Umu Chromotest
ಔಷಧಶಾಸ್ತ್ರ ಮತ್ತು ಜೆನೆಟಿಕ್ಸ್ಗಾಗಿ, ಒಡಾ ಮತ್ತು ಇತರರು ಮೊದಲು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಮತ್ತು ಪ್ರಕಟಿಸಿದ ಉಮು ಕ್ರೊಮೊಟೆಸ್ಟ್, ರಾಸಾಯನಿಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಜೈವಿಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (ಜೈವಿಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ) ಆಗಿದೆ. ಇದು ಡಿಎನ್ಎ-ಹಾನಿಕಾರಕ ಏಜೆಂಟ್ಗಳ ಉಮು ಒಪೆರಾನ್ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ. ಹಾನಿ ಪ್ರಚೋದಕ (ಡಿನ್) ವಂಶವಾಹಿಗಳಾದ ರೆಕಾ, ಲೆಕ್ಸ್ಎ ಮತ್ತು ಯುಎಂಯುಡಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ, ಯುಎಂಯುಸಿ ವಂಶವಾಹಿಯು ಎಸ್ಓಎಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮೂಲಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಮ್ಯುಟಜೆನೆಸಿಸ್ನಲ್ಲಿ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ತೊಡಗಿದೆ. ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಲ್ಯಾಕ್ ಒಪೆರಾನ್ಅನ್ನು (ಲ್ಯಾಕ್ಟೋಸ್ಅನ್ನು ಕೆಳಮಟ್ಟಕ್ಕಿಳಿಸುವ ಪ್ರೊಟೀನ್, β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಜವಾಬ್ದಾರಿ) ಉಮು-ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರೊಟೀನ್ಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಇರಿಸುವ ಒಪೆರಾನ್ ಸಮ್ಮಿಳನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಲ್ಯಾಕ್ಟೋಸ್ ಅನಲಾಗ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸರಳ ವರ್ಣಮಾಪಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ, ಇದು β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ನಿಂದ ಅವನತಿ ಹೊಂದುತ್ತದೆ, ಇದು ಬಣ್ಣದ ಸಂಯುಕ್ತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿ ಮೂಲಕ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅಳೆಯಬಹುದು. ಬಣ್ಣದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಟ್ಟವು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ನ ಪರೋಕ್ಷ ಅಳತೆಯಾಗಿದೆ, ಇದು ಸ್ವತಃ ಡಿಎನ್ಎ ಹಾನಿಯ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಉಮು ಕ್ರೋಮೋಟೆಸ್ಟ್ ತನ್ನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಐಎಸ್ಒ 13829 "ನೀರಿನ ಗುಣಮಟ್ಟ-ಉಮು-ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನೀರು ಮತ್ತು ತ್ಯಾಜ್ಯ ನೀರಿನ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಯ ನಿರ್ಣಯ" ದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಕ್ರೋಡೀಕರಿಸುವ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪ್ರಯೋಜನವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಯನ್ನು ಮಾನವರಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ನ ಬೆಳವಣಿಗೆಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಲಾಗದಿದ್ದರೂ, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದಲ್ಲಿನ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಪರಿಣಾಮಗಳು ಮತ್ತು ಸಸ್ತನಿಗಳಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ಉತ್ಪರಿವರ್ತನ ಮತ್ತು ಗೆಡ್ಡೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ನಡುವಿನ ಬಲವಾದ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧವು ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸಿದ್ಧಾಂತ ಸಾಲ್ಮೊನೆಲ್ಲಾ ಟೈಫಿಮುರಿಯಂ ಟಿಎ 1535 [ಪಿ. ಎಸ್. ಕೆ 1002] ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು 96-ಬಾವಿಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮಫಲಕದಲ್ಲಿ ಸಂಭಾವ್ಯ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಪರೀಕ್ಷಾ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಿಗೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಜೆನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಗಾಯಗಳು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೀನೋಮ್ನಲ್ಲಿ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾದರೆ, ಸಾಮಾನ್ಯ ಎಸ್ಓಎಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಭಾಗವಾಗಿ ಯುಎಂಯುಸಿ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಪಿ. ಎಸ್. ಕೆ. 1002 ಲ್ಯಾಕ್ಝಡ್ ವರದಿಗಾರ ಜೀನ್ಗೆ ಬೆಸೆಯಲಾದ ಯು. ಎಂ. ಯು. ಸಿ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಎಸ್. ಓ. ಎಸ್ ಕ್ರೋಮೋಟೆಸ್ಟ್ನಲ್ಲಿನ ಸಮ್ಮಿಳನದಂತೆಯೇ ಇರುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ ಯುಎಂಯುಸಿ-ಜೀನ್ನ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಮಾದರಿಯ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಅಳತೆಯಾಗಿದೆ. ಬಿಟಾ-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ಗಾಗಿ ಲ್ಯಾಕ್ಝಡ್-ಜೀನ್ನೊಂದಿಗೆ ಯುಎಂಯುಸಿ-ಜೀನ್ನನ್ನು ಬೆಸೆಯಲಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಲ್ಯಾಕ್ಝಡ್-ಎನ್ಕೋಡೆಡ್ ಬಿ-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ನಿಂದ ಬಣ್ಣರಹಿತ ಒಎನ್ಪಿಜಿ ತಲಾಧಾರವನ್ನು (ಒ-ನೈಟ್ರೋಫೆನಿಲ್-ಬಿಟಾ-ಡಿ-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಪೈರಾನೋಸೈಡ್) ಹಳದಿ ಉತ್ಪನ್ನ ಒ-ನೈಟ್ರೋಫೆನಿಲ್ಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅಳೆಯುವ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಯುಎಂಯುಸಿ-ಜೀನ್ನ ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ನಿರ್ಣಯಿಸಬಹುದು. ಎಸ್ಓಎಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಜೆನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಗಾಯಗಳಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಸೂಕ್ತವಾದ ವರದಿಗಾರ ಜೀನ್ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ ಎಸ್. ಟೈಫಿಮುರಿಯಂನ ಒಂದು ಪ್ರಭೇದವು ಎಲ್ಲಾ ವರ್ಗದ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೆನೋಟಾಕ್ಸಿನ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ. ಇತರ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ ಮತ್ತು ಮ್ಯುಟಜೆನಿಸಿಟಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಂತೆ, ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಸಂಯುಕ್ತಗಳನ್ನು ಎಸ್9 ಮೈಕ್ರೋಸೊಮಲ್ ಇಲಿ ಯಕೃತ್ತಿನ ಸಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ತನಿಖೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಘಾತೀಯ ಹಂತದಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರೊಸೀಜರ್ ಎಸ್. ಟೈಫಿಮುರಿಯಂ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾವು ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಖಾಲಿ ಜಾಗಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಮೂರು ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು 2 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. 2 ಗಂಟೆಗಳ ನಂತರ, ಒಡ್ಡುವಿಕೆ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ತಾಜಾ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಾಧ್ಯಮವಾಗಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇನ್ನೂ 2 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಬೆಳೆಯಲು ಅವಕಾಶ ನೀಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಯುಎಂಯುಸಿ ವಂಶವಾಹಿ ಮತ್ತು ಸಂಯೋಜಿತ ಲ್ಯಾಕ್ಝಡ್ ವರದಿಗಾರ ವಂಶವಾಹಿಯ ಪ್ರಚೋದನೆ ಮತ್ತು β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ನ ನಂತರದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಲೈಸಿಸ್ ನಂತರ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ವರ್ಣರಹಿತ ಒ. ಎನ್. ಪಿ. ಜಿ. ಯನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿತ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಹಳದಿ ಉತ್ಪನ್ನವಾದ ಓ-ನೈಟ್ರೋಫೆನಿಲ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಬಣ್ಣದ ತೀವ್ರತೆಯು ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ಪ್ರಮಾಣದೊಂದಿಗೆ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಹೀಗಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಮಾಪನಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಹಂತದ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ನಂತರ OD 600 ನಲ್ಲಿ ಪ್ಲೇಟ್ನ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಓಎನ್ಪಿಜಿ ಕಾವು ನಂತರ OD420 ಅನ್ನು ಓದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಸೈಟೋಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಯು ಸಹ ಇದೆಯೇ ಮತ್ತು ಐಆರ್ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಅಮಾನ್ಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಇಂಡಕ್ಷನ್ ಅನುಪಾತ (ಐಆರ್) ಮತ್ತು ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಅಂಶವನ್ನು ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಪ್ರಯೋಜನಗಳು ಉತ್ಪರಿವರ್ತನಕ್ಕಾಗಿ ಉಮು ಕ್ರೋಮೋಟೆಸ್ಟ್ ಮತ್ತು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಅಮೆಸ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ನಡುವಿನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧವು ಪ್ರತಿ ವರ್ಷ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗುವ ಸಾವಿರಾರು ಹೊಸ ಔಷಧೀಯ, ಕೃಷಿ ಮತ್ತು ಕೈಗಾರಿಕಾ ರಾಸಾಯನಿಕಗಳ ಆರಂಭಿಕ ಹಂತದ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಸಮಂಜಸವಾದ ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿ ಇದನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ದೊಡ್ಡ ರಾಸಾಯನಿಕ ತಯಾರಕರು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಅಮೆಸ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯೊಂದಿಗೆ ವರ್ಷಕ್ಕೆ 100 ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ರಾಸಾಯನಿಕಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದಾರೆ, ಇದಕ್ಕೆ ಹಲವಾರು ಸಾಲ್ಮೊನೆಲ್ಲಾ ತಳಿಗಳ ಬಳಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಕೇವಲ ಒಂದೇ ಸಾಲ್ಮೊನೆಲ್ಲಾ ಪ್ರಭೇದವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು, ಉಮು ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಅದೇ ಸಂಪನ್ಮೂಲಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶ್ರೇಣಿಯ ಹೊಸ ರಾಸಾಯನಿಕಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು. ವಸ್ತು ವೆಚ್ಚ ಮತ್ತು ಶ್ರಮದಲ್ಲಿನ ಕಡಿತ ಮತ್ತು ಅದರ ದೃಢತೆಯು ಸಂಕೀರ್ಣ ಪರಿಸರ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಾದ ಪರದೆಯಾಗಿ ಇದನ್ನು ಇರಿಸುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳು