The so-called Gowrie conspiracy of 1600, in which the young Earl of Gowrie, John Ruthven, and his brother Alexander Ruthven were killed by James' attendants for a supposed assault on the King, triggered the dismissal of their sisters Beatrix and Barbara Ruthven as ladies-in-waiting to Anne, with whom they were "in chiefest credit." The Queen, who was five months pregnant, refused to get out of bed unless they were reinstated and stayed there for two days, also refusing to eat.
ในปี ค.ศ. 1600 ที่จอห์น รูธเว็น เอิร์ลแห่งเกาว์รีที่ 3 และน้องชายอเล็กซานเดอร์ รูธเว็นถูกสังหารโดยองครักษ์ของพระเจ้าเจมส์เพราะถูกกล่าวหาว่าพยายามจะทําร้ายพระองค์ เป็นการทําให้น้องสาวสองคนเบียทริกซ์และบาร์บารา รูธเว็นผู้เป็นนางสนองพระโอษฐ์ของพระราชินีแอนน์ต้องถูกปลดตามไปด้วย แอนน์ผู้ขณะนั้นทรงครรภ์ได้ห้าเดือน ไม่ทรงยอมลุกจากพระแท่นไม่ยอมเสวยไปสองวันนอกจากเสียว่าจะเรียกตัวทั้งสองคนคืน