രണ്ടാമതായി അത്തരത്തിൽ ഒരു മീഡിയം ഉണ്ടാക്കി എടുക്കുകയാണെങ്കിൽ അത് സിറം ഉപയോഗിക്കാത്ത ഒരു ഡിഫൈൻഡ് മീഡിയ ആയിരിക്കണം. അങ്ങനെയെങ്കിൽ ഈ കോശങ്ങളെ എങ്ങനെയാണ് നിക്ഷേപിക്കാൻ പോകുന്നത്, ഏതു കോശങ്ങളെ ആദ്യം നിക്ഷേപിക്കും, ഏതു കോശങ്ങളെ പിന്നീട് നിക്ഷേപിക്കും.
இரண்டாவதாக, நீங்கள் ஒரு பொதுவான மீடியத்தை உருவாக்கியவுடன், அது மீண்டும் வரையறுக்கப்பட்ட மீடியம் சீரம் இல்லாததாக இருக்க வேண்டும், நீங்கள் முதலில் எந்த செல்களை பிளேட்டிங் செய்ய போகிறீர்கள் பின்னர் எந்த செல்களை பிளேட்டிங் செய்ய போகிறீர்கள்.