Цель исследования : разработать метод молекулярного-генетического анализа для определения уровней нормализованной экспрессии генов COL2A1 , COL6A1 , MMP-2 и MMP-9 в биологическом материале пациентов с гонартрозом. Материал и методы . В качестве биологического материала для исследования использовали биоптаты хряща коленного сустава 10 пациентов с гонартрозом. Выделение нуклеиновых кислот из образцов биологического материала проводили с использованием реагента TRIZol. Обратную транскрипцию проводили с использованием набора SuperScript III reverse transcriptase, dNTP и Ribonuclease inhibitor («Invitrogen», США). Результаты . С использованием программного обеспечения VectorNTI подобраны пары праймеров (forward и reverse) и TaqMan-зондов для генов COL2A1 , COL6A1 , MMP-2 и MMP-9 , изучена возможность использования подобранных пар праймеров и зондов для выявления каждого из исследуемых генов. Сконструированы «in-house» тест-системы в формате мультиплекс для референсного и таргетного генов. Заключение . Подтверждена высокая специфичность (100 %) выбранных наборов олигонуклеотидных праймеров с использованием онлайн приложения NCBI/Blast. Разработанный молекулярно-генетический метод может быть использован для определения уровней нормализованной экспрессии генов COL2A1 , COL6A1 , MMP-2 и MMP-9 при артропатиях коленного сустава.
коллаген, матриксная металлопротеиназа, экспрессия генов, праймер