва да бъде адекватна. Това може да се докаже чрез определяне на резистентността на модела към цитотоксичността, последвала прилагането на вещества, познати като цитотоксични към клетките, но които нормално не преминават през роговия слой. Моделът следва да дава резултати при определени експериментални условия. Жизнеспособността на живите клетки на модела следва да е достатъчно висока, за да разграничи добре положителните от отрицателните контролни вещества. Клетъчната жизнеспособност (например, измерена със степента на понижаването на МТТ, т. е. стойността на оптическата плътност ОП) след излагане на действието на отрицателно контролно вещество следва да попадне в приемливи за съответния модел граници. По подобен начин стойностите за клетъчна жизнеспособност под действие на положителното контролна вещество (отнесени към тези за отрицателната контрола) следва също да попаднат в определени граници. Най-важното е да се покаже, че използваният предсказващ модел отговаря на утвърдените международни стандарти (2). 1. 7. 2. Процедура за тестване 1. 7. 2. 1. П р и л а г а н е н а п р о у ч в а н и я м а т е р и а л По отношение на течните материали, следва да се приложи достатъчно количество от проучваното вещество, така че да се покрие повърхността на кожата (минимално 25μl/cm2). По отношение на твърдите материали, следва да се приложи достатъчно количество от проучваното вещество, така че да се покрие повърхността на кожата, последната да бъде навлажнена с цел осигуряване на добър контакт с нея; при необходимост твърдите вещества, преди използването им, могат да бъдат стрити на прах. Трябва да се докаже, че прилаганият метод е подходящ за широк набор от химически вещества (2). В края на експозиционния период, проучваният материал трябва да бъде измит внимателно от кожната повърхност с физиологичен разтвор. 1. 7. 2. 2. О п р е д е л я н е н а ж и з н е н о с т т а н а к л е т к и т е Всеки един утвърден количествен метод би могъл да бъде използван за определяне жизнеспособността на клетките. Най-често използваният количествен метод е изследване на МТТ редуцирането, доказал, че представя точни и резултати в различни лаборатории(2). Кожният диск се поставя в МТТ разтвор с концентрация 0,3 mg/ml при температура 20—28 °С в продължение на 3 часа. Утаилият се син формазанов продукт се екстрахира (екстракция на разтворителя) и концентрацията на формазана се измерва посредством определяне на оптичната плътност при дължина на вълната между 545 и 595 nm. 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 129 1. 7. 2. 3. Д о п ъ л н и т е л н а и н ф о р м а ц и я Използваният модел на кожата и точният протокол за времето на експозиция, както и процедурите по измиване, и. т. н. оказват най-голямо влияние върху резултатите за оценка на клетъчната жизнеспособност. Препоръчва се методологията и модел на прогнозиране да се калибрират посредством тестването на серия от референтни стандарти, избрани от химическите вещества, използвани в проучването за валидност на ECVAM (3). Изключително важно е да се покаже, че използваният метод е в рамките на всяка една и между отделните лаборатории, по отношение на широк кръг от химически вещества, в съответствие с международните стандарти. Като минимално условие се изисква методът да отговаря на критериите за научна достоверност, дефинирана предварително (2), като резултатите от такова утвърдително проучване трябва да бъдат публикувани в обзорно научно списание. 2. ДАННИ 2. 1. Обработване на резултатите 2. 1. 1. Изследване на кожна ТЕР при плъховете Стойностите за резистентност (кΩ) на проучвания материал, положителните и отрицателните контроли, както и всяко стандартно референтно химическо вещество, следва да бъдат представени в таблична форма, включвайки данните за повторените експерименти, средните стойности и създадената класификация. 2. 1. 2. Изследване на модел на човешка кожа Стойностите на оптичната плътност, процентните данни за клетъчната жизнеспособност на проучвания материал, положителните и отрицателните контроли, както и всяко стандартно референтно химическо вещество, следва да бъдат представени в таблична форма, включвайки данните за повторените експерименти, средните стойности и създадената класификация. 2. 2. Оценка и интерпретация на резултатите 2. 2. 1. Изследване на кожна ТЕР при плъховете Ако получената средна стойност на ТЕР за проучваното вещество е по-голяма от 5 кΩ, то не е корозивно. Ако тя е по-малка или равна на 5 кΩ и тестваното вещество не е повърхностно-активно или неутрално органично, то е корозивно. За повърхностно-активните или неутралните органични вещества, чиято стойност за ТЕР е по-малка или равна на 5 кΩ, би могло да бъде направен тест за проникване на багрилото. В случай, че средното количество на багрилото в кожния диск е по-голямо или равно на средното съдържание на багрило в диск, съдържащ 36 % солна киселина като положителна контрола, изследвана едновременно, то тогава проучваното вещество е истински положително и затова корозивно. В случай, че средното количество на багрилото в кожния диск е по-малко от средното съдържание на багрило в диск, съдържащ 36 % солна киселина като положителна контрола, получена едновременно, то тогава проучваното вещество е невярно положително и затова не-корозивно. 2. 2. 2. Изследване на модел на човешка кожа Стойността на отрицателната контрола на оптичната плътност представлява 100 % жизнеспособност на клетката; оттук следва, че стойностите на оптичната плътност, получени за всяка проба, могат да бъдат използвани за изчисляване на процентната жизнеспособност, отнесена към отрицателната контрола. Процентната граничната прагова стойност за клетъчна жизнеспособност, разграничаваща корозивните от не-корозивните проучвани материали (или отличава различните корозивни класове), трябва да бъде ясно определен в модел на прогнозиране преди узаконяването на метода, като следващото проучване за валидност трябва да потвърди, че този праг е достоверен (2). 3. ДОКЛАДВАНЕ Доклад за теста Докладът за теста трябва да включва най-малко следната информация: Проучвано вещество: — Идентифициращи данни, физична същност и при необходимост - данни за физико-химичните свойства. Подобна информация следва да се представи и за референтните вещества, в случай че се използват. Условия на теста: — подробности за използваната тестова процедура, — описание и обосновка на всякакъв вид промени. 130 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 Резултати: — представяне в табличен вид на стойностите за резистентност (изследване на ТЕР) или процентната стойност за клетъчна жизнеспособност (изследване на модел на човешка кожа) на проучвания материал, положителните и отрицателните контроли, както и всяко стандартно референтно химическо вещество, включвайки данните за повторените експерименти и средните стойности. — описание на всички други наблюдавани ефекти. Обсъждане на резултатите. Заключения. 4. ПОЗОВАВАНИЯ (1) ECVAM (1998), ECVAM News & Views, ATLA 26, pp. 275-280. (2) Fentem, J. H. , Archer, G. E. B. , Balls, M. , Botham, P. A. , Curren, R. D. , Earl, L. K. , Esdaile, D. J. , Holzhutter, H-G. & Liebsch, M. (1998), The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin corrosivity. 2. Results and evaluation by the Management Team, Toxicology in Vitro 12, pp. 483-524. (3) Barratt, M. D. , Brantom, P. G. , Fentem, J. H. , Gerner, I. , Walker, A. P. & Worth, A. P. (1998), The ECVAM international validation study on in vitro tests for skin corrosivity. 1. Selection and distribution of the test chemicals, Toxicology in Vitro 12, pp. 471-482. (4) Oliver, G. J. A. , Pemberton, M. A. & Rhodes, C. (1986), An in vitro skin corrosivity test — modifications and validation, Food & Chemical Toxicology 24, pp. 507-512. (5) Botham, P. A. , Hall, T. J. , Dennett, R. , McCall, J. C. , Basketter, D. A. , Whittle, E. , Cheeseman, M. , Esdaile, D. J. & Gardner, J. (1992), The skin corrosivity test in vitro: results of an interlaboratory trial, Toxicology in Vitro 6, pp. 191-194. (6) Worth, A. P. , Fentem, J. H. , Balls, M. , Botham, P. A. , Curren, R. D. , Earl, L. K. , Esdaile, D. J. & Liebsch, M. (1998), An evaluation of the proposed OECD testing strategy for skin corrosion, ATLA 26, pp. 709-720. (7) Botham, P. A. , Chamberlain, M. , Barratt, M. D. , Curren, R. D. , Esdaile, D. J. , Gardner, J. R. , Gordon, V. C. , Hildebrand, B. , Lewis, R. W. , Liebsch, M. , Logemann, P. , Osborne, R. , Ponec, M. , Regnier, J. F. , Steiling, W. , Walker, A. P. & Balls, M. (1995), A prevalidation study on in vitro skin corrosivity testing. The report and recommendations of ECVAM workshop 6, ATLA 23, pp. 219-255. 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 131 Фигура 1 132 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 Фигура 2 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 133 ПРИЛОЖЕНИЕ II „В. 41. ФОТОТОКСИЧНОСТ — ИН ВИТРО 3T3 NRU ФОТОТОКСИЧЕН ТЕСТ 1. METОД 1. 1. Въведение Фототоксичността се определя като токсична реакция, предизвикана след първото излагане на кожата на действието на определени химични вещества и последващо излагане на светлина, или реакция индуцирана по подобен начин чрез облъчване на кожата след системно прилагане на химично вещество. Информацията, получена от фототоксичния тест ин витро 3T3 NRU (поглъщане на неутрално червено), служи за определяне на фототоксичния потенциал на проучваното вещество, т. е. наличие или липса на възникване на възможни рискове от страна на тестваното вещество при експозиция на ултравиолетова и видима светлина. Тъй като токсикологичната крайна цел на теста ин витро, е определяне на фотоцитотоксичността, индуцирана от комбинираното въздействие на химическото вещество и светлината, съединенията, които са фототоксични ин виво след системно прилагане и разпределение в кожата, както и съединения, които действат като фотодразнители след локално прилагане върху кожата, могат да бъдат определени чрез теста. Фототоксичният тест ин витро 3T3 NRU е разработен и утвърден в съвместен проект на Европейския съюз/Европейската асоциация по парфюмерия и козметика (EU/COLIPA) от 1992—1997 (1) (2) (3) с цел утвърждаване на тест ин витро, алтернативен на използваните дотогава тестове ин виво. През 1996 г. работна среща на Организацията за икономическо сътрудничество и развитие препоръчва провеждането на поредица от опити ин витро, като подход за оценка на фототоксичност (4). ефекти на Резултати от фототоксичния тест ин витро 3T3 NRU са фототоксичност/фотодразнимост ин виво при животни и хора, като тестът показва, че дава отлична предсказуемост на тези ефекти. Тестът не е предназначен за прогнозиране на други неблагоприятни ефекти, които могат да възникнат при комбинираното действие на химическото вещество и светлината, т. е. фотогенотоксичност, фотоалергия и фотоканцерогенност, макар че много химически вещества, които притежават тези специфични свойства, реагират положително в фототоксичния тест ин витро 3T3 NRU. Освен това, фототоксичният тест не е предназначен за оценяване на фототоксичния потенциал. сравнени с силните В допълнението е представен последователен подход за тестване на химически вещества за фототоксичност. 1. 2. Дефиниции Ирадиация: Интензитетът на ултравиолетовата(UV) или видима светлина, падаща върху повърхност, измерен в W/m2 или mW/cm2. Доза светлина: Количеството (= интензитет x време) на ултравиолетовата (UV) или видима светлина, падаща на повърхност, изразена в джаули (W x s) на единица площ, т. е. J/m2 или J/cm2. Ултравиолетова дължина на вълната: означенията, препоръчани от Международната комисия, разработила цветови стандарти CIE (Commission Internationale de L’Eclairage) са: UVA (315—400 nm), UVB (280—315 nm) и UVC (100—280 nm). Използват се и други указания: разделът между UVB и UVA се поставя на 320 nm, като UVA може да бъде разделена на UV-A1 и UV-A2, разделна линия на около 340 nm. Клетъчна жизнеспособност: параметър, измерващ общата активност на клетъчната популация (т. е. поглъщане на неутралното червено багрило в клетъчните лизозоми), който в зависимост от измерената крайна стойност и използвания проект на теста, корелира с общия брой и/или жизненост на клетките. Относителна клетъчна жизнеспособност: клетъчната жизнеспособност, изразена по отношение на отрицателните (с разтворител) контроли, които са определяни по време на цялата тест - процедура (+ UV или - UV), но без да са обработвани с тестваното химическо вещество. Модел на прогнозиране: алгоритъм за трансформиране на резултатите от тест за токсичност в прогнозиране на токсичния потенциал. В настоящото ръководство за теста, ФФД и СФЕ могат да бъдат използвани за трансформиране на резултатите от фототоксичния тест ин витро 3Т3 NRU за прогнозиране на фототоксичния потенциал. ФФД (фактор на фотодразнимост): фактор, получен при сравнението на две еднакво ефективни цитотоксични концентрации (EC50) на проучваното химическо вещество, получени в отсъствието(- UV) и присъствието (+ UV) на не-цитотоксична ирадиация с UVA/видима светлина. СФЕ(среден фото ефект): ново измерване, получено от математически анализ на завършените форми на двете ответни криви на концентрацията, получени в отсъствието(- UV) и присъствието (+ UV) на не-цитотоксична ирадиация с UVA/видима светлина. 134 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 Фототоксичност: остра токсична реакция, предизвикана след първото излагане на кожата на действието на определени химически вещества и последващо излагане на светлина, или която е индуцирана по подобен начин от кожна ирадиация след системно прилагане на химическо вещество. Фотодразнимост: подвид на термина „фототоксичност“, предназначен да опише само тези фототоксични реакции, които се наблюдават в кожата след излагането ѝ(cid:65) на химически вещества (локално или през устата). Тези фототоксични реакции винаги водят до неспецифично увреждане на клетката (подобно на реакция при слънчево изгаряне). Фотоалергия: придобита имунологична реактивност, която не се наблюдава при първото третиране с химическо вещество и светлина, и която се нуждае от индукционен период от една или две седмици преди изявата на кожната реактивност. Фотогенотоксичност: генотоксична реакция, наблюдавана при генетично промяна, предизвикана след излагане на клетки на действието на не-генотоксична доза ултравиолетова/видима светлина и не-генотоксично химическо вещество. Фотоканцерогенност: канцерогенност, стимулирана от повтарящо се прилагане на светлина и химическо вещество. Терминът „фото ко-канцерогенност“, се използва в случай, че предизвиканата с UV туморогенеза (развитие на тумор), се засилва под действието на химично вещество. 1. 3. Референтни вещества Освен положителната контрола хлорпромазин, която следва да бъде тествана при всяко изследване, се препоръчва - при въвеждане на нов фототоксичен тест 3Т3 NRU да се прилагат като референтни химически вещества набор от тези, които се използват в междулабораторни изпитания с наличния тест (1) (3) (13). 1. 4. Начални съображения Съобщава се за голям брой химически вещества, които предизвикват фототоксични ефекти (5) (6) (7) (8). Единствената им обща характеристика е способността им да абсорбират светлинна енергия в слънчевия спектър. Съгласно първия закон на фотохимията (законът на Grotthaus-Draper), фотореакцията изисква достатъчно абсорбиране на светлинна квантова енергия. Така че, преди да се обсъди извършването на биологично проучване, съгласно съществуващото ръководство за теста, следва да се определи абсорбционния спектър в ултравиолетовата/видима зона светлина на проучваното химическо вещество(в съответствие с Ръководството за извършване на тестове 101 на Организацията за икономическо сътрудничество и развитие). Химическото вещество няма фотореактивен потенциал, ако моларният коефицент на екстинкция/абсорбция е по-малък от 10 литра × mol-1 × сm-1, и не е нужно да бъде тествано чрез фототоксичен тест ин витро 3T3 NRU, или какъвто да е друг биологичен тест за установяване на неблагоприятни фотохимични ефекти (Допълнение). 1. 5. Принцип на тест метода Известни са четири механизми, чрез които абсорбирането на светлина от (химически) хромофор може да предизвика фототоксична реакция(7). Всички те увреждат клетката. Ето защо фототоксичният тест ин витро 3T3 NRU се основава на сравнението на цитотоксичността на определено химическо вещество, тествано както при наличие, така и при липса на излагане на не-цитотоксична доза от UVA/видима светлина. Цитотоксичността в този тест се представя като зависимо от концентрацията намаляване на поглъщането на неутрално червено багрило(NR) (9) 24 часа след обработване с проучваните химически вещества и облъчване (ирадиация). Клетки Balb/C 3T3 се култивират в среда в продължение на 24 часа с цел образуване на монослоеве. След това две плаки с по 96 гнезда за всяко едно от проучваните химически вещества предварително се инкубират с осем различни негови концентрации за 1 час. След това една от двете плаки се излага на действието на доза от 5J/cm2 нецитотоксична UVA/видима светлина (+ UV експеримент), докато другата плака се съхранява на тъмно(-UV експеримент). Опитната среда и в двете плаки се заменя с култивирана среда и след нова 24-часова инкубация, клетъчната жизнеспособност се определя с oпит за поглъщане на неутрално червено(NRU) за 3 часа. Относителната клетъчна жизнеспособност се изчислява за всяка от осемте пробни концентрации и се изразява като процент от необработените отрицателни контроли. За да се предскаже фототоксичния потенциал, концентрациите, получени в присъствието(+ UV) и отсъствието(-UV) на облъчване (ирадиация) се сравняват, обикновено на ниво EC50, т. е. при концентрацията, инхибираща клетъчната жизнеспособност с 50 % в сравнение с необработените контроли. 1. 6. Качествени критерии Чувствителност на клетките към UVA, данни от предишни изследвания: клетките следва да бъдат периодично проверявани за чувствителност към UVA. Клетките се посяват при плътност, каквато се използва в фототоксичния тест ин витро 3T3 NRU, облъчват се на следващия ден с дози от 1 до 9 J/cm2 UVA, след което един ден по-късно се определя жизнеспособността на клетката посредством NRU тест. В случай, че жизнеспособността на клетките след ирадиация с 5 J/cm2 UVA не спада под 80 % от жизнеспособността на тъмни контроли, то те отговарят на качествените критерии. Жизнеспособността на клетките не следва да бъде по-малка от 50 % от тази на тъмните контроли при най-високата UVA доза от 9 J/cm2. Такава проверка следва да се извършва на всеки 10-ти пасаж на клетките. UVA чувствителност на отрицателните контролни клетки, настоящ тест: тестът отговаря на критериите за качество, ако отрицателните контроли (клетки в балансиран солен разтвор на Earl (EBSS)) със или без 1 % диметилсулфоксид (DMSO) или 1 % етанол (ЕtOH)) по време на + UVA експеримент показват жизненоспособност, не по-малка от 80 % от тази на необлъчените клетки в същия разтворител, при едновременно протичащ експеримент на тъмно (- UVA). 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 135 Жизнеспособност на отрицателните контроли: абсолютната оптична плътност(OD540 NRU), измерена в NR екстракт от отрицателни контроли, показва дали 1 x 104 на гнездо култивирани клетки са се размножили двойно по време на двудневния опит. Тестът отговаря на общоприетите критерии, ако средната OD540 NRU на необработените контроли е по-голяма или равна на 0,2. Положителна контрола: познато фототоксично химическо вещество се проверява във всеки фототоксичен тест ин витро 3Т3. Препоръчва се хлорпромазин (ХПЗ), който е използван като положителна контрола при стандартизационния тест на Европейския съюз/Европейската федерация на проЗаключениятелите на козметика - EU/COLIPA. За хлорпромазин, тестван според стандартния протокол по време на фототоксичния тест ин витро 3Т3, са одобрени следните критерии за приемливост на теста: облъчен (ирадииран) хлорпромазин (+ UVA): EC50 = 0,1-2,0 µg/ml, необлъчен хлорпромазин (- UVA): EC50 = 7,0-90,0 µg/ml. Факторът за фотодразнимост (ФФД), т. е. промяната в EC50, следва да бъде най-малко 6. Други познати фототоксични химически вещества, отговарящи на химическия клас или на характеристиките за разтворимост на проучваното химическо вещество, след оценка могат да се използват като равностойни положителни контроли, заместители на хлорпромазин. В този случай, основавайки се на данни от предишни изследвания, следва да бъдат прецизно определени областта от значения за ЕС50 и ФФД или СФЕ (среден фотоефект), като критерии за приемливост на теста. 1. 7. Описание на тест метода 1. 7. 1. Препарати 1. 7. 1. 1. К л е т к и Постоянна клетъчна линия от фибробласти на мишки — Balb/c 3T3, клонинг 31, получени или от АТСС или от ЕСАСС, е използвана в проучването за стандартизация (узаконяване), заради което се и препоръчва. Ако условията за отглеждане се адаптират към специфичните нужди на клетките, то и други клетки или клетъчни линии може да се използват успешно със същия протокол за тестване, но трябва тяхната еднозначност да е доказана. Клетките следва да бъдат редовно проверявани за микоплазмено замърсяване и следва да бъдат използвани само в случай, че резултатите са задоволителни. Тъй като UVA чувствителността на клетките може да се увеличава с броя пасажите, следва да бъдат използвани клетки Ваlb/c 3Т3 от най-ниския получен пасажен номер, за предпочитане по-малък от 100. Необходимо е чувствителността към UVA на клетки Ваlb/c 3Т3 да бъде редовно проверявана, в съответствие с процедурата за контрол на качеството, описана в настоящето ръководство. 1. 7. 1. 2. С р е д а и у с л о в и я з а о т г л е ж д а н е За обичайния пасаж на клетки, както и по време на процедурата за тестване, следва да се използват подходяща среда за култивиране и условия за инкубация. По отношение на клетки Ваlb/c 3Т3, това са DMEM, допълнен с 10 % серум от новородено теле, 4 mM глутамин, пеницилин и стрептомицин; както и влажна инкубация при 37 °С/7,5 % СО2. Особено важно е условията за отглеждане на клетки да осигурят времеви клетъчен цикъл в рамките на нормалния за използваните клетките или клетъчни линии. 1. 7. 1. 3. П о д г о т о в к а н а к у л т у р и Клетки от замразени култури се посяват в средата за култивиране при подходяща плътност, и се прекултивират поне веднъж преди да се използват в фототоксичния тест ин витро 3T3 NRU. За да изпълнят условията на теста за фототоксичност, клетките се посяват в средата за отглеждане при плътност, която да не позволи сливане на материала към края на теста, т. е. при определяне на клетъчната жизнеспособност 48 часа след посяването им. За клетки Ваlb/c 3Т3 се препоръчва култивиране в плаки от по 96 гнезда, при плътност 1 × 104 клетки на гнездо. За всяко едно проучвано химическо вещество клетките се посяват по един и същ начин в две отделни плаки с по 96 гнезда всяка, обработвани едновременно по време на цялата тест процедура, при едни и същи условия за отглеждане, с изключение на периода от време, за който една от плаките е облъчена (+ UVA/vis), а другата е държана на тъмно (- UVA/vis). 1. 7. 1. 4. М е т а б о л и т н о а к т и в и р а н е Докато употребата на метаболизиращи системи е основно изискване за всички тестове ин витро за предсказване наличието на точка на фототоксикологията досега няма познато химическо вещество, за което да е необходима метаболитна трансформация, която да му позволи да действа като фототоксин ин виво или ин витро. Поради това не е нито необходимо, нито научно обосновано, настоящият тест да бъде провеждан с участието на метаболитна активираща система. генотоксичен или канцерогенен потенциал, от гледна 136 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 1. 7. 1. 