Minusheet perfusion culture system
ಮಿನ್ಯುಶೀಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಅಡ್ರೆಂಟ್ ಕೋಶಗಳ ಸಂಯೋಜನೆಯೊಂದಿಗೆ ಸುಧಾರಿತ ಸೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಮತ್ತು ಆಯ್ದ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳು, ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕಗಳು ಮತ್ತು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಧಾರಕಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮಿನ್ಯುಶೀಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ತಾಂತ್ರಿಕ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯು ವಿಟ್ರೊ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಜೀವಿಗಳೊಳಗೆ ಕಂಡುಬರುವ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಹತ್ತಿರ ಹೋಲುವ ವಾತಾವರಣವನ್ನು ರಚಿಸುವ ಕಲ್ಪನೆಯಿಂದ ಪ್ರೇರೇಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಈ ಆವಿಷ್ಕಾರದ ಆಧಾರವು ಮೈನಶೀಟ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕಗಳಲ್ಲಿ ಅಳವಡಿಸಲಾಗಿರುವ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಜೀವಕೋಶದ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಗಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಉಸಿರಾಟದ ಅನಿಲ ಸೇರಿದಂತೆ ಯಾವಾಗಲೂ ತಾಜಾ ಪೋಷಣೆಯನ್ನು ನೀಡಲು ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ದ್ರವ ಪರಿಸರವನ್ನು ಅನುಕರಿಸಲು, ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಧಾರಕಗಳಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಬಹುದು. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಈ ನವೀನ ವಿಧಾನದಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರವಾದ ಗುಣಮಟ್ಟವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ವಿವಿಧ ಪ್ರಕಟಣೆಗಳು ವಿವರಿಸುತ್ತವೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಒಂದೆಡೆ ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಅನುವರ್ತಕ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಪೋಷಣೆ ಮತ್ತು ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುವ ಆಧಾರವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, ಮೈನಶೀಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಸ್ಥಿರ 24 ವೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಆಧುನಿಕ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ನಡುವಿನ ಕ್ರಮಬದ್ಧ ಅಂತರವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತಿದೆ. ಪುನರುತ್ಪಾದಕ ಔಷಧ, ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್, ನ್ಯಾನೊ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ, ಜೈವಿಕ ವಸ್ತು ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಹೊಸದಾಗಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಔಷಧಿಗಳ ಸುಧಾರಿತ ವಿಷತ್ವ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಉತ್ಪಾದನೆಯು ಕಲ್ಚರ್ನಲ್ಲಿ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ತುರ್ತಾಗಿ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಎತ್ತರಿಸಿದ ಅಂಗಾಂಶಗಳು ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬದಲಿಗೆ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ [1-4]. ಈ ಜೀವಕೋಶದ ಜೈವಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ನಂತರ ಉದ್ಭವಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಉಪಉತ್ತಮ ದ್ರವ ಪರಿಸರ ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳ ಮೇಲೆ ಸಣ್ಣ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯಿಂದಾಗಿ ಪಾತ್ರೆಯಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತವೆ. ಪೋಷಣೆ ಮತ್ತು ಉಸಿರಾಟದ ಅನಿಲದೊಂದಿಗೆ ಅನಿಯಂತ್ರಿತ ಪೂರೈಕೆ, ಮೆಟಾಬೋಲೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ಯಾರಾಕ್ರೈನ್ ಅಂಶಗಳ ಮಿತಿಮೀರಿದ ಅಥವಾ ರಿಯೋಲಾಜಿಕಲ್ ಒತ್ತಡದ ಕೊರತೆಯು ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಬಹುದು. