MCherry
ಎಂ ಚೆರ್ರಿ ಮೊನೊಮೆರಿಕ್ ರೆಡ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ (ಎಂಆರ್ಎಫ್ಪಿ) ಎಂಫ್ರೂಟ್ಸ್ ಕುಟುಂಬದ ಸದಸ್ಯ. ಆರ್ಎಫ್ಪಿಯಾಗಿ, ಎಮ್ ಚೆರ್ರಿಯನ್ನು ಡಿಸ್ಕೊಸೊಮಾ ಸಮುದ್ರದ ಎನಿಮೋನ್ಗಳ ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ, ಹಸಿರು ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿಗಿಂತ (ಜಿಎಫ್ಪಿಗಳು) ಭಿನ್ನವಾಗಿ ಇವುಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎಕ್ವೋರಿಯಾ ವಿಕ್ಟೋರಿಯಾ ಜೆಲ್ಲಿ ಮೀನುಗಳಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಜೀವಕೋಶದಲ್ಲಿನ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಅವುಗಳನ್ನು ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಮತ್ತು ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಬಳಸಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಬಹುದು. mCherry 540-590 nm ನಡುವೆ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 550-650 nm ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೊರಸೂಸುತ್ತದೆ. ಎಮ್ ಚೆರ್ರಿ ಜೀನ್ಗಳನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಸಾಧನಗಳಾಗಿ ಬಳಸುವ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ಗಳ ಗುಂಪಿಗೆ ಸೇರಿದೆ. ಈ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಟ್ಯಾಗ್ಗಳನ್ನು ಅನೇಕ ವೈವಿಧ್ಯಮಯ ಜೀವಿಗಳ ಆನುವಂಶಿಕ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ ನಿಖರವಾಗಿ ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಜೀನೋಮ್ ಎಡಿಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಸುಧಾರಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಿವಿಧ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಹೊಳಪು ಮತ್ತು ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ನಡುವಿನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹೋಲಿಕೆಗಳನ್ನು ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಥವಾ ಜೀವಿಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಜೈವಿಕ ಅಸ್ಥಿರಗಳಿಂದ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗಿದೆ. ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಪರಿಸರವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅನುಕರಿಸುವುದು ಕಷ್ಟ, ಮತ್ತು ಪರಿಸರದಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸವು ಹೊಳಪು ಮತ್ತು ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಬಹುದು. ಎಮ್. ಆರ್. ಎಫ್. ಪಿಗಳು-ಎಂಚೆರಿಯಂತೆ-ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿವೆ ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಕಡಿಮೆ ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಟೆಟ್ರಾಮರ್ಗಳಿಗಿಂತ ವೇಗವಾಗಿ ಮಡಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ, ಇದು ಗುರಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಅಡಚಣೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಡೆವಲಪ್ಮೆಂಟ್ ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ ಅನ್ನು ಡಿಸ್ಕೊಸೊಮಾ ಸೀ ಎನಿಮೋನ್ಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಟೆಟ್ರಾಮೆರಿಕ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಆಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಕೆಂಪು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ನಿಂದ ಬರುತ್ತವೆ. ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ ಕಡಿಮೆ ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ (ವಿಕಿರಣ ಶಕ್ತಿ ಅಥವಾ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಭಾವದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಗೆ ಪ್ರತಿರೋಧ) ಮತ್ತು ನಿಧಾನವಾದ ಪಕ್ವತೆಯ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು (ಅರ್ಧ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಡಿಸುವವರೆಗೆ) ಹೊಂದಿದೆ. ಎಮ್ಆರ್ಎಫ್ಪಿ1 ಅನ್ನು ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಮೊನೊಮರ್ ಆಗಿರುವುದರಿಂದ ಇದು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಅದರ ಕ್ವಾಂಟಮ್ ಇಳುವರಿ ಮತ್ತು ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವು ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ. ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ ಮತ್ತು ಎಂಆರ್ಎಫ್ಪಿ1 ಎರಡರಲ್ಲೂ ಎಂ ಚೆರ್ರಿ ಮತ್ತು ಇತರ ಎಂಫ್ರೂಟ್ಗಳು ಉತ್ತಮ ಹೊಳಪು ಮತ್ತು ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. ರಾಬರ್ಟ್ ಇ. ಕ್ಯಾಂಪ್ಬೆಲ್ ಅವರು ಎಮ್ಆರ್ಎಫ್ಪಿ1 ನಿಂದ ನಿರ್ದೇಶಿತ ವಿಕಾಸದ ಮೂಲಕ ಎಮ್ಚೆರಿಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದರು. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎಂಫ್ರೂಟ್ಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಯಿತು ಏಕೆಂದರೆ ಇತರ ಆಂಥೋಜೊವಾನ್ಗಳಿಂದ ವಿಭಿನ್ನ ಬಣ್ಣದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಬಹುದಾದರೂ, ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಟೆಟ್ರಾಮರ್ಗಳಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ನಂತೆಯೇ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಟೆಟ್ರಾಮರ್ಗಳಿಗೆ ಉಪಯುಕ್ತ ಸಮ್ಮಿಳನ ಪಾಲುದಾರರಾಗಲು ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ಗೆ ಮಾಡಿದಂತಹ ವ್ಯುತ್ಪತ್ತಿಗಳನ್ನು ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಪ್ರಚೋದನೆ ಮತ್ತು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯ ತರಂಗಾಂತರಗಳನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ ಪ್ರಮುಖ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಎಂ. ಎಫ್. ಪಿ. 1 ನಿಂದ ಎಂ. ಎಫ್. ಹಣ್ಣುಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು. ವಿವಿಧ ಬಣ್ಣಗಳು ವಿವಿಧ ಜೀವಕೋಶದ ಪ್ರಕಾರಗಳು, ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಲ್ಲಿನ ಸಮ್ಮಿಳನವನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತವೆ. ಎಮ್ ಚೆರ್ರಿ, ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಎಲ್ಲಾ ನಿಜವಾದ ಮೊನೊಮರ್ಗಳಲ್ಲಿ, ಅತಿ ಉದ್ದದ ತರಂಗಾಂತರಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಅತಿ ಹೆಚ್ಚು ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ, ವೇಗವಾದ ಪಕ್ವತೆ, ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಪಿಹೆಚ್ ಪ್ರತಿರೋಧವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಪ್ರಚೋದನೆ ಮತ್ತು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯ ಗರಿಷ್ಠತೆಯಲ್ಲಿ ಎಮ್ಆರ್ಎಫ್ಪಿ 1 ಗೆ ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, mCherry ಯು mRFP1 ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದ ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ರಚನೆ mCherry ಯ ಜೀನ್ 711bp ಉದ್ದವಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ 26.722 kDa ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಯೊಂದಿಗೆ 236 ಅವಶೇಷಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದೆ. ಎಮ್ಚೆರಿಯ ಸ್ಫಟಿಕದ ರಚನೆಯನ್ನು 2006ರಲ್ಲಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. ಇದು ಬೀಟಾ ಬ್ಯಾರೆಲ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುವ 3 ಆಲ್ಫಾ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ಮತ್ತು 13 ಬೀಟಾ ಶೀಟ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಎಂ ಚೆರ್ರಿಯಲ್ಲಿರುವ ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಮೆಥಿಯೋನಿನ್, ಟೈರೋಸಿನ್ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಸಿನ್ ಎಂಬ ಮೂರು ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದೆ, ಇವುಗಳನ್ನು ಅನುವಾದದ ನಂತರ ಇಮಿಡಾಜೋಲಿನೋನ್ ಆಗಿ ಮಾರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಈ ಅವಶೇಷಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಕ್ರಮವಾಗಿ 71,72 ಮತ್ತು 73 ಆಗಿವೆ. ವಿಸ್ತೃತ ಪೈ-ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಸಂಯೋಗವು mCherryಗೆ ಅದರ ಕೆಂಪು-ಬದಲಾದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಕೇಂದ್ರ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ನಿಂದ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಇದು 11-ಎಳೆಗಳ ಬೀಟಾ ಬ್ಯಾರೆಲ್ನಲ್ಲಿ ದ್ರಾವಕದಿಂದ ರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಈ ರಚನೆಯು ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ನ ತೃತೀಯ ರಚನೆಯನ್ನು ಬಹುತೇಕ ಹೋಲುತ್ತದೆ, ಇದು 11-ಎಳೆಗಳುಳ್ಳ ಬೀಟಾ ಬ್ಯಾರೆಲ್ ಅನ್ನು ಸಹ ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಜಿಎಫ್ಪಿಗಳ ತೃತೀಯ ರಚನೆಯನ್ನು ಹೋಲುತ್ತದೆ. ಇದು ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ನ ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಸುತ್ತಲಿನ ಪರಿಸರಕ್ಕಿಂತ ಎಮ್ಚೆರಿಯಲ್ಲಿನ ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಸುತ್ತಲಿನ ಪರಿಸರವನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. mCherryಯ ಕೊನೆಯ ತುದಿಗಳು GFP-ರೀತಿಯದ್ದಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಇದು GFPಯನ್ನು ಬಳಸಬಹುದಾದ ಮತ್ತು mRFP1ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದಾದ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಲ್ಲಿ ಇದನ್ನು ಅಳವಡಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಎಮ್ ಚೆರ್ರಿಯನ್ನು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಲ್ಲಿ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಶೋಧಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಒಂದು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗೆ ಸಮ್ಮಿಳನಗೊಳಿಸುವ ಮೂಲಕ ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಿದಾಗ, ಅವುಗಳ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳು ಗುರಿ ಅಥವಾ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಅನಪೇಕ್ಷಿತವಾಗಿ ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸಬಹುದು. ಸಾಂವಿಧಾನಿಕ ವಂಶವಾಹಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯು ಅಪೇಕ್ಷಿಸಿದಲ್ಲಿ mCherry ಮೌಲ್ಯಯುತವಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಇತರ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ವಿಧಾನಗಳಿಗೆ ಬಹು ವಂಶವಾಹಿಗಳ ಸಂಘಟಿತ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಇ. ಕೋಲಿ ಮತ್ತು ಇತರ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲು ಅನೇಕ ಸ್ಥಳಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದ್ದರೂ, ಅಂತಹ ತಂತ್ರಗಳ ಉಪಯುಕ್ತತೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯು ಯಾವಾಗಲೂ ಇತರ ಪ್ರಭೇದಗಳಿಗೆ ಭಾಷಾಂತರಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಗ್ರಾಮ್-ಋಣಾತ್ಮಕ ರೋಗಕಾರಕವಾದ ಲೀಜಿಯೋನಿಯೆಲ್ಲಾ ನ್ಯೂಮೋಫಿಲಾದಲ್ಲಿ, ಲೀಜಿಯೋನೈರೆಸ್ ರೋಗದ ವಾಹಕವಾದ ಪಿಟಿಎಸಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಸುಸ್ಥಾಪಿತ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ನಿಯಂತ್ರಣ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ. ಎಲ್. ನ್ಯೂಮೋಫಿಲಾದಲ್ಲಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಲಭ್ಯವಿರುವ ಸಾಧನಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ, mCherry ಅನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಯಿತು, ಇದು ಮ್ಯುಟಜೆನೈಸ್ಡ್ ಲ್ಯಾಸಿ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸೈಟ್ನಿಂದ ರಚನಾತ್ಮಕ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಚೆರ್ರಿ ಇತರ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಮಧ್ಯಪ್ರವೇಶಿಸುವುದಿಲ್ಲ, ಇದು ಅಖಂಡವಾದ ಲ್ಯಾಸಿಐ-ಪಿಟಿಎಸಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಅಥವಾ ಜೀವಕೋಶದೊಳಗಿನ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಲೀಜಿಯೋನೆಲ್ಲಾ ಪ್ರಭೇದಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಎಮ್ಚೆರಿಯ ವಿಶಾಲ-ಆತಿಥೇಯ ಶ್ರೇಣಿಯ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬು ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಗ್ರಾಮ್-ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರಭೇದಗಳಲ್ಲಿ ರಚನಾತ್ಮಕ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸಿತು, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಶೋಧನಾ ಸಮುದಾಯಕ್ಕೆ ಎಮ್ಚೆರಿಯನ್ನು ಉಪಯುಕ್ತ ಸಾಧನವನ್ನಾಗಿ ಮಾಡಿತು. ಇದನ್ನು ದೀರ್ಘ-ತರಂಗಾಂತರದ ಹೆಟೆರೊ-ಎಫ್ಆರ್ಇಟಿ (ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ರೆಸೋನೆಂಟ್ ಎನರ್ಜಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರ್) ಅಕ್ಸೆಪ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಹೋಮೋ-ಎಫ್ಆರ್ಇಟಿ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಪ್ರೋಬ್ ಆಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಎಫ್. ಆರ್. ಇ. ಟಿ. ಯು ಒಂದು ರೀತಿಯ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಶಕ್ತಿಯ ವರ್ಗಾವಣೆಯಾಗಿದ್ದು, ಅಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಮಧ್ಯಂತರ ಫೋಟಾನ್ ಇರುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ದಾನಿಗಳಿಂದ ಸ್ವೀಕರಿಸುವವರಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಜೊತೆಗೆ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾವನ್ನು ಪ್ರತಿಜೀವಕ ಒತ್ತಡವಿಲ್ಲದೆ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇತರ ಆರ್ಎಫ್ಪಿಗಳು ಮತ್ತು ಎಂಫ್ರೂಟ್ಗಳು ಮೂಲ ಆರ್ಎಫ್ಪಿಃ ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ ಮೊದಲ ತಲೆಮಾರಿನ ಆರ್ಎಫ್ಪಿಃ ಎಂಆರ್ಎಫ್ಪಿ1 ಎರಡನೇ ತಲೆಮಾರಿನ ಆರ್ಎಫ್ಪಿಗಳುಃ ಎಂಸ್ಟ್ರಾಬೆರಿ, ಮೊರಾಂಜ್, ಡಿ ಟೊಮ್ಯಾಟೋ ಎಂಫ್ರೂಟ್ ಎರಡನೇ ತಲೆಮಾರಿನ ಮೊನೊಮೆರಿಕ್ ರೆಡ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು (ಎಂಆರ್ಎಫ್ಪಿಗಳು) ಆಗಿದ್ದು ಅವು ಮೊದಲ ತಲೆಮಾರಿನ ಎಂಆರ್ಎಫ್ಪಿ1ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಸುಧಾರಿತ ಹೊಳಪು ಮತ್ತು ದ್ಯುತಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. ಅವುಗಳ ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಚೋದನೆಯ ತರಂಗಾಂತರಗಳು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಸುಮಾರು 550−650 ಮತ್ತು 540−590 ಎನ್ಎಂ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಹರಡಿಕೊಂಡಿವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅವುಗಳ ವರ್ಣಪಟಲದಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಕೆಲವು ಪ್ರಮುಖ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳಿಂದ ಗುರುತಿಸಬಹುದು. ಮೂರು ಪ್ರತಿನಿಧಿಗಳ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಕ್ ಮತ್ತು ಪರಮಾಣು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಸ್ಫಟಿಕಶಾಸ್ತ್ರದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು, mOರೇಂಜ್, mStrawberry ಮತ್ತು mCherry, ಪ್ರಚೋದನೆ ಮತ್ತು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯ ಗರಿಷ್ಠತೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲು ವಿಭಿನ್ನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತವೆ. ಎರಡನೇ ಉತ್ಕರ್ಷಣ ಹಂತವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ, ಪ್ರತಿ ಎಂಫ್ರೂಟ್ ಪಾಲಿಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬಿನಲ್ಲಿ ಅಸಿಲಿಮಿನ್ ಸಂಪರ್ಕವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಜೆನಿಟರ್ ಡಿಎಸ್ ರೆಡ್ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಈ ಸಂಪರ್ಕಕ್ಕೆ ನೇರ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಮಾರ್ಪಾಡು (mOರೇಂಜ್) ಮತ್ತು ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಪರಿಸರದ ಪರೋಕ್ಷ ಮಾರ್ಪಾಡು (mStrawberry ಮತ್ತು mCherry) ಬಲವಾದ ನೀಲಿ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು-ಸ್ಥಳಾಂತರಗೊಂಡ ರೂಪಾಂತರಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ. ಮೊರಾಂಜ್ನ ನೀಲಿ ಬದಲಾವಣೆಯು ಅದರ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬಿನ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಮಾರ್ಪಾಡಿನಿಂದ ಪ್ರೇರೇಪಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್-ಸಾಂದ್ರತೆಯ ನಕ್ಷೆಯು ಪಾಲಿಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬಿನೊಂದಿಗೆ Thr 66 Oγ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮೇಲೆ ಮೂರನೇ ಹೆಟೆರೊಸೈಕಲ್, 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿ-ಡೈಹೈಡ್ರೊಕ್ಸಜೋಲ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಕಾರ್ಬೊನಿಲ್ನ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು 65 ನೇ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಉಳಿದ ವರ್ಣತಂತುಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಎಮ್ಸ್ಟ್ರಾಬೆರಿ ಮತ್ತು ಎಮ್ಚೆರ್ರಿಯಲ್ಲಿ, ಆವೇಶದ ಲೈಸ್ 70 ರ ಚಲನೆ ಮತ್ತು ಗ್ಲು 215 ರ ಪ್ರೋಟೋನೇಶನ್ ಅನ್ನು ಕ್ರೋಮೋಫೋರ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್-ಸಾಂದ್ರತೆಯ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಮಾರ್ಪಡಿಸಲು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಅವುಗಳ ಸಿಗ್ನೇಚರ್ ಕೆಂಪು ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ವೀಡಿಯೊ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಲೇಖನಗಳು ಬಾಹ್ಯ ಕೊಂಡಿಗಳು ಎಫ್. ಪಿ. ಬೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಚೆರ್ರಿ, ಒಂದು ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದತ್ತಸಂಚಯ