5. П р о у ч в а н о х и м и ч е с к о в е щ е с т в о / п о д г о т о в к а Проучваните химически вещества трябва да бъдат приготвени непосредствено преди употреба, освен ако данните за стабилност не показват, че съхранението им е надеждно и приемливо. Изисква се подготовка на веществата под червена светлина тогава, когато е възможна бърза фотодеградация. Проучваните химически вещества следва да бъдат разтворени в буферирани солени разтвори, напр. балансирания солен разтвор на Earl (EBSS) или фосфатен буфер (PBS), които с цел да се избегне интерференция по време на облъчване, трябва да не съдържат белтъчни компоненти, както и абсорбиращи светлина pH индикаторни оцветители. Проучваните химически вещества с ограничена разтворимост във вода следва да бъдат разтваряни в подходящи разтворители в желаната 100-кратно по-ниска крайна концентрация, а след това разредени 1:100 с буфериран солен разтвор. Ако се използва разтворител, той трябва да присъства в постоянна концентрация от 1 %(v/v) във всички култури, т. е. както в отрицателните контроли, така и във всички концентрации на тестваното химическо вещество. Препоръчваните разтворители са диметилсулфоксид (DMSO) и етанол (EtOH). Други разтворители с ниска цитотоксичност(напр. ацетон) са също подходящи, но следва да се преценят специфичните им особености, напр. реакция с проучваното химическо вещество, подтискане на фототоксичния ефект, или свързване на радикали. С цел увеличаване на разтворимостта може, при необходимост, да се използва центрофугиране и/или излагане на слънце и/или затопляне до температура 37 °С. 1. 7. 1. 6. U V о б л ъ ч в а н е ( и р а д и а ц и я ) / п о д г о т о в к а Светлинен източник: изборът на подходящ светлинен източник и подходящо филтриране са най-критичните фактори във фототоксичния тест. UVA и областите на видима светлина се асоциират обикновено с фоточувствителността (7) (10), докато UVB е с по-малка относителна стойност и директно цитотоксичен, увеличавайки своята цитотоксичност 1000 пъти от 313 до 280 nm (11). Критерите за избор на подходящ светлинен източник следва да включват като основно изискване следното: светлинният източник да излъчва дължина на вълната, абсорбирана от химическото вещество; дозата светлина (която може бъде постигната в разумно време) да е достатъчна, за да бъде регистрирана от добре познатите фотосинтезатори. Освен това, използваните дължини на вълната и дози не следва да оказват значителна вреда на експерименталната система, което се изразява в излъчването на топлина (вълни в инфрачервената област). Симулацията на слънчева светлина със слънчеви симулатори се счита за оптимален светлинен източник. В тях се използват ксенонови и живачно-метални (поглъщащи) халогенни волтови дъги. Последните имат предимството да излъчват по-малко топлина и да са по-евтини, но генерираната от тях светлина не отговаря точно на слънчевата. Тъй като всички слънчеви симулатори излъчват значително количество UVB, те следва да имат подходящи филтри, които да подтиснат силно цитотоксичните UVB вълни. При прилагането на теста за фототоксичност ин витро 3T3 NRU следва да се използва излъчващ спектър, несъдържащ USB вълни (в съотношение UVA: UVB = 1:20). Публикуван е пример на разпределението на спектралното излъчване на филтрирания слънчев симулатор, използван в изследването за стандартизация (узаконяване) на фототоксичния ин витро 3T3 NRU тест (3). Дозиметрия: интензитетът на светлина (излъчването) следва да бъде редовно проверяван преди всеки тест за фототоксичност, като се използва подходящ широколентов UV измерител. UV-измерителят следва да бъде калибриран по отношение на източника на светлина. Действието на UV-измерителя следва да се провери, като за целта се препоръчва използването на втори, референтен UV-измерител от същия тип, калибриран по същия начин. Идеален за целта е спектрорадиометър, измерващ през по-големи интервали спектралното излъчване на филтриран светлинен източник и проверяващ калибрацията на широколентовия UV-измерител, но такива инструменти предполагат значителна квалификация на обслужващия ги персонал. В изследването за стандартизация (узаконяване) е определена доза от 5 J/cm2 (UVA), не-цитотоксична за Balb/c 3T3 клетки, и достатъчно способна да възбуди дори слаби фототоксични химически вещества. За да се постигне 5 J/cm2 в период от 50 мин. , излъчването следва да бъде настроено на 1,666 mW/cm2. В случай, че се използва друга клетъчна линия или светлинен източник, UVA дозата би могла да се промени, като се използват съществуващите критерии за безвредност за клетките и достатъчност за откриване на стандартни фототоксини. Времето на светлинното облъчване се изчислява по следния начин: 1. 7. 2. Условия за тестване Максималната концентрация на проучвано химическо вещество не следва да надвишава 100 µg/ml, тъй като всички фототоксични химични вещества се откриват при по-ниски концентрации, докато при по-високи концентрации появата на невярно положителни (свръхпрогнозни) резултати нараства (13). Величината pH на най-високата концентрация на проучваното химическо вещество следва да бъде достатъчно задоволителна (област на рH: 6,5—7,8). 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 137 Обхвата на концентрации на проучваното химично вещество при наличието (+ UVA) и липсата (- UVA) на светлина следва да бъде точно определена в предшестващи експерименти за неговото установяване. Обхвата и отрязъка на концентрацията в нейната последователност следва да бъдат така добре определени, че кривите на реакция спрямо концентрацията да се подкрепят в достатъчна степен от експерименталните данни. Препоръчва се използването на геометричните серийни концентрации (с постоянно съотношение на разреждане). 1. 7. 3. Процедура на тестване (1) 1. 7. 3. 1. П ъ р в и д е н Приготвя се клетъчна суспенсия от 1 × 1055 клетки/ml в клетъчна култура и се разпределя в количества по 100 µl само в периферните гнезда на 96-гнездовата микротитър на плака за тъканни култури (= празни проби). В оставащите гнезда се поставят по 100 µl от клетъчната култура от 1 × 105 клетки/ml (= 1 × 104 клетки/гнездо). За всяко от тестваните химически вещества се подготвят две плаки: една за определяне на цитотоксичност (- UVA), а другата за определяне на фотоцитотоксичността (+ UVA). Клетките се инкубират в продължение на 24 часа (7,5 % CO2, 37 °C), докато се образува полусливащ се монослой. Този инкубационен период позволява на клетките възстановяване и придържане една към друга, както и експоненциален растеж. 1. 7. 3. 2. В т о р и д е н След инкубация клетъчната култура се прехвърля и се промива два пъти с 150 µl EBSS/PBS на гнездо. Добавя се 100 µl от EBSS/PBS в подходяща концентрация на тестваното химическо вещество или разтворителя (отрицателна контрола). Прибавят се 8 различни концентрации на проучваното химическо вещество. Клетките с проучваното химическо вещество се инкубират на тъмно в продължение на 60 минути (7,5 % CO2, 37 °C). За да се изпълни (+ UVA) частта на изследването, клетките се ирадиират на стайна температура в продължение на 50 минути чрез през отвор на похлупак на 96-гнездната плака с 1,7 mW/cm2 UVA (= 5 J/cm2). Извършва се вентилация с вентилатор с цел предотвратяване на кондензирането на вода под похлупака. Съхраняват се дублиращите гнезда(- UVA) на стайна температура в тъмна кутия в продължение на 50 минути(= UVA времето за експониране). Проучваният разтвор се прелива и се промива два пъти с 150 µl EBSS/PBS. EBSS/PBS се замества с клетъчна среда и се инкубира (7,5 % CO2, 37 °C) в продължение на една нощ (18—22) часа. 1. 7. 3. 3. Т р е т и д е н Микроскопска оценка Клетките се изследват под фазово-контрастен микроскоп. Записват се промените в морфологията на клетките, дължащи се на цитотоксични ефекти, предизвикани от проучваното химическо вещество. Тази проверка се препоръчва, за да се избегнат грешките от експеримента, но тези записи не се използват за оценка на цитотоксичността или фототоксичността. Oпит за поглъщане на неутрално червено (NR) Клетките се измиват със 150 µl предварително затоплен EBSS/PBS. Миещият разтвор се отстранява с внимателно почукване. Добавят се 100 µl среда от неутрално червено и се инкубира при 37 °С, във влажна атмосфера от 7,5 % CO2 в продължение на 3 часа. След инкубацията неутрално червеното се отстранява от средата и клетките се измиват със 150 µl EBSS/PBS. Долива се EBSS/PBS и разпръсква изцяло. (Друга възможност: да се центрофугира на обратната плака. ) Добавят се точно 150 µl неутрално червено дезорбиран разтвор(прясно приготвени етанол/оцетна киселина). Микротитърната плака се разклаща енергично, поставена върху вибрационен съд за микротитърни плаки в продължение на 10 минути, докато се отдели неутрално червеното от клетките и се образува хомогенен разтвор. Измерва се оптичната плътност на екстракта на неутрално червеното при 540 nm в спектрометър, като се използват празни контроли за референтни стойности. Данните се запазват в подходящ файлов формат (напр. ASCII) за последващи анализи. 138 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 2. ДАННИ 2. 1. Качество и количество на данните Данните следва да позволят да се направят еднозначен анализ на реакцията към концентрацията, получена при наличието и при липсата на UVA/vis ирадиация. В случай, че се открие цитотоксичност, както областта на концентрацията, така и отрязъците на индивидуалните концентрации следва да бъдат подредени по такъв начин, че да доведат до съвпадение на кривата с експерименталните данни. Имайки пред вид, че проучваното химическо вещество може да не бъде цитотоксично при експеримент на тъмно(- UVA) до определена граница на концентрация от 100 µg/ml, но високо цитотоксично при ирадиация (+ UVA), тестваните области на концентрация и в двете части на експеримента (изпълнявайки изискването за достатъчно качество на данните) могат да се различават значително. Ако не бъде открита цитотоксичност и в двете части на експеримента(- UVA и + UVA), е достатъчно тестване с голяма разлика между единичните дози до най-високата концентрация. За потвърждаването на ясен положителен резултат не се изисква повтаряне на експеримента. Освен това, не е необходимо потвърждаването на точни отрицателни резултати, в случай че проучваното химическо вещество е било тествано при достатъчно високи концентрации. В такива случаи е достатъчен един главен експеримент, подкрепен от един или повече предварителни експерименти за установяване на обхвата. Тестове с гранични резултати, близки до праговата линията на модела на прогнозиране, следва да бъдат повтаряни с цел потвърждаване. В случай че е необходимо повтарящото се тестване, то промяната в условията на експеримента може да се окаже важна за постигане на ясен резултат. Главна променлива в този тест е подготовката на разтвори от проучваните химически вещества. От това следва, че промяната на тези условия (съпътстващ разтворител, пулверизация, акустичност) могат да се окажат най-уместни при повторението на един тест. Като алтернатива може да се вземе предвид промяната във времето на предварителната ирадиационна инкубация. За водно-нестабилни химически вещества може да се окаже подходящо едно по-кратко време. 2. 2. Третиране на резултати При възможност се определя концентрация на проучваното химическо вещество, отразяваща 50 % инхибиране на клетъчния NRU(EC50). Това може да се направи, като се приложи коя да е подходяща нелинейна регресионна процедура (за предпочитане функция на Hill или логистична регресия) към данните за реакция спрямо концентрацията, или като се използват други възможни процедури(14). Тяхното качество следва да бъде внимателно проверено, преди използването на EC50 за по-нататъшни изчисления. Като алтернатива, могат да бъдат използвани графични методи за изчисляване на EC50. В този случай се препоръчва използването на теорията на вероятностите(x-скала: log, y-скала: вярност), като в много случаи функцията-отговор на концентрацията остава почти линейна след тази трансформация. 2. 3. Оценка на резултатите (модели на прогнозиране) 2. 3. 