Histochemical studies are very useful for determining whether differences in the brown pigment, sometimes very subtle differences, observed in the hepatocytes, really correspond to bile pigment. For instance, Prussian blue identifies iron deposits while Ziehl-Nielsen stain differentiates liposfuscin pigment positive staining from bile pigment negative staining which can look very similar when routine stains are used. In an attempt to help improve the bile flow secondary bile canaliculi proliferate into a maze of small angled irregular ducts arranged in the periphery of the portal tracts.
Para diferenciar si el pigmento pardo, en ocasiones muy sutil, observado a nivel hepatocitario, corresponde realmente a un pigmento biliar, son útiles los estudios de histoquímica, por ejemplo azul de Prusia que identifica depósitos de hierro, o la coloración de Ziehl-Nielsen para diferenciar el pigmento de lipofuscina tinción positiva del biliar tinción negativa, los cuales pueden ser muy semejantes a la observación con coloraciones de rutina.