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ, ಶಕ್ತಿಯುತವಾದ ಕಾರ್ಯತಂತ್ರವು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಹಾನಿಕಾರಕ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಹೊರಗಿಡಬೇಕು, ಆದರೆ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುವ ಅಂಶಗಳನ್ನು ತೀವ್ರಗೊಳಿಸಬೇಕು [5]. ಆಯ್ದ ಜೈವಿಕ ಪದಾರ್ಥಗಳು ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದೊಳಗೆ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತವೆ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಅಂಗಾಂಶದ ಬೆಳವಣಿಗೆಗೆ ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿರುವುದು ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಜೀವಕೋಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ಗೆ ಪರ್ಯಾಯವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ನಿರ್ಣಾಯಕ ಸಮಸ್ಯೆಯೆಂದರೆ, ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುವು ಪಕ್ವಗೊಳ್ಳುವ ಅಂಗಾಂಶದೊಳಗಿನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮೇಲೆ ಒಳ್ಳೆಯ ಮತ್ತು ಕೆಟ್ಟ ಅರ್ಥದಲ್ಲಿ ಪ್ರಭಾವ ಬೀರಬಹುದು. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಜೀವಕೋಶದ ಹೊರಗಿನ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್, ಹೊಸದಾಗಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಪಾಲಿಮರ್ಗಳು, ಜೈವಿಕ ವಿಘಟನೀಯ ಸ್ಕ್ಯಾಫೋಲ್ಡ್ಗಳು, ಸೆರಾಮಿಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಲೋಹದ ಮಿಶ್ರಲೋಹಗಳ ಸೂಕ್ತತೆಯನ್ನು ಊಹಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ ಆದರೆ ಅದನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕು. ಜೀವಕೋಶದ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಸಂವಹನದ ಮೇಲೆ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಪ್ರಭಾವ ಬೀರುವ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸಲು, ತಾಂತ್ರಿಕ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯು ಮೈನಶೀಟ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ. 1). ಈ ಉಪಕರಣದ ಸಹಾಯದಿಂದ ಜೀವಕೋಶದ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಆಯ್ದ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳೊಂದಿಗೆ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು. ಈ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಮೊದಲು ಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಮಾಡಬಹುದು (ಚಿತ್ರ. 2) ಮತ್ತು ನಂತರ ಡೈನಾಮಿಕ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ (ಚಿತ್ರ. 3) ಸಾಂಸ್ಕೃತಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು [6]. ಎರಡೂ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಮಿನ್ಯುಶೀಟ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವು ಹಾನಿಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಪ್ರಯೋಗದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಥವಾ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ 24 ವೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ಲೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗಲು ಆಯ್ದ ಜೈವಿಕ ಪದಾರ್ಥವನ್ನು 13 ಮಿಮೀ ವ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ಪಂಚ್ ಮಾಡಬೇಕು. ಈ ಸ್ವರೂಪದಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ವಸ್ತುಗಳು ವಾಣಿಜ್ಯಿಕವಾಗಿಯೂ ಲಭ್ಯವಿವೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಶೋಧಕಗಳು, ಫಾಯಿಲ್ಗಳು, ಬಲೆಗಳು, ಉಣ್ಣೆ ಮತ್ತು ಸ್ಕ್ಯಾಫೋಲ್ಡ್ಗಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು (ಚಿತ್ರ. 1ಎ). ಸುಲಭವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಮತ್ತು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹಾನಿಯನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟಲು ಆಯ್ದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಮೈನಶೀಟ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದ ತಳ ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ. 1ಬಿ). ಒತ್ತಡದ ಉಂಗುರವನ್ನು ಒತ್ತಿದಾಗ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುವನ್ನು ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಇಡಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ. 1 ಸಿ). ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿದ ನಂತರ ಅದನ್ನು ಚೀಲದಲ್ಲಿ ಸುತ್ತಿ ಕ್ರಿಮಿನಾಶಕ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂಗಾಂಶದ ವಾಹಕದ ಮೇಲೆ ಜೀವಕೋಶದ ಬೀಜ ಬಿತ್ತನೆಯು ಜೀವಕೋಶದ ಬೀಜ ಬಿತ್ತನೆಗೆ ಆರೋಹಿತವಾದ ಅಂಗಾಂಶದ ವಾಹಕವನ್ನು 24 ಬಾವಿಗಳ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ಲೇಟ್ನಲ್ಲಿ ಫೋರ್ಸ್ಪ್ಸ್ ಮೂಲಕ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ. 2). ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಮೇಲೆ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲು ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಒಂದು ಮಟ್ಟಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಆಯ್ದ ಜೈವಿಕ ಪದಾರ್ಥವು ಕೇವಲ ಒದ್ದೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಕೋಶಗಳ ಅಲಿಕೋಟ್ ಅನ್ನು ಪೈಪೆಟ್ ಮೂಲಕ ಆರೋಹಿತವಾದ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಬಿತ್ತುವ ಮೂಲಕ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಶಿಷ್ಟಾಚಾರವನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಬಹುದು. ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವನ್ನು ತಿರುಗಿಸಿದಾಗ, ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಇನ್ನೊಂದು ಬದಿಯಲ್ಲಿ ಬಿತ್ತಬಹುದು, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಜೀವಕೋಶ ಪ್ರಕಾರಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಹ-ಕೃಷಿ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ಸಾಧ್ಯ. ಒಂದೇ ಜೀವಕೋಶ ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ ಅಂಗಾಂಶದ ತೆಳುವಾದ ತುಂಡನ್ನು ನೇಯ್ದ ಬಲೆಯ ಎರಡು ತುಂಡುಗಳ ನಡುವೆ ಮೈನಶೀಟ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದೊಳಗೆ ಜೋಡಿಸಬಹುದು. ಕಾಲಜನ್ ಹಾಳೆಗಳಂತಹ ಮತ್ತಷ್ಟು ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುವ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಡ್ರಮ್ನ ಚರ್ಮದಂತಹ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಪ್ಯಾರೆಂಚೈಮಾ ಬೆಳವಣಿಗೆಗೆ [5,6,8] ಕೃತಕ ಮಧ್ಯಂತರವಾಗಿ ಪಾಲಿಯೆಸ್ಟರ್ ಉಣ್ಣೆಯನ್ನು ಅಳವಡಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕೊನೆಯದಾಗಿ ಆದರೆ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಕ್ಕೂ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದೊಳಗೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾದ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಪರಿಸರವನ್ನು ರಚಿಸಬಹುದು ಎಂಬುದು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿದೆ. ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣ ಧಾರಕಗಳು 24 ಬಾವಿ ಸಂವರ್ಧನ ಫಲಕದೊಳಗಿನ ಸ್ಥಿರ ಪರಿಸರವು ಪೋಷಣೆ ಮತ್ತು ಹಾರ್ಮೋನುಗಳ ಇಳಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಮೆಟಾಬೋಲೈಟ್ಗಳ ಅನಿಯಂತ್ರಿತ ಹೆಚ್ಚಳ ಮತ್ತು ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ಯಾರಾಕ್ರೈನ್ ಅಂಶಗಳ ಮಿತಿಮೀರಿದ ಶಾಖಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಕಾರಣಗಳಿಂದಾಗಿ 24 ವೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ಲೇಟ್ನಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶದ ಬೀಜ ಬಿತ್ತನೆಯ ಅಲ್ಪಾವಧಿಗೆ ಮಾತ್ರ ಅಂಟಿಕೊಂಡಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಿನ್ಯುಶೀಟ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಜೀವಕೋಶಗಳ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ನಂತರ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವನ್ನು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ದ್ರವ ಪರಿಸರವನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣ ಧಾರಕಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ವೈಯಕ್ತಿಕ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸಲು ವಿವಿಧ ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಧಾರಕಗಳನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ. 3). ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಸುಗಂಧ ದ್ರವ್ಯ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಧಾರಕಗಳು ಕನಿಷ್ಠ ಒಂದು ಒಳಹರಿವು ಮತ್ತು ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಮಾಧ್ಯಮದ ಸಾಗಣೆಗೆ ಒಂದು ಹೊರಹರಿವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಧಾರಕದ ಮೂಲ ಆವೃತ್ತಿಯು ನಿರಂತರ ಮಧ್ಯಮ ಸಾರಿಗೆಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಬೆಳೆಯುವ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಸರಳ ಸ್ನಾನಕ್ಕೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ. 4ಎ). ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಧಾರಕದಲ್ಲಿ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕವನ್ನು ತಳ ಮತ್ತು ಮುಚ್ಚಳದ ನಡುವೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಎರಡೂ ಬದಿಗಳಿಗೆ ಎಪಿಥೀಲಿಯಾದ ವಿಶಿಷ್ಟ ವಾತಾವರಣವನ್ನು ಅನುಕರಿಸುವ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಒದಗಿಸಬಹುದು (ಚಿತ್ರ. 4ಬಿ). ಅಂಗಾಂಶದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ವೀಕ್ಷಣೆಗೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುವ ಪಾರದರ್ಶಕ ಮುಚ್ಚಳ ಮತ್ತು ತಳದಿಂದ ಮತ್ತಷ್ಟು ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಧಾರಕವನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ. 4 ಸಿ). ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಧಾರಕವು ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುವ ಸಿಲಿಕೋನ್ ಮುಚ್ಚಳವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ. ವಿಲಕ್ಷಣ ರೋಟರ್ನಿಂದ ಈ ಮುಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಬಲವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸುವುದು ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಮತ್ತು ಮೂಳೆ ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ನಲ್ಲಿ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಹೊರೆಗಳನ್ನು ಅನುಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಕಣಜ ಅಥವಾ ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ನಂತಹ ಆಕಾರದ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಧಾರಕದಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಸ್ಕ್ಯಾಫೋಲ್ಡ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಮೂತ್ರಪಿಂಡದ ಕಾಂಡ/ಪ್ರೊಜೆನಿಟರ್ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಪಡೆದ ಕೊಳವೆಗಳ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ವಿಸ್ತರಣೆಯನ್ನು ಪಾಲಿಸ್ಟರ್ ಉಣ್ಣೆಯಿಂದ ಮಾಡಿದ ಕೃತಕ ಇಂಟರ್ಸ್ಟಿಟಿಯಂನಿಂದ ತುಂಬಿದ ಸುಗಂಧ ಧಾರಕದಲ್ಲಿ ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಈ ಎಲ್ಲಾ ಧಾರಕಗಳನ್ನು ವಿಶೇಷ ಪಾಲಿಕಾರ್ಬೊನೇಟ್ನಿಂದ (ಮ್ಯಾಕ್ರೋಲಾನ್®) ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಅವೆಲ್ಲವನ್ನೂ ಅನೇಕ ಬಳಕೆಗಳಿಗಾಗಿ ಆಟೋಕ್ಲೇವ್ ಮಾಡಬಹುದು. ಪೆರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆ ಪೆರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಕಂಟೇನರ್ನೊಳಗೆ 37 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ನ ಅಗತ್ಯ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು, ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ತಾಪನ ಫಲಕ (ಮೆಡಾಕ್ಸ್-ನಾಗೆಲ್, ಕೀಲ್, ಜರ್ಮನಿ) ಮತ್ತು ಕವರ್ ಮುಚ್ಚಳವನ್ನು (ತೋರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ) ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ. 5, 7). ನಿಧಾನವಾಗಿ ತಿರುಗುವ ಪೆರಿಸ್ಟಾಲ್ಟಿಕ್ ಪಂಪ್ (ಐ. ಎಸ್. ಎಂ. ಎ. ಟಿ. ಇ. ಸಿ, ಐ. ಪಿ. ಸಿ. ಎನ್8, ವೆರ್ಥೀಮ್, ಜರ್ಮನಿ) ಬಳಸಿ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾಧ್ಯಮದ ಸಾಗಣೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಪ್ರತಿ ಗಂಟೆಗೆ 0.1 ಮತ್ತು 5 ಎಂಎಲ್ ನಡುವೆ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಮತ್ತು ನಿಖರವಾದ ಪಂಪ್ ದರಗಳನ್ನು ತಲುಪಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಶೇಖರಣಾ ಬಾಟಲಿಯಿಂದ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಧಾರಕ ಮಾಧ್ಯಮದ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುವಾಗ, ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಆರೋಹಿತವಾದ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಸಾಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಕಂಟೇನರ್ನೊಳಗೆ ಅಂಗಾಂಶ ವಾಹಕದ ನಿಖರವಾದ ಜ್ಯಾಮಿತೀಯ ನಿಯೋಜನೆಯು ಎಲ್ಲಾ ಕಡೆಗಳಿಂದ ಯಾವಾಗಲೂ ತಾಜಾ ಪೋಷಣೆ ಮತ್ತು ಉಸಿರಾಟದ ಅನಿಲದೊಂದಿಗೆ ಮಧ್ಯಮ ಪೂರೈಕೆಯ ಸಾಗಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಖಾತರಿ ನೀಡುತ್ತದೆ. ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಇದು ಚಯಾಪಚಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ದೈಹಿಕವಲ್ಲದ ಶೇಖರಣೆ ಮತ್ತು ಪ್ಯಾರಾಕ್ರೈನ್ ಅಂಶಗಳ ಮಿತಿಮೀರಿದ ಹರಡುವಿಕೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಇಡೀ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಅವಧಿಯವರೆಗೆ ಈ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಪರಿಸರವನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು, ಚಯಾಪಚಯ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ತ್ಯಾಜ್ಯ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಮರುಪರಿಚಲನೆ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ pHನ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಜೀವಕೋಶ ಸಂವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು CO2 ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತಹ ವಾತಾವರಣದಲ್ಲಿ ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಸಹ ಮಾಡಬಹುದು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಮೇಜಿನ ಮೇಲೆ ವಾತಾವರಣದ ಗಾಳಿಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯು ಉತ್ತಮ ಪರಿಹಾರವಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಸಂಪೂರ್ಣ ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ಸುಗಮಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ವಾತಾವರಣದ ಗಾಳಿಗೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಶೇಖಡ 5ರಷ್ಟು ಇಂಗಾಲದ ಡೈಆಕ್ಸೈಡ್ ವಾತಾವರಣದಲ್ಲಿ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್ ಒಳಗೆ ಇಟ್ಟುಕೊಳ್ಳುವುದರಿಂದ ಯಾವಾಗಲೂ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ NaHCO3 ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಇದು 7.7 ಮತ್ತು 7.4 ರ ನಡುವೆ ಸ್ಥಿರವಾದ pH ಅನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಅಂತಹ ಸೂತ್ರೀಕರಿಸಿದ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು CO2 ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್ನ ಹೊರಗೆ ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣೆಗಾಗಿ ಬಳಸಿದರೆ, ವಾತಾವರಣದ ಗಾಳಿಯಲ್ಲಿ CO2 (0.3%) ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿರುವುದರಿಂದ pH ದೈಹಿಕ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಿಂದ ಹೆಚ್ಚು ಕ್ಷಾರೀಯ ಮೌಲ್ಯಗಳಿಗೆ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆ ಕಾರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಇಂಗಾಲದ ಡೈಆಕ್ಸೈಡ್ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್ನ ಹೊರಗಿನ ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣೆಗೆ ಬಳಸುವ ಯಾವುದೇ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು NaHCO3 ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಮತ್ತು/ಅಥವಾ HEPES (GIBCO/Invitrogen, Karlsruhe, German) ಅಥವಾ ಬಫರ್ ಆಲ್ (ಸಿಗ್ಮಾ-ಆಲ್ಡ್ರಿಚ್-ಚೆಮೀ, ಮುನ್ಚೆನ್, ಜರ್ಮನಿ) ನಂತಹ ಜೈವಿಕ ಬಫರ್ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಜೈವಿಕ ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಮಾಧ್ಯಮದ ಅಲಿಕೋಟ್ಗೆ ಬೆರೆಸುವ ಮೂಲಕ ಅಗತ್ಯ ಮೊತ್ತವನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ನಿರ್ಧರಿಸಬಹುದು. ನಂತರ ಮಾಧ್ಯಮವು ವಾತಾವರಣದ ಗಾಳಿಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ 37 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಥರ್ಮೋ ಪ್ಲೇಟ್ನಲ್ಲಿ ರಾತ್ರಿಯಿಡೀ ಸಮತೋಲನಗೊಳ್ಳಬೇಕು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 50 ಎಂಎಂಒಎಲ್/ಎಲ್ ಹೆಪ್ಗಳ ಅನ್ವಯ ಅಥವಾ ಬಫರ್ ಆಲ್ಗೆ ಸಮಾನವಾದ (ಸಿಎ. ಐ. ಎಂ. ಡಿ. ಎಂ. ಗೆ (ಇಸ್ಕೋವ್ಸ್ ಮೋಡಿಫೈಡ್ ಡುಲ್ಬೆಕ್ಕೊಸ್ ಮೀಡಿಯಂ, ಜಿಐಬಿಸಿಒ/ಇನ್ವಿಟ್ರೋಜೆನ್) ಶೇಕಡಾ 1ರಷ್ಟು) ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ಮೇಜಿನ ಮೇಲೆ ವಾತಾವರಣದ ಗಾಳಿಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ 7.4ರ ಸ್ಥಿರ ಪಿಹೆಚ್ ಅನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಲಭ್ಯತೆ ಐ. ಎಂ. ಡಿ. ಎಂ. ನಂತಹ ಆಯ್ದ ಮಾಧ್ಯಮವಾದ O2ನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತ್ವವನ್ನು ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ಪಡೆಯಲು ಅನಿಲ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯ ಸಿಲಿಕೋನ್ ಕೊಳವೆಯ ಮೂಲಕ ಸಾಗಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಸಿಲಿಕಾನ್ ಕೊಳವೆಯ ಬಳಕೆಯು ತೆಳುವಾದ ಗೋಡೆ (1 ಮಿ. ಮೀ.), ಸಣ್ಣ ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ (1 ಮಿ. ಮೀ.) ಮತ್ತು ಅದರ ವಿಸ್ತರಿತ ಉದ್ದ (1 ಮೀ.) ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ಪ್ರಸರಣದ ಮೂಲಕ ಅನಿಲ ವಿನಿಮಯಕ್ಕೆ ದೊಡ್ಡ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವಾತಾವರಣದ ಗಾಳಿಯ ವಿರುದ್ಧ ಸಮತೋಲನಗೊಳಿಸಲಾದ ಐಎಮ್ಡಿಎಂ (3024 ಮಿಗ್ರಾಂ/ಎಲ್ ಎನ್ಎಚ್ಸಿಒ3,50 ಎಂಎಂಒಎಲ್/ಎಲ್ ಎಚ್ಇಪಿಇಎಸ್) ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಕನಿಷ್ಠ 160 ಎಂಎಂಹೆಚ್ಜಿ ಒ2 [7] ನ ಸ್ಥಿರ ಭಾಗಶಃ ಒತ್ತಡವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಆಮ್ಲಜನಕದ ಅಂಶದ ಸಮನ್ವಯವು ಬೆಳೆಯುತ್ತಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಅಂಶವನ್ನು ವೈಯಕ್ತಿಕ ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಅಳವಡಿಸಿಕೊಳ್ಳುವುದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ. ಅನಿಲದ ಒಳಹರಿವು ಮತ್ತು ಹೊರಹರಿವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಅನಿಲ ವಿನಿಮಯ ಘಟಕವು ತಾಂತ್ರಿಕ ಪರಿಹಾರವಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ. 6ಎ). ಮುಂದೆ, ಮಧ್ಯಮ ಸಾರಿಗೆಗಾಗಿ ಉದ್ದವಾದ ತೆಳುವಾದ ಗೋಡೆಯ ಸಿಲಿಕಾನ್ ಟ್ಯೂಬ್ನೊಂದಿಗೆ ಸುರುಳಿಯನ್ನು ಮಾಡ್ಯೂಲ್ನೊಳಗೆ ಅಳವಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಟ್ಯೂಬ್ ಹೆಚ್ಚು ಅನಿಲ-ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಇದು ಅನಿಲ ವಿನಿಮಯ ಮಾಡ್ಯೂಲ್ನ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಧ್ಯಮ ಮತ್ತು ಆಂತರಿಕ ವಾತಾವರಣದ ನಡುವೆ ಅನಿಲಗಳ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಪ್ರಸರಣವನ್ನು ಖಾತರಿಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಮಾಡ್ಯೂಲ್ ಮೂಲಕ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅನಿಲ ಮಿಶ್ರಣದ ನಿರಂತರ ಹರಿವಿನಿಂದ ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಅನಿಲ ವಾತಾವರಣವನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು. ಈ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಆಮ್ಲಜನಕ ಅಥವಾ ಯಾವುದೇ ಇತರ ಅನಿಲಗಳ ಅಂಶವನ್ನು ಪ್ರಸರಣದ ಮೂಲಕ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಸಮನ್ವಯಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಈ ಸರಳ ಶಿಷ್ಟಾಚಾರವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸುವುದರಿಂದ ಸಾಗಣೆ ಮಾಧ್ಯಮದೊಳಗಿನ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಭಾಗಶಃ ಒತ್ತಡವನ್ನು ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಕ್ರಿಮಿನಾಶಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು [7]. ಹಾನಿಕಾರಕ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ನಿರ್ಮೂಲನೆ ಮಾಡುವುದು ಸುಗಂಧ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಮಾಡುತ್ತಾ, ಕಲ್ಚರ್ ಮಾಧ್ಯಮದ ನಿಧಾನಗತಿಯ ಸಾಗಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತಿವೆ ಎಂದು ಯಾವಾಗಲೂ ಪರಿಗಣಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಶೇಖರಣಾ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಕೊಳವೆಯೊಳಗೆ ಸಾಗಿಸುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಧಾರಕದೊಳಗೆ ವಿತರಿಸುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ತ್ಯಾಜ್ಯ ಬಾಟಲಿಗೆ ಹೋಗುವ ದಾರಿಯಲ್ಲಿ ಹೊರಹಾಕುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅವು ಉದ್ಭವಿಸುತ್ತವೆ. ಅಜ್ಞಾತ ಕಾರಣಗಳಿಂದಾಗಿ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಕನೆಕ್ಟರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸುಗಂಧ ಧಾರಕಗಳ ನಡುವಿನ ವಸ್ತು ಪರಿವರ್ತನೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹವಾಗುತ್ತವೆ. ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ ಈ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ಎಷ್ಟು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿವೆಯೆಂದರೆ ಅವುಗಳನ್ನು ಮಾನವನ ಕಣ್ಣಿನಿಂದ ನೋಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾಧ್ಯಮದ ನಿರಂತರ ಸಾಗಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅವು ಗಾತ್ರದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಮಧ್ಯಮ ಹರಿವನ್ನು ಬೃಹತ್ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ತಡೆಯುವ ಎಂಬೋಲಸ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಸಮರ್ಥವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಒಂದು ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಧಾರಕದೊಳಗೆ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ಮಧ್ಯಮ ಪೂರೈಕೆಯ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಕೊರತೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತಿವೆ ಮತ್ತು ದ್ರವದ ನಿರಂತರತೆಯಲ್ಲಿ ವಿರಾಮಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತಿವೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಬೃಹತ್ ದ್ರವದ ಒತ್ತಡವು ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಕಂಟೇನರ್ನಲ್ಲಿ, ಎರಡು ಮಾಧ್ಯಮಗಳನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಒಂದೇ ವೇಗದಲ್ಲಿ ಸಾಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಎಂಬೋಲಿಕ್ ಪರಿಣಾಮಗಳು ಒತ್ತಡದ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಮತ್ತು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ತಡೆಗೋಡೆಯನ್ನು [5,9] ನಾಶಪಡಿಸಬಹುದು. ಪೆರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗದೊಳಗೆ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು, ಅನಿಲ ಎಕ್ಸ್ಪ್ಯಾಂಡರ್ ಮಾಡ್ಯೂಲ್ ಅನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ. 6ಬಿ). ಈ ಘಟಕವು ಸಾಗಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮಾಧ್ಯಮದಿಂದ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ. ಮಾಧ್ಯಮವು ಅನಿಲ ವಿಸ್ತರಣಾ ಘಟಕವನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸುವಾಗ, ಅದು ಸಣ್ಣ ಜಲಾಶಯದೊಳಗೆ ಏರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ತಡೆಗೋಡೆಗೆ ಬೀಳುವ ಮೊದಲು ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ಅನಿಲ ಎಕ್ಸ್ಪ್ಯಾಂಡರ್ ಮಾಡ್ಯೂಲ್ನ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿರುವ ಮಾಧ್ಯಮದಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಧಾರಕದಿಂದ ಹೊರಡುವ ಮಾಧ್ಯಮವು ಆಮ್ಲಜನಕ-ಸ್ಯಾಚುರೇಟೆಡ್ ಆದರೆ ಅನಿಲ ಗುಳ್ಳೆಗಳಿಂದ ಮುಕ್ತವಾಗಿದೆ [8,9]. ಅನ್ವಯಗಳ ವಿಶಾಲ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯು ಕಳೆದ ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ ಮೈನಶೀಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ನೊಂದಿಗೆ ವ್ಯವಹರಿಸುವ ಹಲವಾರು ಪ್ರಬಂಧಗಳನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸಲಾಯಿತು. ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್, ಜೈವಿಕ ವಸ್ತು ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಸುಧಾರಿತ ಔಷಧೀಯ ಔಷಧ ವಿಷತ್ವ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಜೀವಕೋಶದ ಜೈವಿಕ ಗುಣಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಮಾಡ್ಯುಲರ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ವಿಶಾಲ ವರ್ಣಪಟಲವು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ಗಳ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪಟ್ಟಿಯು 'ಪ್ರೊಸೀಡಿಂಗ್ಸ್ ಇನ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್' ಎಂಬ ದತ್ತಾಂಶ ಬ್ಯಾಂಕಿನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ ('ಬಾಹ್ಯ ಕೊಂಡಿಗಳು' ನೋಡಿ). ಹಲವಾರು ಪೇಟೆಂಟ್ಗಳು (ಡಿಇ 39 23 279, ಡಿಇ 42 00 446, ಡಿಇ 42 08 805, ಡಿಇ 44 43 902, ಡಿಇ 19530 556, ಡಿಇ 196 48 876 ಸಿ2, ಡಿಇ 199 52 847 ಬಿ4, ಯುಎಸ್ 5 190 878, ಯುಎಸ್ 5 316 945, ಯುಎಸ್ 5 665 599, ಜೆ 2847669, ಡಿಇ 10 2005,002 938, ಪಿಎ 10 2004 054 125.6, ಪಿಎ 10 2005 001 747.9, ಪೇಟೆಂಟ್ಗಳು ಬಾಕಿ ಉಳಿದಿವೆ) ವಿಲ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಮಿನುತ್ ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಿದ ಮಿನಿಶೀಟ್ ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದ್ದಾರೆ. ಕಳೆದ ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ ಲೂಸಿಯಾ ಡೆಂಕ್ ಮತ್ತು ವಿಲ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಮಿನುತ್ ಅವರು ಮಿನೂಶೀಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಹಲವಾರು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸಿದರು. ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವು ಪ್ರಸ್ತುತ ಗಾಯಗೊಂಡ ಮೂತ್ರಪಿಂಡದ ಪ್ಯಾರೆಂಚೈಮಾವನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಲು ಕೃತಕ ಪಾಲಿಯೆಸ್ಟರ್ ಇಂಟರ್ಸ್ಟಿಟಿಯಂನ ರಚನೆಯ ಮೇಲೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದೆ. 