1. Модел на прогнозиране 1: фактор на фотодразнимост (ФФД) В случай, че едновременно при наличието (+ UVA) и при липсата (- UVA) на светлина се получават завършени криви на реакция спрямо концентрацията, факторът на фотодразнимост (ФФД) се изчислява чрез следната формула: При ФФД < 5 липсва фототоксичен потенциал, докато при ФФД ≥ 5 е възможен фототоксичен потенциал. В случай, че химическо вещество е цитотоксично само при + UVA, но не е цитотоксично при –UVA, ФФД не може да бъде изчислен, въпреки че това е резултат, който показва наличие на фототоксичен потенциал. В такива случаи „> ФФД“ може да се изчисли, ако (-UV) цитотоксичният тест се извърши до най-високата пробна концентрация (Cmax) и тази стойност се използва за изчисление на „> ФФД“; В случай, че само „> ФФД“ може да бъде получено, то тогава която и да е стойност > 1 предвижда фототоксичен потенциал. В случай, че стойностите на ЕС50(- UV) и EC50(+ UV) не могат да бъдат изчислени поради факта, че химичното вещество не показва признаци на цитотоксичност до най-високата пробна концентрация, това потвърждава липса на фототоксичен потенциал. В такива случаи, формално „ФФД = *1“ се използва за характеризиране на резултата; 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 139 Ако може да бъде получено само „ФФД = *1“, това предсказва отсъствие на фототоксичен потенциал. В случаите (б) и (в) концентрациите, постигнати в теста за фототоксичност ин витро 3T3 NRU, следва да бъдат внимателно преценени, когато се използват за предсказване на фототоксичния потенциал. 2. 3. 2. Модел на прогнозиране 2: среден фото ефект (СФЕ) Като друга възможност, може да бъде приложена нова версия на модела за прогнозиране на фототоксичния потенциал, която е разработена като са използвани данните на изследването за валидиране на Европейската Асоциация по парфюмерия и козметика (EU/COLIPA) (15) и са тествани в опити на сляпо в следващо проучване върху ин витро фототоксичността на UV филтрирани химически вещества (13). Този модел преодолява ограниченията на ФФД модела в случаи, където ЕС50 не може да бъде получено. Моделът използва „среден фото ефект“ (СФЕ), измерване, което се основава на сравнение на цялостните криви на реакция спрямо концентрацията. За прилагане на модела на „среден фото ефект“ е разработен специален компютърен софтуер в Хумболтовия университет (Берлин), който може да се получи безплатно. 2. 4. Интерпретация на резултати Положителен резултат в теста за фототоксичност ин витро 3T3 NRU (ФФД ≥ 5 или СФЕ ≥ 0,1) показва, че пробното вещество има фототоксичен потенциал. Ако този резултат е получен при концентрация под 10 µg/ml, проучваното химическо вещество се проявява и като фототоксин при различни експозиционни условия ин виво. В случай, че се получи положителен резултат само при най-високите пробни концентрации от 100 µg/ml, може да се окаже необходимо тези данни да бъдат преценени от гледна точка на случайност или на фототоксичен потенциал. Те могат да включват данни, свързани с проникването, абсорбцията и възможното акумулиране на проучваното химическо вещество в кожата, или тестването му в алтернативен тест за потвърждение, напр. използване на човешки ин витро модел на кожата. Отрицателен резултат от проведен тест за фототоксичност ин витро 3Т3 NRU (ФФД < 5 или СФЕ < 0,1), показва че пробното вещество не е фототоксично за културите от клетки на бозайници при условията на провеждане на теста. В случаите, където проучваните химически вещества са били тествани при най-високата концентрация от 100 µg/ml, отрицателният резултат показва, че те нямат фототоксичен потенциал и фототоксичността ин виво може да се счита малко вероятна. В случаи, където са били получени идентични реакции на токсична концентрация (EC50 + UV и EC50-UV) при по-ниски концентрации, интерпретирането на данните следва да се извърши по същия начин. Обратно, ако не се докаже токсичност(+ UV и - UV), и водноразтворимите концентрации са ограничени до стойности под 100 µg/ml, тогава съвместимостта на пробното вещество със изследването може да се постави под съмнение и следва да се предвиди едно изследване за потвърждение (напр. модел на кожата ин витро, или модел екс виво или тест ин виво). 3. ДОКЛАДВАНЕ Доклад от теста Докладът от теста трябва да включва следната информация: Проучвано химическо вещество: — идентифициращи данни и CAS №, ако е известен, — физически свойства и липса на примеси, — физико-химически свойства, свързани с провеждането на изследването, — стабилност и фотостабилност, ако са известни. Разтворител: — обосновка за избора на разтворител, — разтворимост на проучваното химическо вещество в разтворителя, — процентно съдържание на разтворителя в използваните среди (EBSS или PBS). Клетки: — вид и източник на клетките, — отсъствие на микоплазма, — брой на клетъчните пасажи, ако е известен, — UVA чувствителност на клетки, определена с апаратура за облъчване (ирадиационна апаратура), използвана в тест за фототоксичност ин витро 3T3 NRU. Условия за тестване(а) — инкубация преди или след обработването: — вид и състав на клетъчната култура, — условия за инкубация (концентрация на CO2, температура, влажност) — продължителност на инкубацията (предварително обработване, последващо обработване). 140 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 Условия за тестване(б) — обработване с химически вещества: — обосновка за избора на концентрации на тестваните химически вещества, използвани при наличието и липсата на UV/vis ирадиация, — в случай на ограничена разтворимост на проучваното химическо вещество и липса на цитотоксичност, обосновка за тестване на най-високата концентрация, — вид и състав на използваната среда (буфериран разтвор на соли), — продължителност на химическата обработка. Условия за тестване(в) — облъчване (ирадиация): — обосновка за избор на използвания светлинен източник, — спектрални характеристики на излъчване на светлинния източник, — излъчващи/абсорбционни характеристики на използвания(те) филтър(и), — характеристики на радиометъра и подробно определяне на неговата калибрация, — разстояние на светлинния източник до системата за тестване, — UVA ирадиация при това разстояние, изразена в mW/cm2, — продължителност на UV/vis светлинно облъчване, — UVA доза(ирадиация x време), изразена в J/cm2, — едновременно отчитане на използваната температура при работа с клетъчните култури по време на облъчването(ирадиацията), както и на температурата на средата за клетъчните култури, едновременно с това съхранявани на тъмно. Условия за тестване(г) — NRU тест: — състав на среда на неутрално червено, — продължителност на инкубация на неутрално червено, — условия за инкубация (концентрация на CO2, температура, влажност), — условия за екстракция на неутрално червено (екстрахиращо вещество, продължителност), — дължина на вълната, използвана при спектрометричното отчитане на оптичната плътност на неутрално червено, — втора дължина на вълната (референтна), в случай, че се използва, — съдържание на формуляра за спектрофотометрия, ако се използва. Рeзултати: — клетъчна жизнеспособност, получена при всяка концентрация на проучваното химическо вещество, изразена като процент от средна жизнеспособност на контролите, — криви на реагиране на концентрацията,(тестване на концентрацията на химическото вещество спрямо относителната клетъчна жизнеспособност), получени в резултат на едновременно проведени + UVA и – UVA експерименти, — анализ на данните от кривите на реагиране на концентрацията: ако е възможно: компютърна обработка/изчисление на EC50 (+ UVA) и EC50 (- UVA), — сравнение на две криви на реагиране на концентрацията, получени при наличието и липсата на UVA/vis ирадиация, чрез изчисляване на фактора за фотодразнимост (ФФД), или чрез изчисление на средния фотоефект (СФЕ), — класификация на фототоксичния потенциал, — възприети критерии на тестване (а) — едновременно с отрицателна контрола: — абсолютна жизнеспособност(оптична плътност на екстракта на неутрално червено) на ирадиирани и неирадиирани клетки, — данни за отрицателната контрола от предишни изследвания, средна стойност и стандартно отклонение. — възприети критерии на тестване (б) — едновременен с положителна контрола: — EC50 (+ UVA) и EC50 (- UVA) и ФФД на пoложителната контрола, — данни от предишни изследвания за положителната контрола: EC50 (+ UVA) и EC50 (- UVA), средна стойност и стандартно отклонение. Обсъждане на резултатите. Заключения. 13/т. 29 BG Официален вестник на Европейския съюз 141 4. ПОЗОВАВАНИЯ (1) Spielmann, H. , Balls, M. , Döring, B. , Holzhütter, H. G. , Kalweit, S. , Klecak, G. , L’Eplattenier, H. , Liebsch, M. , Lovell, W. W. , Maurer, T. , Moldenhauer, F. , Moore, L. , Pape, W. , Pfannbecker, U. , Potthast, J. , De Silva, O. , Steiling, W. and Willshaw, A. (1994), EEC/COLIPA project on in vitro phototoxicity testing: First results obtained with a Balb/c 3T3 cell phototoxicity assay, Toxicology in Vitro 8, pp. 793-796. (2) Anon (1998), Statement on the scientific validity of the 3T3 NRU PT test (an in vitro test for phototoxicity), European Commission, Joint Research Centre: ECVAM and DGXI/E/2, 3 November 1997, ATLA 26, pp. 7-8. (3) Spielmann, H. , Balls, M. , Dupuis, J. , Pape, W. J. W. , Pechovitch, G. , De Silva, O. , Holzhütter, H. G. , Clothier, R. , Desolle, P. , Gerberick, F. , Liebsch, M. , Lovell, W. W. , Maurer, T. , Pfannenbecker, U. , Potthast, J. M. , Csato, M. , Sladowski, D. , Steiling, W. and Brantom, P. (1998), EU/COLIPA „In vitro phototoxicity“ validation study, results of phase II (blind trial), part 1: the 3T3 NRU phototoxicity test, Toxicology in Vitro 12, pp. 305-327. (4) OECD Test Guidelines Programme, ENV/MC/CHEM/TG(96)9: Final Report of the OECD Workshop on Harmonisation of Validation and Acceptance Criteria of Alternative Toxicological Test Methods, OECD Publications Office, Paris, 1996. (5) (6) (7) (8) Lovell, W. W. (1993), A scheme for in vitro screening of substances for photoallergenic potential, Toxicology in Vitro 7, pp. 95-102. Santamaria, L. and Prino, G. (1972), List of the photodynamic substances, Research progress in organic, biological and medicinal chemistry Vol. 3 Part 1, North Holland Publishing Co, Amsterdam, pp. XI-XXXV. Spielmann, H. , Lovell, W. W. , Hölzle, E. , Johnson, B. E. , Maurer, T. , Miranda, M. A. , Pape, W. J. W. , Sapora, O. and Sladowski, D. (1994), In vitro phototoxicity testing: The report and recommendations of ECVAM workshop 2, ATLA 22, pp. 314-348. Spikes, J. D. (1989), Photosensitization, The science of photobiology, edited by KC Smith, Plenum Press, New York, 2nd edition, pp. 79-110. (9) Borenfreund, E. and Puerner, J. A. (1985), Toxicity determination in vitro by morphological alterations and neutral red absorption, Toxicology Letters 24, pp. 119-124. (10) Lambert L. A, Warner W. G. and Kornhauser A. (1996), Animal models for phototoxicity testing, Dermatotoxicology, edited by FN Marzulli and HI Maibach, published by Taylor & Francis, Washington DC, 5th Edition, pp. 515-530. (11) Tyrrell R. M. and Pidoux M (1987), Action spectra for human skin cells: estimates of the relative cytotoxicity of the middle ultraviolet, near ultraviolet and violet regions of sunlight on epidermal keratinocytes, Cancer Research 47, pp. 1825-1829. (12) ZEBET/ECVAM/COLIPA, Standard Operating Procedure: Balb/c 3T3 NRU Phototoxicity Test, drafted 23 December 1997 by M. Liebsch and approved 6 March 1998 by the Management Team of the EU/COLIPA project „In Vitro Photoirritation“. (13) Spielmann, H. , Balls, M. , Dupuis, J. , Pape, W. J. W. , De Silva, O. , Holzhütter, H. G. , Gerberick, F. , Liebsch, M. , Lovell, W. W. and Pfannenbecker (1998), A Study on the Phototoxic Potential of UV Filter Chemicals from Annex VII of the EU Directive 76/768/EEC in the 3T3 NRU In Vitro Phototoxicity Test, ATLA 26, pp. 679-708. (14) Holzhütter, H. G. and Quedenau, J. (1995), Mathematical modelling of cellular responses to external signals, Journal of Biological Systems 3, pp. 127-138. (15) Holzhütter, H. G. (1997), A general measure of in vitro phototoxicity derived from pairs of dose-response curves and its use for predicting the in vivo phototoxicity of chemicals, ATLA 25, pp. 445-462. 142 BG Официален вестник на Европейския съюз 13/т. 29 Допълнение (1) Допълнителни данни могат да се намерят в позоваване 12. “


title: 2000/324/EG: Kommissionens beslut av den 25 april 2000 om ändring av beslut 1999/215/EG om godtagande av åtaganden som gjorts i samband med antidumpningsförfarandena rörande import av skördegarn av polypropen med ursprung i Polen, Tjeckiska republiken och Ungern och om avslutande av det förfarande som avser import av skördegarn av polypropen med ursprung i Saudiarabien [delgivet med nr K(2000) 1058]

eurovoc_concepts:
anti-dumping duty
import
manufactured goods
originating product
plastics
third country

formats: html pdf print

text: 11. 5. 2000 SV Europeiska gemenskapernas officiella tidning L 112/65 II (Rättsakter vilkas publicering inte är obligatorisk) KOMMISSIONEN KOMMISSIONENS BESLUT av den 25 april 2000 om ändring av beslut 1999/215/EG om godtagande av åtaganden som gjorts i samband med antidumpningsförfarandena rörande import av skördegarn av polypropen med ursprung i Polen, Tjeckiska republiken och Ungern och om avslutande av det förfarande som avser import av skördegarn av polypropen med ursprung i Saudiarabien [delgivet med nr K(2000) 1058] (2000/324/EG) EUROPEISKA GEMENSKAPERNAS KOMMISSION HAR FATTAT DETTA BESLUT med beaktande av Fördraget om upprättandet av Europeiska gemenskapen, med beaktande av rådets förordning (EG) nr 384/96 av den 22 december 1995 om skydd mot dumpad import från länder som inte är medlemmar i Europeiska gemenskapen (1), senast ändrad genom förordning (EG) nr 905/98 (2), särskilt artikel 8. 9 i denna, efter samråd med rådgivande kommittén, och av följande skäl: A. FÖREGÅENDE FÖRFARANDE (1) (2) Efter en undersökning som inleddes genom offentliggörandet av ett tillkännagivande i Europeiska gemenskapernas officiella tidning (3) införde rådet genom förordning (EG) nr 603/1999 (4) slutgiltiga antidumpningstullar på import av skördegarn av polypropen med ursprung i Polen, Tjeckiska republiken och Ungern. Inom ramen för denna undersökning godtog kommissionen genom beslut 1999/215/EG av den 16 mars 1999 (5) även ett prisåtagande av bland annat det polska företaget WKI Isoliertechnik Spolka z. o. o (nedan kallat företaget). B. ÅTERTAGANDE AV ÅTAGANDE (3) Företaget har emellertid nu återtagit sitt åtagande till följd av svårigheter när det gäller att efterleva vissa villkor som anges i åtagandet. (1) EGT L 56, 6. 3. 1996, s. 1. (2) EGT L 128, 30. 4. 1998, s. 18. (3) EGT C 1, 3. 1. 1998, s. 10. (4) EGT L 75, 20. 3. 1999, s. 1. (5) EGT L 75, 20. 3. 1999, s. 34. L 112/66 SV Europeiska gemenskapernas officiella tidning 11. 5. 2000 (4) (5) Beslut 1999/215/EG bör följaktligen ändras till följd av detta återtagande genom att företagets namn avförs från förteckningen över företag vars åtaganden har godtagits inom ramen för detta förfarande. Parallellt med detta beslut har rådet genom förordning (EG) nr 968/2000 (1) upphävt den befrielse från antidumpningstullar som beviljats detta företag och infört en slutgiltig antidumpningstull för detta företag. HÄRIGENOM FÖRESKRIVS FÖLJANDE. Artikel 1. 1 i beslut 1999/215/EG skall ersättas med följande: Artikel 1 ”1. De åtaganden i samband med antidumpningsförfarandena rörande import till gemenskapen av skördegarn av polypropen med ursprung i Polen, Tjeckiska republiken och Ungern som gjorts av de nedan nämnda tillverkarna skall godtas. Tjeckiska republiken Ungern Land Företag Juta a. s. Lanex a. s. Partium '70 Rt Tiszai Vegyi Kombinat Rt Elso Magyar Kenderfono Rt Artikel 2 TARIC- tilläggsnummer 8596 8580 8581 8582 8583” Detta beslut träder i kraft dagen efter det att det har offentliggjorts i Europeiska gemenskapernas officiella tidning. Utfärdat i Bryssel den 25 april 2000. På kommissionens vägnar Pascal LAMY Ledamot av kommissionen (1) Se sidan 1 i detta nummer av EGT


