Beaucoup plus tard, il y a de 2 à 3 millions d'années, l'Amérique du Sud a été associée à l'Amérique du Nord par la formation de l'isthme de Panama, qui a permis un échange biotique entre les deux continents, le Grand échange américain.
La formation de l'isthme de Panama a rejoint les deux continents il y a 2 à 3 millions d'années.