Q-FISH
ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಇನ್ ಸಿಟು ಹೈಬ್ರಿಡೈಸೇಶನ್ (ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್) ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಫಿಶ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದ ಸೈಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನಲ್ಲಿ, ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಸಾಫ್ಟ್ವೇರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಗುರಿ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ (ಪಿಎನ್ಎ) ಒಲಿಗೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುವ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ (ಸೈ3 ಅಥವಾ ಎಫ್ಐಟಿಸಿ) ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕರಣೆಗಳನ್ನು ಈ ತಂತ್ರವು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಕಶೇರುಕಗಳಲ್ಲಿ ವರ್ಣತಂತುಗಳ ದೂರದ ತುದಿಯಲ್ಲಿರುವ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಹೆಕ್ಸಾಮೆರಿಕ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳು (ಟಿಟಿಎಜಿಜಿಜಿ). ಡಿಎನ್ಎ-ಹಾನಿಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಮತ್ತು ಜೀನೋಮ್ ಅಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ತಡೆಯಲು ವರ್ಣತಂತು ತುದಿಗಳಲ್ಲಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ಗಳು ಅಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಇಂದಿನವರೆಗೂ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಸಂಶೋಧನೆಯ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿದೆ. ಪಿಎನ್ಎಗಳು ಮತ್ತು ಮೀನು ಪಿಎನ್ಎ ಬೆನ್ನೆಲುಬುಗಳು ಯಾವುದೇ ಚಾರ್ಜ್ ಮಾಡಲಾದ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲದ ಕಾರಣ, ಪಿಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ನಡುವಿನ ಬಂಧವು ಡಿಎನ್ಎ/ಡಿಎನ್ಎ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎ/ಆರ್ಎನ್ಎ ಡ್ಯುಪ್ಲೆಕ್ಸ್ಗಳಿಗಿಂತ ಬಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಪಿಎನ್ಎಗಳ ಈ ವಿಶಿಷ್ಟ ಲಕ್ಷಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಅಯಾನಿಕ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯಗಳಲ್ಲಿ, ಪಿಎನ್ಎಗಳು ಪೂರಕ ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಗೆ ಪೂರಕವಾಗಬಹುದು, ಆದರೆ ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ (ಸಿಸಿಸಿಟಿಎಎ) 3 ಪಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು (ಟಿಟಿಎಜಿಜಿ) ಎನ್ ಗುರಿ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಗೆ ಹೈಬ್ರಿಡೈಸ್ ಮಾಡಲು ಮಾತ್ರ ಅನುಮತಿಸುವ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಪಿಎನ್ಎಗಳ ಹೈಬ್ರಿಡೈಸೇಶನ್ ಅನ್ನು ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಗೆ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಜೀವಕೋಶಗಳಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯ ವಿಧಾನ/ಶಿಷ್ಟಾಚಾರ ಮೆಟಾಫೇಸ್-ಬಂಧಿತ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಕೊಯ್ಲು ಮಾಡುವ ಹಲವಾರು ಗಂಟೆಗಳ ಮೊದಲು, ಕೊಲ್ಸೆಮಿಡ್ ಅನ್ನು ಸಂವರ್ಧನ ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮೈಟೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮನಾಳಗಳನ್ನು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮೆಟಾಫೇಸ್ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಕೊಲ್ಸೆಮಿಡ್ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ನಂತರ ಟ್ರಿಪ್ಸಿನೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೈಪೋಟೋನಿಕ್ ಬಫರ್ನಲ್ಲಿ ಮರುಹೊಂದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಉಬ್ಬಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವರ್ಣತಂತುಗಳನ್ನು ಹರಡುತ್ತದೆ. ಹೈಪೋಟೋನಿಕ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ನಂತರ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮೂಲಕ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮೆಥನಾಲ್/ಗ್ಲೇಶಿಯಲ್ ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಫಿಕ್ಸೇಟಿವ್ನಲ್ಲಿ ಮರುಹೊಂದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಸ್ಲೈಡ್ ಮೇಲೆ ಸೆಲ್ ಸಸ್ಪೆನ್ಷನ್ನ ಕೆಲವು ಹನಿಗಳನ್ನು ಇರಿಸಿ ಮತ್ತು ರಾತ್ರಿಯಿಡೀ ಗಾಳಿಯನ್ನು ಒಣಗಲು ಬಿಡಿ. ಮರುದಿನ, ಸ್ಲೈಡ್ ಅನ್ನು ಹಲವಾರು ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬಫರ್ಡ್ ಸಲೈನ್ (ಪಿಬಿಎಸ್) ನಲ್ಲಿ ಮುಳುಗಿಸಿ. ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು ಫಾರ್ಮಾಲ್ಡಿಹೈಡ್ನಲ್ಲಿ ಸರಿಪಡಿಸಿ ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು 4 ಪ್ರತಿಶತ ಫಾರ್ಮಾಲ್ಡಿಹೈಡ್ ದ್ರಾವಣಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ ಮತ್ತು ಹಲವಾರು ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸರಿಪಡಿಸಿ. ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು ಪಿಬಿಎಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಹಲವಾರು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಿರಿ. ಟ್ರೀಟ್ ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು ಪೆಪ್ಸಿನ್ ಸ್ಲೈಡ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ನಂತರ ಪೆಪ್ಸಿನ್ ದ್ರಾವಣಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪೆಪ್ಸಿನ್ ಒಂದು ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ ಆಗಿದ್ದು, ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಪೆಪ್ಟೈಡ್ಗಳಾಗಿ ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಹೈಬ್ರಿಡೈಸ್ ಪಿಎನ್ಎ ಪ್ರೋಬ್ (ಸೈ3 ಅಥವಾ ಎಫ್ಐಟಿಸಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪಿಎನ್ಎಗಳು) ಹೈಬ್ರಿಡೈಸೇಶನ್ ಮಿಶ್ರಣದ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕವರ್ ಸ್ಲಿಪ್ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಸ್ಥಿರ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಸ್ಲೈಡ್ ಮೇಲೆ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೀಟ್ ಡಿನೇಚರ್ ಡಿಎನ್ಎ ನಂತರ ಸ್ಲೈಡ್ ಅನ್ನು ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿ ಬಿಸಿಮಾಡಿದ ಒಲೆಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶದಲ್ಲಿನ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು 80 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಡಿನೇಚರ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪಿಎನ್ಎ ಪೂರಕ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಹೈಬ್ರಿಡೈಸ್ ಮಾಡಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡಲು ಸ್ಲೈಡ್ ಅನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಬಿಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅನ್ಬೌಂಡ್ ಪಿಎನ್ಎಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ವಾಶ್ ಸ್ಲೈಡ್ಗಳು ಮತ್ತು ಕೌಂಟರ್ಸ್ಟೈನ್ ಡಿಎನ್ಎ (ಡಿಎಪಿಐ ಅಥವಾ ಪಿಐ) ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು ನಂತರ ಅನ್ಬೌಂಡ್ ಪಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ವಿವಿಧ ವಾಶ್ ದ್ರಾವಣಗಳಲ್ಲಿ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಆರೋಹಣಾ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಮಾಧ್ಯಮವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಡಿಎಪಿಐ (ಡಿಎನ್ಎ ಕೌಂಟರ್ಸ್ಟೇನ್) ಮತ್ತು ಪಿಎನ್ಎ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಸಂರಕ್ಷಿಸಲು ಮತ್ತು ಫೋಟೋಬ್ಲೀಚಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಆಂಟಿಫೇಡ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಚಿತ್ರ ಸೆರೆಹಿಡಿಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸುವ ಮೊದಲು, ಕ್ಯಾಮರಾ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಸರಿಯಾದ ಸೆಟಪ್ ಅನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಉಲ್ಲೇಖ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಈ ಉಲ್ಲೇಖ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿ ಸ್ವಾಧೀನ ಅಧಿವೇಶನಕ್ಕೂ ಮೊದಲು ಚಿತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಮಾದರಿಗಳ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ದೀಪ ಅಥವಾ ಕ್ಯಾಮೆರಾದಲ್ಲಿನ ದೋಷಗಳಿಂದಾಗಿರುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಮೆಟಾಫೇಸ್ ಕೋಶವನ್ನು ನಂತರ ಕೈಯಿಂದ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಮೆರಾಗಾಗಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎರಡು ರೀತಿಯ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆಃ ಅವುಗಳ ಮೆಟಾಫೇಸ್ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿರುವ ಬಣ್ಣದ ವರ್ಣತಂತುಗಳ ಚಿತ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಲೋಮಿಯರ್ಗಳ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಚಿತ್ರಗಳು. ಈ ಎರಡು ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ನಂತರ ಜೋಡಿಸಿ ಒಂದು ಸಂಯೋಜಿತ ಚಿತ್ರವನ್ನು ರಚಿಸಬಹುದು. ಈ ಚಿತ್ರವನ್ನು ನಂತರ ಕಾರ್ಯೋಟೈಪ್ ಮಾಡಬಹುದು ಅಥವಾ ನಾಮಕರಣವನ್ನು ನಿಗದಿಪಡಿಸಬಹುದು. ಇದಲ್ಲದೆ, ಪಿ-ಆರ್ಮ್ಸ್ ವರ್ಸಸ್ ಕ್ಯೂ-ಆರ್ಮ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದದ ಇಂಟ್ರಾ-ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಬಹುದು. ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯಗೊಳಿಸಲು ವಿವಿಧ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ದತ್ತಾಂಶವನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು, ಆದರೆ ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಪುನರಾವರ್ತನೆಗಳ ತಿಳಿದಿರುವ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳನ್ನು ಟೆಲೋಮೆರ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಟೆಲೋಮೆರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಸಂಬಂಧಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡಲು ಮಾನದಂಡಗಳಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಉಲ್ಲೇಖ ಮಣಿಗಳ ಜೊತೆಗೆ, ಸಹೋದರಿ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟಿಡ್ಗಳಿಂದ ಸಿಗ್ನಲ್ ಬಲವು ಸಮಾನವಾಗಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಡೇಟಾದ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲು ಮತ್ತೊಂದು ನಿಯಂತ್ರಣವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಕೊನೆಯದಾಗಿ, ಚಿತ್ರಗಳು ಸ್ಯಾಚುರೇಟೆಡ್ ಆಗಿರದಿರುವುದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿದೀಪಕದ ತೀವ್ರತೆಯು ಶುದ್ಧತ್ವವನ್ನು ತಲುಪಿದರೆ, ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಚಿತ್ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ತಂತ್ರಾಂಶವು ಫ್ಲಿಂಟ್ಬಾಕ್ಸ್ ನೆಟ್ವರ್ಕ್ನಿಂದ ಉಚಿತವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಿದೆ. ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದದ ವಿತರಣೆಯ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ವಿವಿಧ ಕಾಯಿಲೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲು ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಯ ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಪ್ರಸ್ತುತವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ವಿಮರ್ಶಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಚಿಕ್ಕದಾದ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಅಪಸಾಮಾನ್ಯ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯವಾದದ್ದು ಸರಾಸರಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಈ ವಿಮರ್ಶಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಚಿಕ್ಕದಾದ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ಗಳ ಆವರ್ತನವಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದದ ಬಗ್ಗೆ ನಿಖರವಾದ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆಯಾದರೂ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ನಂತಹ ಇತರ ಮೀನು ಸಂಬಂಧಿತ ತಂತ್ರಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅದರ ಪ್ರಸ್ತುತತೆಯನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಬಹುದು. ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ನಲ್ಲಿ, ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿಯನ್ನು ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನಲ್ಲಿ ಕೇವಲ ಬೆರಳೆಣಿಕೆಯಷ್ಟು ಜೀವಕೋಶಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು (ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದ) ಅಳೆಯಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ, ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಜೀವಕೋಶದೊಳಗಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವರ್ಣತಂತುಗಳಲ್ಲಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ-ಥ್ರೋಪುಟ್ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆಯಾದರೂ ಮತ್ತು ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲದಿದ್ದರೂ, ಗುಂಪುಗಳು ಹೈ-ಥ್ರೋಪುಟ್ (HT) ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿವೆ, ಇದು 96 ಬಾವಿ ಫಲಕಗಳಲ್ಲಿನ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳಲ್ಲಿ ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಯಂತ್ರೋಪಕರಣಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಅಂತೆಯೇ, ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್-ಫಿಶ್ ಮತ್ತು ಸೆನ್ಎಂ-ಫಿಶ್ನಂತಹ ಇತರ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇವುಗಳನ್ನು ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್-ಫಿಶ್ 24 ವರ್ಣತಂತುಗಳನ್ನು ವಿವಿಧ ಬಣ್ಣಗಳಲ್ಲಿ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಮತ್ತು ಇಂಟ್ರಾ-ಅಥವಾ ಇಂಟರ್-ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಮರುಜೋಡಣೆಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ವಿವಿಧ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಸೆಂಟ್ರೋಮೀರ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಹು-ಬಣ್ಣದ ಮೀನು (ಸೆನ್ಎಮ್-ಫಿಶ್) ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್-ಫಿಶ್ನಿಂದ ಬಹು-ಬಣ್ಣದ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸೆಂಟ್ರೋಮೀರ್ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸೆಂಟ್ರೋಮೀರ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಸೆಂಟ್ರೋಮೆರ್ ಅಸಹಜತೆಗಳು ಅಥವಾ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಮರುಜೋಡಣೆಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಲೋಮೆರ್ ಉದ್ದದ ನಡುವಿನ ಸಂಬಂಧವು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಬೀರಬಹುದು, ಏಕೆಂದರೆ ಇವೆಲ್ಲವೂ ಪ್ರಸವಪೂರ್ವ ಅಥವಾ ಪ್ರಸವಾನಂತರದ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮತ್ತು ಗೆಡ್ಡೆಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖವಾಗಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ. ಈ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ಟೆಲೋಮಿಯರ್ಗಳ ಪಾತ್ರ ಮತ್ತು ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದದ ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಯ ಬಗ್ಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಜ್ಞಾನೋದಯವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತವೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನ ಮತ್ತೊಂದು ಅನ್ವಯವೆಂದರೆ ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಫ್ಯೂಷನ್ಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದು, ಅಲ್ಲಿ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ಗಳ ತುದಿಗಳನ್ನು ಟೆಲೋಮೆಯರ್ನಲ್ಲಿ ಒಟ್ಟಿಗೆ ಬೆಸೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇವುಗಳನ್ನು ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ತೆರಪಿನ (ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ನೊಳಗೆ) ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳು (ಐಟಿಎಸ್ಗಳು) ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಸಮ್ಮಿಳನಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವುದು ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ವಿಕಾಸದ ಹಾದಿಯನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಒಂದು ಮಾನವನ ವರ್ಣತಂತು ಒಂದು ಐ. ಟಿ. ಎಸ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು ಅದು ಚಿಂಪಾಂಜಿಗಳಲ್ಲಿನ ಎರಡು ವರ್ಣತಂತುಗಳಿಗೆ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಊಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಿವಿಧ ಪ್ರಭೇದಗಳಲ್ಲಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದದ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಗಮನಿಸುವುದು ಕಾರ್ಯೋಟೈಪ್ ವಿಕಸನ ಮತ್ತು ಮಾನವನ ಕಾಯಿಲೆಗಳಿಗೆ ಪ್ರಸ್ತುತತೆಯ ಬಗ್ಗೆ ಪ್ರಮುಖ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಮತ್ತೊಂದು ಉದಾಹರಣೆಯಲ್ಲಿ, ನಾನ್ಹೋಮೋಲೋಗಸ್ ಎಂಡ್ ಜಾಯಿನಿಂಗ್ (ಎನ್. ಎಚ್. ಇ. ಜೆ) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಬ್ರೇಕ್ಗಳನ್ನು ರಿಪೇರಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಲು ಕೆಯು70/ಕೆಯು80 ಹೆಟೆರೊಡೈಮರ್ ಅನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿದೆ. ಈ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವುದರಿಂದ ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಕುಗ್ಗುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಮೀನುಗಳೊಂದಿಗೆ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ಗಮನಿಸಬಹುದು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕು 80 ವಂಶವಾಹಿಯ ಕೊರತೆಯಿರುವ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ, ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಕ್ಯೂಫಿಶ್ನಿಂದ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅವು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿರುವುದನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ನಡುವಿನ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದದಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಅಳೆಯಲು ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಕುಗ್ಗುವಿಕೆಯು ಜೀನೋಮಿಕ್ ಅಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಯಸ್ಸಾದಂತೆ ನೈಸರ್ಗಿಕವಾಗಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಎರಡೂ ಅಂಶಗಳು ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ನ ಸಂಭವನೀಯ ಕಾರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿವೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನ ಪ್ರಯೋಜನಗಳು ಇತರ ಫಿಶ್ ತಂತ್ರಗಳಿಗಿಂತ ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನ ಅತಿದೊಡ್ಡ ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ತಂತ್ರದ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ. ಡಿಎನ್ಎ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಮೀನುಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಪಡೆಯುವುದು ಕಷ್ಟ, ಏಕೆಂದರೆ ಸಂಕರೀಕರಣ ಶೋಧಕಗಳು ಪೂರಕ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎಳೆಗಳ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯೊಂದಿಗೆ ಸ್ಪರ್ಧಿಸುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಪಿಎನ್ಎಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ ಮತ್ತು ಅತ್ಯಂತ ಕಠಿಣ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಹೈಬ್ರಿಡೈಸ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ, ಇದು ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ನಿವಾರಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಅಂತೆಯೇ, ಪಿಎನ್ಎ ಪ್ರೋಬ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ವಿರೂಪಗೊಳಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದರಿಂದ, ಇದು ಫಿಶ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಈ ವಿಧಾನವು ಹೆಚ್ಚಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಅನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀವಕೋಶದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ವರ್ಣತಂತುಗಳ (ಪಿ ಅಥವಾ ಕ್ಯೂ ಆರ್ಮ್) ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಬಳಕೆದಾರರಿಗೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಅಲ್ಲದೆ, ಬ್ಲಾಟ್ಗೆ 105 ಕ್ಕೂ ಹೆಚ್ಚು ಕೋಶಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಸದರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ಗಳಿಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನಲ್ಲಿ 30 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಕೋಶಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನ ನ್ಯೂನತೆಗಳು ಅದರ ಪ್ರಯೋಜನಗಳ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಸಾಕಷ್ಟು ಶ್ರಮದಾಯಕವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಥ್ರೋಪುಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲ. ಈ ತಂತ್ರವು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಲಾದ ಮೆಟಾಫೇಸ್ ಕೋಶಗಳ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ನಿಖರವಾಗಿರಲು ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಸರಿಹೊಂದಿಸುವುದು/ಸಾಮಾನ್ಯಗೊಳಿಸುವುದು ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಅಲ್ಲದೆ, ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮಾತ್ರ ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೂ, ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಮೆಟಾಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಸಾಕಷ್ಟು ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಪಡೆಯುವುದು ಕಷ್ಟ. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಕಳಪೆ ವರ್ಣತಂತು ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವು ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ತಾಪಮಾನಕ್ಕೆ ಅತಿಯಾಗಿ ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳುವುದರಿಂದ ಉಂಟಾಗಬಹುದು. ಅಂತೆಯೇ, ಒಬ್ಬರು ವಿವಿಧ ಜೀವಕೋಶದ ಪ್ರಕಾರಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತಿದ್ದರೆ, ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನಲ್ಲಿನ ಅನೇಕ ಹಂತಗಳಿಗೆ (ಕೊಲ್ಸೆಮಿಡ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಉದ್ದದಂತಹ) ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯಲ್ಲಿನ ಒಂದು ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಮಸ್ಯೆಯೆಂದರೆ ಫೋಟೋಬ್ಲೀಚಿಂಗ್, ಅಲ್ಲಿ ಬೆಳಕಿಗೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳುವುದರಿಂದ ಫ್ಲೋರೋಫೋರ್ ತನ್ನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಇದು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ತೀವ್ರತೆಯ ತಪ್ಪಾದ ಮಾಪನಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಫೋಟೊಬ್ಲೆಚಿಂಗ್, ಬೆಳಕಿನ ಮೂಲ ಸ್ಥಿರತೆ ಮತ್ತು ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳೆಲ್ಲವೂ ದೋಷದ ಮೂಲಗಳಾಗಿವೆ ಆದರೆ ಬಳಕೆದಾರರು ಮಾದರಿಗಳ ನಡುವಿನ ಸ್ವಾಧೀನದ ಸಮಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ಸರಿಯಾದ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾದರೆ ಅದನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಮತ್ತು ಪಿಎನ್ಎಗಳ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯ ಮೊದಲು, ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ತಂತ್ರವು ಸದರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ಗಳ ಬಳಕೆಯಾಗಿತ್ತು. ಈ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ, ನಿರ್ಬಂಧಿತ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಜೀರ್ಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ನಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ನಂತರ ಮೆಂಬರೇನ್ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಅಥವಾ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರೋಬ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಹೈಬ್ರಿಡೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ವಿಧಾನವು ಜೀವಕೋಶದ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲಿ ಸರಾಸರಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಮಾತ್ರ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಜೀನೋಮ್ನಲ್ಲಿ ತೆರಪಿನ ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯು ತಪ್ಪಾದ ಅಳತೆಗಳನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನಂತೆಯೇ, ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ ಎಂಬುದು ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನ ರೂಪಾಂತರವಾಗಿದೆ, ಇದು ಪಿಎನ್ಎಗಳ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ, ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ ಮೆಟಾಫೇಸ್ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ಗಳ ಬದಲಿಗೆ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಮಾನತ್ತಿನಲ್ಲಿ ಪಿಎನ್ಎ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಹೈಬ್ರಿಡೈಸ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಸಂಕರೀಕರಣದ ನಂತರ, ಸಾವಿರಾರು ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹರಿವಿನ ಸೈಟೋಮೀಟರ್ನಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಬಹುದು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಫ್ಲೋ-ಫಿಶ್ ಪ್ರತಿ ಜೀವಕೋಶಕ್ಕೆ ಸರಾಸರಿ ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಉದ್ದವನ್ನು ಮಾತ್ರ ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ನ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಉದ್ದವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಪಿಎನ್ಎ-ಫಿಶ್ ಕ್ಯೂ-ಫಿಶ್ನ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗಿದ್ದರೂ, ಗುಣಾತ್ಮಕ ದತ್ತಾಂಶದ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಇತರ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳು ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಉದ್ದೇಶಗಳಿಗಾಗಿ ಫಿಶ್ನೊಂದಿಗೆ ಪಿಎನ್ಎಗಳ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಂಡಿವೆ. ಚಿಕಿತ್ಸಾಲಯದೊಳಗೆ ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗಗಳನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಪಿ. ಎನ್. ಎ.-ಫಿಶ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಧನಾತ್ಮಕ ರಕ್ತ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಗ್ರಾಂ ಬಣ್ಣದೊಂದಿಗೆ, ಪಿಎನ್ಎಗಳನ್ನು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಅಥವಾ ಯೀಸ್ಟ್ನ ವಿವಿಧ ತಳಿಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಪ್ರಭೇದ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಆರ್ಆರ್ಎನ್ಎ (ರೈಬೋಸೋಮಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ) ಅನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ತ್ವರಿತವಾಗಿ ನಡೆಸಬಹುದಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಆಸ್ಪತ್ರೆಯಿಂದ ಪಡೆದ ಸೋಂಕುಗಳು ಸಂಭವಿಸಬಹುದಾದ ಆಸ್ಪತ್ರೆಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತಿದೆ. ಕೋ-ಫಿಶ್ (ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ಓರಿಯೆಂಟೇಶನ್-ಫಿಶ್) ಪಿಎನ್ಎಗಳು ಮತ್ತು ಫಿಶ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ಮತ್ತೊಂದು ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ಕೋ-ಫಿಶ್ (ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ಓರಿಯೆಂಟೇಶನ್-ಫಿಶ್) ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಪಿಎನ್ಎಗಳೊಂದಿಗೆ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ಗಳನ್ನು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಈ ವಿಧಾನವು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯ ಹೊಸದಾಗಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಎಳೆಗಳನ್ನು ಆಯ್ದ ತೆಗೆದುಹಾಕುವಿಕೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ (ಬಿ. ಆರ್. ಡಿ. ಯು ಸಂಯೋಜನೆಯ ಬಳಕೆಯ ಮೂಲಕ), ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಕೇವಲ ಒಂದೇ ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಗುರಿ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಇರುತ್ತದೆ. ವಿವಿಧ ಬಣ್ಣದ ಏಕ ದಿಕ್ಕಿನ ಪಿಎನ್ಎ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ, ಸಹೋದರಿ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟಿಡ್ಗಳನ್ನು ಅನನ್ಯವಾಗಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಸೈಟೋಜೆನೆಟಿಕ್ಸ್