title: 2000/331/CE: Décision de la Commission du 25 avril 2000 modifiant la décision 1999/813/CE fixant les conditions particulières d'importation des produits de la pêche originaires de la République socialiste du Viêt Nam [notifiée sous le numéro C(2000) 1050] (Texte présentant de l'intérêt pour l'EEE)

eurovoc_concepts:
Vietnam
fishery product
health certificate
import
originating product
veterinary inspection

text: 13. 5. 2000 FR Journal officiel des Communautés européennes L 114/39 DÉCISION DE LA COMMISSION du 25 avril 2000 modifiant la décision 1999/813/CE fixant les conditions particulières d'importation des produits de la pêche originaires de la République socialiste du Viêt Nam [notifiée sous le numéro C(2000) 1050] (Texte présentant de l'intérêt pour l'EEE) (2000/331/CE) LA COMMISSION DES COMMUNAUTÉS EUROPÉENNES, du Viêt Nam sont modifiés comme suit: vu le traité instituant la Communauté européenne, vu la directive 91/493/CEE du Conseil du 22 juillet 1991 fixant les règles sanitaires régissant la production et la mise sur le marché des produits de la pêche (1), modifiée en dernier lieu par la directive 97/79/CE (2), et notamment son article 11, paragraphe 1, considérant ce qui suit: (1) (2) (3) (4) (5) La décision 1999/813/CE de la Commission du 16 novembre 1999 fixe les conditions particulières d'impor- tation des produits de la pêche originaires de la Répu- blique socialiste du Viêt Nam (3). La Commission a adopté la décision 2000/333/CE fixant les conditions particulières d'importation des mollusques bivalves, échinodermes, tuniciers et gastéropodes marins originaires de la République socialiste du Viêt Nam (4). La République socialiste du Viêt Nam souhaite exporter vers la Communauté des mollusques bivalves congelés ou transformés, des échinodermes, tuniciers et gastéro- podes marins qui ont été stérilisés et thermiquement traités conformément aux exigences de la décision 93/ 25/CEE de la Commission (5), modifiée par la décision 97/275/CE (6). Il est donc nécessaire de modifier les certificats sanitaires prévus à l'annexe A de la décision 1999/813/CE. Les mesures prévues par conformes à l'avis du comité vétérinaire permanent, la présente décision sont A ARRÊTÉ LA PRÉSENTE DÉCISION: Article premier Les certificats sanitaires prévus à l'annexe A de la décision 1999/813/CE accompagnant les expéditions de produits de la pêche originaires ou en provenance de la République socialiste 1) Le point IV est complété par l'alinéa suivant: «7. en outre, lorsque les produits de la pêche sont congelés ou transformés, les mollusques ont été obtenus de zones de production autorisées figurant à l'annexe de la décision 2000/333/CE (*) fixant les conditions particu- lières d'importation des mollusques bivalves, échino- dermes, tuniciers et gastéropodes marins vivants origi- naires de la République socialiste du Viêt Nam et ont été stérilisés ou thermiquement traités conformément aux exigences de la décision de la Commission 93/25/CE. (*) JO L 114 du 13. 5. 2000, p. 42. » 2) Le dernier alinéa du point IV est remplacé par le texte suivant: «— L'inspecteur officiel soussigné déclare avoir connais- sance des dispositions des directives 91/492/CEE, 91/ 493/CEE, 92/48/CEE et des décisions 93/25/CE, 1999/813/CE et 2000/333/CE. » Article 2 Les États membres sont destinataires de la présente décision. Fait à Bruxelles, le 25 avril 2000. Par la Commission David BYRNE Membre de la Commission (1) JO L 268 du 24. 9. 1991, p. 15. (2) JO L 24 du 30. 1. 1998, p. 31. (3) JO L 315 du 9. 12. 1999, p. 39. (4) Voir page 42 du présent Journal officiel. (5) JO L 16 du 25. 1. 1993, p. 22. (6) JO L 108 du 25. 4. 1997, p. 2


title: Směrnice Komise 2000/21/ES ze dne 25. dubna 2000 o seznamu právních předpisů Společenství podle páté odrážky čl. 13 odst. 1 směrnice Rady 67/548/EHSText s významem pro EHP.

eurovoc_concepts:
application of EU law
dangerous substance
exchange of information
labelling
marketing
national implementing measure

text: 120 CS Úřední věstník Evropské unie 13/sv. 25 32000L0021 28. 4. 2000 ÚŘEDNÍ VĚSTNÍK EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ L 103/70 SMĚRNICE KOMISE 2000/21/ES ze dne 25. dubna 2000 o seznamu právních předpisů Společenství podle páté odrážky čl. 13 odst. 1 směrnice Rady 67/548/EHS (Text s významem pro EHP) KOMISE EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ, (3) s ohledem na Smlouvu o založení Evropského společenství, Látky používané výhradně jako účinné látky biocidních přípravků ve smyslu směrnice Evropského parlamentu a Rady 98/8/ES ze dne 16. února 1998 o uvádění biocid- ních přípravků na trh (6) spadají do působnosti páté odrážky čl. 13 odst. 1 směrnice 67/548/EHS a měly by tedy být vyňaty, včetně případu, kdy jsou určeny pro výzkum a vývoj, aby schvalovací postupy pro tyto látky spadaly výhradně do oblasti působnosti směrnice 98/8/ES. s ohledem na směrnici Rady 67/548/EHS ze dne 27. června 1967 o sbližování právních a správních předpisů týkajících se klasifi- kace, balení a označování nebezpečných látek (1), naposledy pozměněnou a Rady 1999/33/ES (2), a zejména na čl. 13 odst. 1 uvedené směrnice, Evropského parlamentu směrnicí vzhledem k těmto důvodům: (1) (2) Podle čl. 13 odst. 1 směrnice 67/548/EHS se články 7, 8, 14 a 15 uvedené směrnice týkající se oznámení nevztahují na určité látky. Přesněji se podle páté odrážky čl. 13 odst. 1 nevztahují na látky pro výhradní použití ve výrobcích jiných oborů, pro které existují oznamovací nebo schvalo- vací postupy Společenství a pro které jsou požadavky na stanove- předložení nými ve směrnici 67/548/EHS. Komise tedy musí stanovit seznam těch právních předpisů Společenství, které obsa- hují takové oznamovací nebo schvalovací postupy. Sez- nam bude pravidelně přezkoumáván a v případě potřeby pozměňován. požadavky shodné údajů s Směrnice Rady 91/414/EHS ze dne 15. července 1991 o uvádění přípravků na ochranu rostlin na trh (3), napo- sledy pozměněná směrnicí Komise 1999/80/ES (4), stanoví zařazení účinných látek do přílohy I před jejich schválením a uvedením na trh. Směrnice Komise 93/90/EHS ze dne 29. října 1993 o seznamu látek podle páté odrážky čl. 13 odst. 1 směrnice Rady 67/548/EHS (5) se vztahuje pouze na účinné směrnice látky zařazené do přílohy I 91/414/EHS s ohledem na jejich uvedení na trh. Účinné látky, které mají být schváleny pro jiné účely, včetně výzkumu a vývoje podle článku 22 směrnice 91/414/EHS, by rovněž měly být zahrnuty, aby schvalovací postupy pro tyto látky spadaly výhradně do oblasti působnosti směr- nice 91/414/EHS. (1) Úř. věst. 196, 16. 8. 1967, s. 1. (2) Úř. věst. L 199, 30. 7. 1999, s. 57. (3) Úř. věst. L 230, 19. 8. 1991, s. 1. (4) Úř. věst. L 210, 10. 8. 1999, s. 13. (5) Úř. věst. L 277, 10. 11. 1993, s. 33. (4) Směrnice 93/90/EHS by měla být zrušena. (5) Opatření této směrnice jsou v souladu se stanoviskem Výboru pro přizpůsobení technickému pokroku směrnic pro odstranění technických překážek obchodu na úseku nebezpečných látek a přípravků, PŘIJALA TUTO SMĚRNICI: Článek 1 Seznam právních předpisů Společenství týkajících se výrobků jiných oborů, pro které existují oznamovací nebo schvalovací postupy Společenství a pro které jsou požadavky na předložení údajů pro kategorie látek uvedených v seznamu shodné s požadavky stanovenými ve směrnici 67/548/EHS, je uveden v příloze této směrnice. Článek 2 Směrnice 93/90/EHS se zrušuje. Článek 3 1. Členské státy přijmou a zveřejní předpisy nezbytné pro dosa- žení souladu s touto směrnicí do 1. dubna 2001 a neprodleně o nich uvědomí Komisi. 2. Tyto předpisy přijaté členskými státy musí obsahovat odkaz na tuto směrnici nebo musí být takový odkaz učiněn při jejich úředním vyhlášení. Způsob odkazu si stanoví členské státy. (6) Úř. věst. L 123, 24. 4. 1998, s. 1. 13/sv. 25 CS Úřední věstník Evropské unie 121 Tato směrnice je určena členským státům. V Bruselu dne 25. dubna 2000. Článek 4 Za Komisi Margot WALLSTRÖM členka Komise 122 CS Úřední věstník Evropské unie 13/sv. 25 PŘÍLOHA Právní předpisy Společenství týkající se výrobků jiných oborů, pro které existují oznamovací nebo schvalovací postupy Společenství a pro které jsou požadavky na předložení údajů pro kategorie látek uvedených v seznamu shodné s požadavky stanovenými v článcích 7, 8, 14 a 15 směrnice 67/548/EHS 1. 2. Směrnice Rady 91/414/EHS ze dne 15. července 1991 o uvádění přípravků na ochranu rostlin na trh. Směrnice Evropského parlamentu a Rady 98/8/ES ze dne 16. února 1998 o uvádění biocidních přípravků na trh. Pro látky určené výhradně pro použití jako účinné látky přípravků na ochranu rostlin a/nebo biocidních přípravků


title: Reglamento (CE) n° 829/2000 de la Comisión, de 25 de abril de 2000, por el que se modifican los derechos de importación en el sector de los cereales