1992ರಲ್ಲಿ ಮಿನಿಶೀಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಜರ್ಮನಿಯ ಮ್ಯೂನಿಚ್ನಲ್ಲಿ 'ಚಾಲೆಂಜ್ ಆಫ್ ದಿ ಫ್ಯೂಚರ್' ಎಂಬ ಫಿಲಿಪ್ ಮೋರಿಸ್ ಸಂಶೋಧನಾ ಪ್ರಶಸ್ತಿಯನ್ನು ಪಡೆಯಿತು. ಹೆನ್ರಿ ಕಿಸಿಂಜರ್, ಹ್ಯಾನ್ಸ್ ಜೋಚಿಮ್ ಫ್ರೆಡ್ರಿಕ್ ಮತ್ತು ಪಾಲ್ ಮುಲ್ಲರ್ ಅವರು ಪ್ರಶಸ್ತಿಯನ್ನು ವಿತರಿಸಿದರು. ಮಾರುಕಟ್ಟೆಯಲ್ಲಿ ಮಿನ್ಯುಶೀಟ್ ಸುಗಂಧ ದ್ರವ್ಯ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸಲು, ಕ್ಯಾಥರಿನಾ ಲೊರೆನ್ಜ್-ಮಿನುತ್ ಲಾಭರಹಿತ ಆಧಾರಿತ ಮಿನ್ಯುಸೆಲ್ಸ್ ಮತ್ತು ಮಿನುಟಿಸ್ಯೂ ವೆರ್ಟ್ರೀಬ್ಸ್ ಜಿಎಂಬಿಹೆಚ್ (ಡಿ-93077 ಬ್ಯಾಡ್ ಅಬಾಚ್/ಜರ್ಮನಿ) ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಿದರು. ಬಾಹ್ಯ ಕೊಂಡಿಗಳು ಪ್ರೊಸೀಡಿಂಗ್ಸ್ ಇನ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ ಫಿಲಿಪ್ ಮೋರಿಸ್ ಸ್ಟಿಫ್ಟಂಗ್ ಮೈನಸ್ಶೀಟ್ಸ್ ಜಾಲತಾಣದ ಉಲ್ಲೇಖಗಳು 1. ಎಲಾಟ್ ಜಿ, ಹೆಂಕೆನ್ಸ್ ಟಿ, ಪಾಪೇಲು ಪಿ, ಸ್ನೈಕರ್ಸ್ ಎಸ್, ವಿಂಕೆನ್ ಎಂ, ವನ್ಹೆಕೆ ಟಿ, ರೋಜಿಯರ್ಸ್ ವಿ (2006) ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾದ ಹೆಪಟೋಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ಆಣ್ವಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು. ಕರ್ರ್ ಡ್ರಗ್ ಮೆಟಾಬ್ 7 (6): 629-60. 2. ಶುಹ್ ಇ, ಹಾಫ್ಮನ್ ಎಸ್, ಸ್ಟೋಕ್ ಕೆ, ನೋಟ್ಬೋಮ್ ಎಚ್, ಮುಲ್ಲರ್ ಆರ್, ರೋಟರ್ ಎನ್ (2011) 3ಡಿ ಯಲ್ಲಿ ಕೊಂಡ್ರೊಸೈಟ್ ರಿಡಿಫೆರೆನ್ಶಿಯೇಷನ್ಃ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ತಾಣದ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ತಲಾಧಾರದ ಸ್ಥಿತಿಸ್ಥಾಪಕತ್ವದ ಪರಿಣಾಮ. ಜೆ ಬಯೋಮೆಡ್ ಮೇಟರ್ ರೆಸ್ ಎಃ ಡಿಒಐ 10.1002/jbm.a.33226. 3. ಜಾಂಗ್ ವೈ, ಲಿ ಟಿಎಸ್, ಲೀ ಎಸ್ಟಿ, ವಾವ್ರೋವ್ಸ್ಕಿ ಕೆಎ, ಚೆಂಗ್ ಕೆ, ಗಲಾಂಗ್ ಜಿ, ಮಲ್ಲಿಯಾರಾಸ್ ಕೆ, ಅಬ್ರಹಾಂ ಎಂಆರ್, ವಾಂಗ್ ಸಿ, ಮಾರ್ಬನ್ ಇ (2010) ಸಸ್ತನಿ ಕ್ಯಾಡಿಯೋಮಯೋಸೈಟ್ಗಳ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಪ್ರಸರಣ 2010 ಪ್ಲೋಸ್ ಒನ್ 5 (9): ಇ12559. 4. ಲಿಯು ವೈ, ಜಿಯಾಂಗ್ ಎಕ್ಸ್, ಯು ಎಂಕೆ, ಡಾಂಗ್ ಜೆ, ಜಾಂಗ್ ಎಕ್ಸ್, ತ್ಸಾಂಗ್ ಎಲ್ಎಲ್, ಚುಂಗ್ ವೈಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಲಿ ಟಿ, ಚಾನ್ ಎಚ್ಸಿ (2010) ಮೂಳೆ ಮಜ್ಜೆಯಿಂದ ಪಡೆದ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳಿಂದ ಡಿಡಿಫೆರೆನ್ಶಿಯೇಷನ್ ಮತ್ತು ಟ್ರಾನ್ಸ್ಲೀನೇಜ್ ರಿಡಿಫೆರೆನ್ಶಿಯೇಷನ್ ಮೂಲಕ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಕೋಶಗಳಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸುವುದು. ಸೆಲ್ ಬಯೋಲ್ ಇಂಟ 34 (11): 1075-83. 5ರಷ್ಟಿದೆ. ಮಿನುತ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂಡಬ್ಲ್ಯೂ ಮತ್ತು ಡೆಂಕ್ ಎಲ್ 2011 ಅಡ್ರೆಂಟ್ ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಅಡ್ವಾನ್ಸ್ಡ್ ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳು. ಸುಗಂಧ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯಲ್ಲಿ ಏಕ ಕೋಶಗಳಿಂದ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳವರೆಗೆ. ಐಎಸ್ಬಿಎನ್ ಎನ್. ಆರ್. 978-3-88246-330-9, http://epub.uni-regensburg.de/21484 6. ಮಿನುತ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಡೆಂಕ್ ಎಲ್, ಗ್ಲಾಶೌಸರ್ ಎ 2010 ಅನೇಕ ವಿಶೇಷ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಒಂದು ಮಾಡ್ಯುಲರ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆ. ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳು 31:2945-2954. 7. ಸ್ಟ್ರೆಹ್ಲ್ ಆರ್, ಷೂಮೇಕರ್ ಕೆ, ಮಿನುತ್ ಡಬ್ಲ್ಯುಡಬ್ಲ್ಯು 2004 ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಭ್ರೂಣದ ಮೂತ್ರಪಿಂಡದ ಎಕ್ಸ್ಪ್ಲಾಂಟ್ಗಳಿಗೆ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಉಸಿರಾಟದ ಅನಿಲ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಿತು. ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಗ್ 10 (7-8): 1196-203. 8. ಮಿನುತ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಸ್ಟ್ರೆಲ್ ಆರ್, ಷೂಮೇಕರ್ ಕೆ 2004 ಟಿಶ್ಯೂ ಫ್ಯಾಕ್ಟರಿಃ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಪೀಳಿಗೆಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗಾಗಿ ಮಾಡ್ಯುಲರ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ನ ಪರಿಕಲ್ಪನಾ ವಿನ್ಯಾಸ. ಟಿಶ್ಯೂ ಎಂಗ್ 10:285-294. 9ರಷ್ಟಿದೆ. ಮಿನುತ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಡೆಂಕ್ ಎಲ್, ರೋಸ್ಗರ್ ಎ 2009 ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಕಲ್ಚರ್-ಬಯೋಮೆಡಿಸಿನ್ನಲ್ಲಿ ಎಪಿಥೀಲಿಯಾಗಾಗಿ ಅಂಗಾಂಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಸರವನ್ನು ಅನುಕರಿಸುವುದು. ಜೆ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಬಯಾಲಜಿ & ಫಾರ್ಮಕಾಲಜಿ 2:1-13. ಬಯೋಮೆಟೀರಿಯಲ್ಸ್ ಬಯೋಮೆಡಿಸಿನ್ ಸೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಮಾಲಿಕ್ಯುಲರ್ ಬಯಾಲಜಿ ತಂತ್ರಗಳು