After blocking with 5% dry nonfat milk in Tris-buffered saline with 0.1% Tween 20 TBS/T for 1h at room temperature, membranes were washed 3 times for 10 min in TBS/T and then incubated overnight at 4°C with anti-HSP70 monoclonal antibody conjugated to alkaline phosphatase SPA-810AP, StressGen at 1:1000 concentration.
Luego de bloquear con leche desgrasada en polvo al 5% en solución salina tamponada con Tris con 0,1% Tween 20 TBS/T durante lh a temperatura ambiente, se lavaron las membranas 3 veces durante 10 min en TBS/T y luego se incubaron de un día para otro a 4°C, con anticuerpo monoclonal anti-HSP70 conjugado a fosfato alcalino SPA-810AP, StressGen a una concentración de 1:1000.