eurovoc_concepts:
CCT duties
cereals
import

formats: pdf print

text: L 101/26 ES Diario Oficial de las Comunidades Europeas 26. 4. 2000 REGLAMENTO (CE) No 829/2000 DE LA COMISIÓN de 25 de abril de 2000 por el que se modifican los derechos de importación en el sector de los cereales LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS, (2) Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Europea, Visto el Reglamento (CEE) no 1766/92 del Consejo, de 30 de junio de 1992, por el que se establece la organización común de mercados en el sector de los cereales (1), cuya última modifi- cación la constituye el Reglamento (CE) no 1253/1999 (2), Visto el Reglamento (CE) no 1249/96 de la Comisión, de 28 de junio de 1996, por el que se establecen las disposiciones de aplicación del Reglamento (CEE) no 1766/92 del Consejo en lo referente a los derechos de importación en el sector de los cereales (3), cuya última modificación la constituye el Regla- mento (CE) no 2519/98 (4), y, en particular, el apartado 1 de su artículo 2, Considerando lo siguiente: (1) En el Reglamento (CE) no 792/2000 de la Comisión (5), se establecen los derechos de importación del sector de los cereales. El apartado 1 del artículo 2 del Reglamento (CE) no 1249/96 establece que si, durante su período de aplica- ción, la media de los derechos de importación calculada se desvía en 5 EUR/tonelada del derecho fijado, se procederá al ajuste correspondiente. Dicho desvío se ha producido. Por lo tanto, es preciso proceder al ajuste de los derechos de importación fijados en el Reglamento (CE) no 792/2000. HA ADOPTADO EL PRESENTE REGLAMENTO: Artículo 1 Los anexos I y II del Reglamento (CE) no 792/2000 se susti- tuirán por los anexos I y II del presente Reglamento. Artículo 2 El presente Reglamento entrará en vigor el 26 de abril de 2000. El presente Reglamento será obligatorio en todos sus elementos y directamente aplicable en cada Estado miembro. Hecho en Bruselas, el 25 de abril de 2000. Por la Comisión Franz FISCHLER Miembro de la Comisión (1) DO L 181 de 1. 7. 1992, p. 21. (2) DO L 160 de 26. 6. 1999, p. 18. (3) DO L 161 de 29. 6. 1996, p. 125. (4) DO L 315 de 25. 11. 1998, p. 7. (5) DO L 95 de 15. 4. 2000, p. 31. 26. 4. 2000 ES Diario Oficial de las Comunidades Europeas L 101/27 ANEXO I «ANEXO I Derechos de importación de los productos mencionados en el apartado 2 del artículo 10 del Reglamento (CEE) no 1766/92 Código NC Asignación de la mercancía 1001 10 00 Trigo duro de alta calidad Trigo duro de calidad media (1) 1001 90 91 Trigo blando para siembra 1001 90 99 Trigo blando de calidad alta que no sea para siembra (3) de calidad media de calidad baja 1002 00 00 Centeno 1003 00 10 Cebada para siembra 1003 00 90 Cebada que no sea para siembra (3) 1005 10 90 Maíz para siembra que no sea híbrido 1005 90 00 Maíz que no sea para siembra (3) 1007 00 90 Sorgo para grano que no sea híbrido para siembra Derecho de importación por vía terrestre, fluvial o marítima, para productos procedentes de puertos mediterráneos, del mar Negro o del mar Báltico (en EUR/t) Derecho de importación por vía aérea o por vía marítima para productos procedentes de otros puertos (2) en EUR/t 13,47 23,47 23,01 23,01 72,62 84,47 71,91 71,91 71,91 86,98 86,98 71,91 3,47 13,47 13,01 13,01 62,62 74,47 61,91 61,91 61,91 76,98 76,98 61,91 (1) El derecho aplicable al trigo duro que no presente la calidad mínima para el trigo duro de calidad media indicada en el Anexo I del Reglamento (CE) no 1249/96 será el correspondiente al trigo blando de baja calidad. (2) Los importadores de las mercancías que lleguen a la Comunidad por el Océano Atlántico o vía el Canal de Suez [apartado 4 del artículo 2 del Reglamento (CE) no 1249/96] podrán acogerse a las siguientes reducciones de los derechos: — 3 EUR/t si el puerto de descarga se encuentra en el Mediterráneo; — 2 EUR/t si el puerto de descarga se encuentra en Irlanda, el Reino Unido, Dinamarca, Suecia, Finlandia o la costa atlántica de la Península Ibérica. (3) Los importadores que reúnan las condiciones establecidas en el apartado 5 del artículo 2 del Reglamento (CE) no 1249/96 podrán acogerse a una reducción a tanto alzado de 14 u 8 EUR/t. » L 101/28 ES Diario Oficial de las Comunidades Europeas 26. 4. 2000 ANEXO II Datos para el cálculo de los derechos (período del 14. 4. 2000 al 24. 4. 2000) 1. Valores medios correspondientes al período de dos semanas anterior a la fijación: Cotizaciones en bolsa Minneapolis Kansas-City Chicago Chicago Minneapolis Minneapolis Minneapolis Producto (% de proteínas humedad) con 12 % de HRS2. 14 % HRW2. 11,5 % SRW2 YC3 HAD2 calidad media (*) US barley 2 Cotización (EUR/t) 123,84 107,79 98,29 94,25 163,90 (**) 153,90 (**) 105,47 (**) Prima Golfo (EUR/t) — 6,13 3,71 5,30 Prima Grandes Lagos (EUR/t) 30,54 — — — (*) Prima negativa de un importe de 10 EUR/t [apartado 1 del artículo 4 del Reglamento (CE) no 1249/96]. (**) Fob Grandes Lagos. — — — — — — 2. Fletes/gastos: Golfo de México-Rotterdam: 17,51 EUR/t; Grandes Lagos-Rotterdam: 26,66 EUR/t. 3. Subvenciones previstas en el tercer párrafo del apartado 2 del artículo 4 del Reglamento (CE) no 1249/96: 0,00 EUR/t (HRW2) 0,00 EUR/t (SRW2)


title: A Bizottság határozata (2000. április 25.) a Vietnámi Szocialista Köztársaságból származó kéthéjú kagylók, tüskésbőrűek, zsákállatok és tengeri haslábúak behozatalára vonatkozó különleges feltételek megállapításáról (az értesítés a C(2000) 1054. számú dokumentummal történt)EGT vonatkozású szöveg

eurovoc_concepts:
Vietnam
health control
import
mollusc
originating product

text: 96 HU Az Európai Unió Hivatalos Lapja 03/29. kötet 32000D0333 L 114/42 AZ EURÓPAI KÖZÖSSÉGEK HIVATALOS LAPJA 2000. 5. 13. A BIZOTTSÁG HATÁROZATA (2000. április 25. ) a Vietnámi Szocialista Köztársaságból származó kéthéjú kagylók, tüskésbőrűek, zsákállatok és tengeri haslábúak behozatalára vonatkozó különleges feltételek megállapításáról (az értesítés a C(2000) 1054. számú dokumentummal történt) (EGT vonatkozású szöveg) (2000/333/EK) AZ EURÓPAI KÖZÖSSÉGEK BIZOTTSÁGA, tekintettel az Európai Közösséget létrehozó szerződésre, tekintettel a legutóbb a 97/79/EK irányelvvel (1) módosított, az élő kéthéjú kagylók tenyésztésére és forgalomba hozatalára vonatkozó egészségügyi feltételek megállapításáról szóló, 1991. irányelvre (2) és különösen július 15-i 91/492/EGK tanácsi annak 9. cikke (3) bekezdésének b) pontjára, A Bizottság egy szakértője ellenőrző látogatást tett a Vietnami halászati Szocialista termékek előállítása, tárolása és Közösségbe történő feladása feltételeinek ellenőrzése céljából. Köztársaságban, a A Vietnámi Szocialista Köztársaság jogszabályainak rendelkezései értelmében a „National Fisheries Inspection and Quality Assurance Center (NAFIQACEN)” felelős a kéthéjú kagylók, tüskésbőrűek, zsákállatok és tengeri haslábúak egészségügyi vizsgálatának elvégzéséért, vala- mint a tenyésztés higiéniai és egészségügyi feltételeinek figyelemmel kíséréséért. Ugyanezen jogszabályok felha- talmazzák a NAFIQACEN-t a kéthéjú kagylók, tüs- késbőrűek, zsákállatok és tengeri haslábúak bizonyos övezetekből történő betakarításának engedélyezésére vagy megtiltására. egyenértékű, a tenyésztési és átmosó övezetek minősíté- sére, a feladó és tisztító központok engedélyezésére, továbbá a közegészségügyi ellenőrzésre és a tenyésztés- ellenőrzésre vonatkozó követelmények teljesítéséről. A Vietnámi Szocialista Köztársaság alkalmas arra, hogy bekerüljön a 91/492/EGK irányelv 9. cikke (3) bekezdé- sének a) pontjában említett egyenértékűségi feltételeket teljesítő harmadik országok jegyzékébe. A Vietnámi Szocialista Köztársaság olyan fagyasztott vagy feldolgozott kéthéjú kagylókat, tüskésbőrűeket, zsákállatokat és tengeri haslábúakat kíván a Közösségbe exportálni, amelyeket a 97/275/EK határozattal (3) módo- sított 93/25/EGK bizottsági határozat (4) követelmé- nyeinek megfelelően sterilizáltak vagy hőkezeltek. Ennek érdekében ki kell jelölni azokat a tenyésztési területeket, ahonnan kéthéjú kagylók, tüskésbőrűek, zsákállatok és tengeri haslábúak takaríthatók be és exportálhatók a Közösségbe. feltételeket A különleges behozatali legutóbb a 95/22/EK irányelvvel (5) módosított, a tenyésztett víziál- latok és az akvakultúra-termékek forgalomba hozatalára szóló, 1991. irányadó állat-egészségügyi január 28-i 91/67/EGK tanácsi irányelv (6) alapján hozott határozatok sérelme nélkül kell alkalmazni. feltételekről a Az e határozatban előírt intézkedések összhangban vannak az Állat-egészségügyi Állandó Bizottság vélemé- nyével, (6) (7) (8) (9) A NAFIQACEN és laboratóriumai alkalmasak a Vietnámi Szocialista Köztársaságban hatályban lévő jogszabályok alkalmazásának hatékony ellenőrzésére. ELFOGADTA EZT A HATÁROZATOT: A Vietnámi Szocialista Köztársaság illetékes hatóságai vállalták, hogy rendszeresen és gyorsan közlik a Bizott- sággal, a toxinokat tartalmazó plankton betakarítási övezetekben való jelenlétével kapcsolatos adatokat. A Vietnámi Szocialista Köztársaság illetékes hatóságai hivatalos biztosítékokat nyújtottak a 91/492/EK irányelv fejezetében megállapított követelmé- mellékletének V. irányelvben előírtakkal az valamint nyek, említett (1) HL L 24. , 1998. 1. 30. , 31. o. (2) HL L 268. , 1991. 9. 24. , 1. o. 1. cikk A Vietnámi Szocialista Köztársaságban a „National Fisheries Inspection and Quality Assurance Center (NAFIQUACEN) of the Ministry of Fisheries” (NAFIQACEN) a kéthéjú kagylók, tüskésbőrűek, zsákállatok és tengeri haslábúak 91/492/EGK irányelv követelményeinek való megfelelését ellenőrző és igazoló illetékes hatóság. (3) HL L 108. , 1997. 4. 25. , 52. o. (4) HL L 16. , 1993. 1. 25. , 22. o. (5) HL L 243. , 1995. 10. 11. , 1. o. (6) HL L 46. , 1991. 2. 19. , 1. o. mivel: (1) (2) (3) (4) (5) 03/29. kötet HU Az Európai Unió Hivatalos Lapja 97 A Vietnámi Szocialista Köztársaságból származó és emberi fogyasztásra szánt kéthéjú kagylóknak, tüskésbőrűeknek, zsákállatoknak és tengeri haslábúaknak a mellékletben felsorolt engedélyezett tenyésztési területekről kell származniuk. 2. cikk Ennek a határozatnak a tagállamok a címzettjei. 3. cikk Kelt Brüsszelben, 2000. április 25-én. a Bizottság részéről David BYRNE a Bizottság tagja 03/29. kötet HU Az Európai Unió Hivatalos Lapja 97 MELLÉKLET Szám Név 01 02 03 04 05 TAN THANH BINH DAI BA MUM AN THUY CON TRAU


title: 2000/332/ΕΚ: Απόφαση της Επιτροπής, της 25ης Απριλίου 2000, για τροποποίηση της απόφασης 97/20/ΕΚ για τη θέσπιση καταλόγου τρίτων χωρών που πληρούν τις προϋποθέσεις ισοτιμίας για τους όρους παραγωγής και διάθεσης στην αγορά των δίθυρων μαλακίων, των εχινοδέρμων, των χιτωνοφόρων και των θαλάσσιων γαστεροπόδων [κοινοποιηθείσα υπό τον αριθμό Ε(2000) 1052] (Κείμενο που παρουσιάζει ενδιαφέρον για τον ΕΟΧ)

eurovoc_concepts:
Vietnam
health control
import
marketing
mollusc
third country

text: L 114/40 EL Επίσηµη Εφηµερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων 13. 5. 2000 ΑΠΟΦΑΣΗ ΤΗΣ ΕΠΙΤΡΟΠΗΣ της 25ης Απριλίου 2000 για τροποποίηση της απόφασης 97/20/ΕΚ για τη θέσπιση καταλόγου τρίτων χωρών που πληρούν τις προϋποθέσεις ισοτιµίας για τους όρους παραγωγής και διάθεσης στην αγορά των δίθυρων µαλακίων, των εχινοδέρµων, των χιτωνοφόρων και των θαλάσσιων γαστεροπόδων [κοινοποιηθείσα υπό τον αριθµό Ε(2000) 1052] (Κείµενο που παρουσιάζει ενδιαφέρον για τον ΕΟΧ) (2000/332/ΕΚ) Η ΕΠΙΤΡΟΠΗ ΤΩΝ ΕΥΡΩΠΑΪΚΩΝ ΚΟΙΝΟΤΗΤΩΝ, Έχοντας υπόψη: τη συνθήκη για την ίδρυση της Ευρωπαϊκής Κοινότητας, την οδηγία 91/492/ΕΟΚ του Συµβουλίου, της 15ης Ιουλίου 1991, περί καθορισµού των υγειονοµικών κανόνων οι οποίοι διέ- πουν την παραγωγή και τη διάθεση στην αγορά δίθυρων µαλα- κίων (1), όπως τροποποιήθηκε τελευταία από την οδηγία 97/ 79/ΕΚ (2), και ιδίως το άρθρο 9 παράγραφος 3 στοιχείο β), Εκτιµώντας τα ακόλουθα: (1) (2) Η απόφαση 97/20/ΕΚ της Επιτροπής (3), όπως τροποποι- ήθηκε τελευταία από την απόφαση 98/571/ΕΚ (4), καθορίζει τον κατάλογο των τρίων χωρών από τις οποίες επιτρέπονται για ανθρώπινη κατανάλωση οι εισαγωγές δίθυρων µαλακίων, εχινοδέρµων, χιτωνοφόρων και θαλάσσιων γαστεροπόδων. Η απόφαση 2000/333/ΕΚ της Επιτροπής (5) καθορίζει τους ειδικούς όρους για την εισαγωγή δίθυρων µαλακίων, εχινο- δέρµων, γαστεροπόδων καταγωγής της Σοσιαλιστικής ∆ηµοκρατίας του Βιετνάµ· ως εκ τούτου, η απόφαση 97/20/ΕΚ θα πρέπει να τροποποιηθεί χιτωνοφόρων θαλάσσιων και προκειµένου να συµπεριλάβει τη Σοσιαλιστική ∆ηµοκρατία του Βιετνάµ στο µέρος Ι του καταλόγου. (3) Τα µέτρα που προβλέπονται στην παρούσα απόφαση είναι σύµφωνα µε τη γνώµη της µόνιµης κτηνιατρικής επιτροπής, ΕΞΕ∆ΩΣΕ ΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ ΑΠΟΦΑΣΗ: Άρθρο 1 Το παράρτηµα της απόφασης 97/20/ΕΚ αντικαθίσταται από το παράρτηµα της παρούσας απόφασης. Η παρούσα απόφαση απευθύνεται στα κράτη µέλη. Άρθρο 2 Βρυξέλλες, 25 Απριλίου 2000. Για την Επιτροπή David BYRNE Μέλος της Επιτροπής (1) ΕΕ L 268 της 24. 9. 1991, σ. 1. (2) ΕΕ L 24 της 30. 1. 1998, σ. 31. (3) ΕΕ L 6 της 10. 1. 1997, σ. 46. (4) ΕΕ L 277 της 14. 10. 1998, σ. 42. (5) Βλέπε σελίδα 42 της παρούσας Επίσηµης Εφηµερίδας. 13. 5. 2000 EL Επίσηµη Εφηµερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων L 114/41 ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ Κατάλογος τρίτων χωρών από τις οποίες επιτρέπονται οι εισαγωγές για ανθρώπινη κατανάλωση δίθυρων µαλακίων, εχινοδέρµων, χιτωνοφόρων και θαλάσσιων γαστεροπόδων υπό οποιαδήποτε µορφή I. Τρίτες χώρες που αποτέλεσαν αντικείµενο ειδικής απόφασης βάσει της οδηγίας 91/492/ΕΟΚ του Συµβουλίου AU CL MA PE VN KR TN TR Αυστραλία Χιλή Μαρόκο Περού Σοσιαλιστική ∆ηµοκρατία του Βιετνάµ Νότια Κορέα Τυνησία Τουρκία II. Τρίτες χώρες που µπορούν να αποτελέσουν αντικείµενο προσωρινής απόφασης βάσει της απόφασης 95/408/ΕΚ του Συµβουλίου CA FO GR NZ TH Καναδάς Φερόες Νήσοι Γροιλανδία Νέα Ζηλανδία Ταϊλάνδη (µόνο για προϊόντα που έχουν υποστεί αποστείρωση ή θερµική επεξεργασία βάσει των όρων που καθορίζο- νται στην απόφαση 93/25/ΕΟΚ της Επιτροπής) US Ηνωµένες Πολιτείες της Αµερικής


title: Règlement (CE) n° 828/2000 de la Commission, du 25 avril 2000, modifiant les restitutions à l'exportation dans le secteur de la viande de volaille

eurovoc_concepts:
export refund
poultrymeat

text: L 101/24 FR Journal officiel des Communautés européennes 26. 4. 2000 RÈGLEMENT (CE) No 828/2000 DE LA COMMISSION du 25 avril 2000 modifiant les restitutions à l'exportation dans le secteur de la viande de volaille LA COMMISSION DES COMMUNAUTÉS EUROPÉENNES, vu le traité instituant la Communauté européenne, vu le règlement (CEE) no 2777/75 du Conseil du 29 octobre 1975 portant organisation commune des marchés dans le secteur de la viande de volaille (1), modifié en dernier lieu par le règlement (CE) no 2916/95 de la Commission (2), et notam- ment son article 8, paragraphe 3, Considérant ce qui suit: (1) (2) Les restitutions applicables à l'exportation dans le secteur de la viande de volaille ont été fixées par le règlement (CE) no 553/2000 de la Commission (3). L'application des critères visés dans l'article 8 du règle- ment (CEE) no 2777/75 aux données dont la Commis- sion a connaissance conduit à modifier les restitutions à l'exportation, actuellement en vigueur, conformément à l'annexe du présent règlement, A ARRÊTÉ LE PRÉSENT RÈGLEMENT: Article premier Les restitutions à l'exportation des produits visés à l'article 1er, paragraphe 1, du règlement (CEE) no 2777/75, fixées à l'annexe du règlement (CE) no 553/2000, sont modifiées conformément à l'annexe du présent règlement. Article 2 Le présent règlement entre en vigueur le 26 avril 2000. Le présent règlement est obligatoire dans tous ses éléments et directement applicable dans tout État membre. Fait à Bruxelles, le 25 avril 2000. Par la Commission Franz FISCHLER Membre de la Commission (1) JO L 282 du 1. 11. 1975, p. 77. (2) JO L 305 du 19. 12. 1995, p. 49. (3) JO L 67 du 15. 3. 2000, p. 32. 26. 4. 2000 FR Journal officiel des Communautés européennes L 101/25 du règlement de la Commission, du 25 avril 2000, modifiant les restitutions à l'exportation dans le secteur de la viande de volaille ANNEXE Code produit Destination des restitutions (1) 0207 12 10 9900 0207 12 90 9190 0207 12 90 9990 02 03 02 03 02 03 Montant des restitutions en EUR/100 kg 28,00 25,00 28,00 25,00 28,00 25,00 (1) Les destinations sont identifiées comme suit: 02 l'Angola, l'Arabie saoudite, le Koweït, le Bahreïn, le Qatar, Oman, les Émirats arabes unis, la Jordanie, le Yémen, le Liban, l'Irak et l'Iran, 03 l'Arménie, l'Azerbaïdjan, le Bélarus, la Géorgie, le Kazakhstan, le Kirghistan, la Moldova, la Russie, le Tadjikistan, le Turkménistan, l'Ouzbékistan et l'Ukraine. NB: Les codes produits, ainsi que les renvois en bas de page, sont définis au règlement (CEE) no 3846/87 de la Commission, modifié