Αr14 RNA
αr14 ಎಂಬುದು α-ಪ್ರೋಟಿಯೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ವಿಶಾಲ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿನಿಧಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಸಣ್ಣ ನಾನ್-ಕೋಡಿಂಗ್ ಆರ್ಎನ್ಎಗಳ ಒಂದು ಕುಟುಂಬವಾಗಿದೆ. ಈ ಕುಟುಂಬದ ಮೊದಲ ಸದಸ್ಯ (ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಸಿ2) ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ (ಸಿ) ನಲ್ಲಿರುವ ಸಿನೋರ್ಹಿಝೋಬಿಯಮ್ ಮೆಲಿಲೋಟಿ 1021 ಲೋಕಸ್ನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಇದನ್ನು ನಂತರ ಎನ್. ಎಫ್. ಇ. ಆರ್. 1 (ನೋಡ್ಯೂಲ್ ಫಾರ್ಮೇಶನ್ ಎಫಿಷಿಯೆನ್ಸಿ ಆರ್. ಎನ್. ಎ) ಎಂದು ಮರುನಾಮಕರಣ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಉಪ್ಪಿನ ಒತ್ತಡದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ದ್ವಿದಳ ಧಾನ್ಯದ ಬೇರುಗಳ ಮೇಲಿನ ಸಹಜೀವನದ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯಕ್ತವಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮತ್ತಷ್ಟು ಏಕರೂಪತೆ ಮತ್ತು ರಚನೆಯ ಸಂರಕ್ಷಣಾ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು 2 ಇತರ ವರ್ಣತಂತು ಪ್ರತಿಗಳು ಮತ್ತು 3 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡಿಕ್ ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಹಲವಾರು ಸಾರಜನಕ-ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಸಿಂಬಯಾಟಿಕ್ ರೈಜೋಬಿಯಾದಲ್ಲಿ (ಅಂದರೆ, ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದದ ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಸಿ ಹೋಮೋಲಾಗ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆರ್. ಲೆಗುಮಿನೋಸಾರಮ್ bv.viciae, ಆರ್. ಲೆಗುಮಿನೋಸಾರಮ್ ಬಿವಿ. ಟ್ರೈಫೋಲಿ, ಆರ್. ಎಟ್ಲಿ, ಮತ್ತು ಹಲವಾರು ಮೆಸೋರ್ಹಿಝೋಬಿಯಮ್ ಪ್ರಭೇದಗಳು), ಅಗ್ರೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಂ ಪ್ರಭೇದಗಳಿಗೆ ಸೇರಿದ ಸಸ್ಯ ರೋಗಕಾರಕಗಳಲ್ಲಿ (ಅಂದರೆ. ಎ. ಟ್ಯೂಮೆಫಾಸಿಯನ್ಸ್, ಎ. ವಿಟಿಸ್, ಎ. ರೇಡಿಯೋಬ್ಯಾಕ್ಟರ್, ಮತ್ತು ಅಗ್ರೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಂ ಎಚ್13) ಜೊತೆಗೆ ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಪ್ರಭೇದಗಳ (ಬಿ. ಓವಿಸ್, ಬಿ. ಕ್ಯಾನಿಸ್, ಬಿ. ಅಬಾರ್ಟಸ್ ಮತ್ತು ಬಿ. ಮೈಕ್ರೋಟಿಸ್, ಮತ್ತು ಬಿ. ಮೆಲಿಟೆನ್ಸಿಸ್ನ ಹಲವಾರು ಬಯೋವರ್ಗಳು) ವಿಶಾಲ ವರ್ಣಪಟಲದಲ್ಲಿ. αr14C ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರಭೇದಗಳು 115-125 nt ಉದ್ದವಾಗಿವೆ (ಕೋಷ್ಟಕ 1) ಮತ್ತು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾದ ಸಾಮಾನ್ಯ ದ್ವಿತೀಯಕ ರಚನೆಯನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ (ಚಿತ್ರ 1). ಹೆಚ್ಚಿನ αr14 ಪ್ರತಿಲೇಖನಗಳನ್ನು α-ಪ್ರೋಟಿಯೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಲ್ ಜೀನೋಮ್ಗಳ ಇಂಟರ್ಜೆನಿಕ್ ಪ್ರದೇಶಗಳ (ಐಜಿಆರ್)ೊಳಗಿನ ಸ್ವತಂತ್ರ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಘಟಕಗಳ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾದ ಪ್ರವರ್ತಕ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಂದ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾದ ಟ್ರಾನ್ಸ್-ಆಕ್ಟಿಂಗ್ ಎಸ್ಆರ್ಎನ್ಎಗಳಾಗಿ ಪಟ್ಟಿ ಮಾಡಬಹುದು (ಚಿತ್ರ 5). ಆವಿಷ್ಕಾರ ಮತ್ತು ರಚನೆ ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2 ಎಸ್ಆರ್ಎನ್ಎಯನ್ನು ಡೆಲ್ ವ್ಯಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು ವಿವರಿಸಿದ್ದಾರೆ, ಪೂರಕ ಕಾರ್ಯತಂತ್ರಗಳ ಏಕೀಕರಣವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಕಂಪ್ಯೂಟೇಶನಲ್ ತುಲನಾತ್ಮಕ ಜೀನೋಮಿಕ್ ವಿಧಾನದ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ 1021 ತಳಿ (http://iant.toulouse.inra.fr/bacteria/annotation/cgi/rhime.cgi) ಯ ಇಂಟರ್ಜೆನಿಕ್ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ (ಐಜಿಆರ್ಗಳು) ಹೊಸ ಎಸ್ಆರ್ಎನ್ಎ-ಎನ್ಕೋಡಿಂಗ್ ವಂಶವಾಹಿಗಳನ್ನು ಹುಡುಕಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಊಹಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಸಿ2 ಲೋಕಸ್ ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಗಾತ್ರದ ಒಂದೇ ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾರ್ದರ್ನ್ ಹೈಬ್ರಿಡೈಸೇಶನ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ದೃಢಪಡಿಸಿದವು, ಇದು ಮುಕ್ತ-ಜೀವಂತ ಮತ್ತು ಎಂಡೋಸಿಂಬಯೋಟಿಕ್ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳಲ್ಲಿ ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿ ಸಂಗ್ರಹಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಟಿಎಪಿ-ಆಧಾರಿತ 5 '-ಆರ್ಎಸಿಇ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದದ ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ ಪ್ರತಿಲೇಖನದ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಪ್ರಾರಂಭ ತಾಣವನ್ನು (ಟಿಎಸ್ಎಸ್) ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ 1021 ಜೀನೋಮ್ (http://iant.toulouse.inra.fr/bacteria/annotation/cgi/rhime.cgi) ನಲ್ಲಿರುವ 1,667,613 ಎನ್ಟಿ ಸ್ಥಾನಕ್ಕೆ ಮ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಿದ್ದರೆ, 3'-ಅಂತ್ಯವು ಅಸ್ ನ ಸತತ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಕೊನೆಯ ಅವಶೇಷಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವ 1,667,491 ಎನ್ಟಿ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2 ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ಎಸ್ಆರ್ಎ38 ಅಥವಾ ಎಸ್ಎಂ7 ಎಂದು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗಿರುವ ಸಮಾನಾಂತರ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಅಧ್ಯಯನಗಳು, ಎಸ್. ಮೆಲಿಲ್ಲೋಟಿ ಮತ್ತು ಅದರ ನಿಕಟ ಸಂಬಂಧಿತ ತಳಿ 2011ರಲ್ಲಿ ಈ ಎಸ್ಆರ್ಎನ್ಎ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ದೃಢಪಡಿಸಿದವು. ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ 2011ರ ಸಣ್ಣ ಆರ್ಎನ್ಎ ಭಾಗ (50-350 ಎನ್ಟಿ) ದ ಇತ್ತೀಚಿನ ಆಳವಾದ ಅನುಕ್ರಮ-ಆಧಾರಿತ ಗುಣಲಕ್ಷಣವು ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2 (ಇಲ್ಲಿ ಸ್ಮೆಲ್ಸಿ397 ಎಂದು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗಿದೆ) ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ದೃಢಪಡಿಸಿತು ಮತ್ತು ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ 1021 ಜೀನೋಮ್ನಲ್ಲಿ ಅದೇ ಸ್ಥಾನಕ್ಕೆ ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದದ ಪ್ರತಿಲೇಖನದ 5 '-ಮತ್ತು 3'-ತುದಿಗಳನ್ನು ಮ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಿತು. ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2ನ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಆರ್ಫಾಮ್ ದತ್ತಸಂಚಯದ ವಿರುದ್ಧ ಹುಡುಕಲು ಪ್ರಶ್ನೆಯಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು (ಆವೃತ್ತಿ 10.0; http://www.sanger.ac.uk/Software/Rfam). ಈ ಹೋಮೋಲಜಿ ಹುಡುಕಾಟವು ಈ ದತ್ತಸಂಚಯದಲ್ಲಿ ತಿಳಿದಿರುವ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಎಸ್ಆರ್ಎನ್ಎಗೆ ಯಾವುದೇ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸಲಿಲ್ಲ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಲಭ್ಯವಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೀನೋಮ್ಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಡೀಫಾಲ್ಟ್ ನಿಯತಾಂಕಗಳೊಂದಿಗೆ ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2 ಅನ್ನು ಮುಂದಿನ ಬ್ಲಾಸ್ಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು (20 ಏಪ್ರಿಲ್ 2011 ರಂದು 1,615 ಅನುಕ್ರಮಗಳು; https://www.ncbi.nlm.nih.gov;). ಪ್ರಶ್ನೆಯ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ (78-89% ಹೋಲಿಕೆ) ಗಮನಾರ್ಹ ಏಕರೂಪತೆಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಇನ್ಫರ್ನಲ್ (version1.0) (ಚಿತ್ರ 2) ಬಳಸಿ ಬೀಜ ಜೋಡಣೆಯಿಂದ ಕೋವೇರಿಯನ್ಸ್ ಮಾಡೆಲ್ (CM) ಅನ್ನು ರಚಿಸಲು ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಗಿದೆ. ಈ CMಅನ್ನು ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜೀನೋಮಿಕ್ ದತ್ತಸಂಚಯಗಳಲ್ಲಿ αr9 ಕುಟುಂಬದ ಹೊಸ ಸದಸ್ಯರಿಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹುಡುಕಾಟದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಕೋಷ್ಟಕ 2ರಲ್ಲಿ ಪುನರಾರಂಭಿಸಲಾಯಿತುಃ ಕುಟುಂಬದ ಒಮ್ಮತದ ದ್ವಿತೀಯಕ ರಚನೆಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ 1 ಮತ್ತು ಚಿತ್ರ 2). ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಮುನ್ಸೂಚನೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಲೋಕಾರ್ನೇಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂನೊಂದಿಗೆ ಒಮ್ಮತದ ರಚನೆಯನ್ನು ಸಹ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಊಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇನ್ಫರ್ನಲ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಿಎಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಕಂಡುಬರುವ ಅನುಕ್ರಮಗಳ ಹಸ್ತಚಾಲಿತ ತಪಾಸಣೆಯು 101 ಹೋಮೋಲಾಗ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಟ್ಟಿತು. ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2ಗೆ 36 ಹತ್ತಿರದ ಹೋಮೋಲಾಗ್ಗಳನ್ನು ಸಂಕೇತಿಸುವ ರೈಜೋಬಿಯಲ್ ಪ್ರಭೇದಗಳೆಂದರೆಃ ಎಸ್. ಮೆಡಿಕೇ ಮತ್ತು ಎಸ್. ಫ್ರೆಡಿ, ಎರಡು ಆರ್. ಲೆಗುಮಿನೋಸರಮ್ ಟ್ರೈಫೋಲಿ ಪ್ರಭೇದಗಳು (ಡಬ್ಲ್ಯುಎಸ್ಎಂ2304 ಮತ್ತು ಡಬ್ಲ್ಯುಎಸ್ಎಂ1325), ಎರಡು ಆರ್. ಎಟ್ಲಿ ಪ್ರಭೇದಗಳು ಸಿಎಫ್ಎನ್ 42 ಮತ್ತು ಸಿಐಎಟಿ 652, ಉಲ್ಲೇಖ ಆರ್. ಲೆಗುಮಿನೋಸರಮ್ ಬಿವಿ. ವಿಸಿಯಾ 3841 ಪ್ರಭೇದ, ಮತ್ತು ಅಗ್ರೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಂ ಪ್ರಭೇದಗಳು ಎ. ವಿಟಿಸ್, ಎ. ಟ್ಯೂಮಫೇಸಿಯನ್ಸ್, ಎ. ರೇಡಿಯೋಬ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಎ. ಎಚ್13. ಈ ಎಲ್ಲಾ ಅನುಕ್ರಮಗಳು ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ಇನ್ಫರ್ನಲ್ ಇ-ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು (5.63E-29-8.16E-18) ಮತ್ತು ಬಿಟ್-ಸ್ಕೋರ್ಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದವು. ಮಾದರಿಯೊಂದಿಗೆ ಕಂಡುಬರುವ ಉಳಿದ ಅನುಕ್ರಮಗಳು (1.33E-17 ಮತ್ತು 8.79E-03) ನಡುವೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಇ-ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದವು ಆದರೆ ಕಡಿಮೆ ಬಿಟ್-ಸ್ಕೋರ್ಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದವು ಮತ್ತು ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಪ್ರಭೇದಗಳು (ಬಿ. ಓವಿಸ್, ಬಿ. ಕ್ಯಾನಿಸ್, ಬಿ. ಅಬಾರ್ಟಸ್, ಬಿ. ಮೈಕ್ರೋಟಿಸ್, ಮತ್ತು ಬಿ. ಮೆಲಿಟೆನ್ಸಿಸ್ನ ಹಲವಾರು ಬಯೋಬಾರ್ಗಳು), ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಆಂಥ್ರೋಪಿ ಮತ್ತು ಮೆಸೋರ್ಹಿಜೋಬಮ್ ಪ್ರಭೇದಗಳಾದ ಲೋಟಿ, ಎಂ. ಸಿಸೆರಿ ಮತ್ತು ಎಂ. ಬಿ. ಎನ್. ಸಿ. ಈ ಮಾದರಿಯು ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ ಜೀನೋಮ್ನಲ್ಲಿ ಐದು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿತು, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಎರಡನ್ನು ಒಂದೇ ಐಜಿಆರ್ (ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2, ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ3) ನಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಿತು. ಅದೇ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಎಸ್. ಮೆಡಿಕೇ (ಸ್ಮೆಡರ್ 14ಸಿ1, ಸ್ಮೆಡರ್ 14ಸಿ2), ಎಸ್. ಫ್ರೆಡಿ (ಎಸ್ಎಫ್ಆರ್ 14ಸಿ1, ಎಸ್ಎಫ್ಆರ್ 14ಸಿ2), ಎಂ. ಲೋಟಿ (ಎಂಎಲ್ಆರ್ 14ಸಿ1, ಎಂಎಲ್ಆರ್ 14ಸಿ2) ಮತ್ತು ಎಂ. ಸಿಸೆರಿ (ಎಂಎಲ್ಆರ್ 14ಸಿ1, ಎಂಎಲ್ಆರ್ 14ಸಿ2) ಗಳಲ್ಲೂ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ ಜೀನೋಮ್ನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪ್ರತಿಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ, ಐದು ಪ್ರತಿಗಳಲ್ಲಿ ನಾಲ್ಕು ಪ್ರತಿಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ದೃಢೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆಃ ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ3 ಅನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗಿದೆಃ ಎಸ್ಆರ್ಎ38, ಎಸ್ಎಂ7 ಅಥವಾ ಎಸ್ಎಂಇಎಲ್ಸಿ398 ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಎ1 ಅನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗಿದೆಃ ಎಸ್ಎಂಎ8 ಅಥವಾ ಎಸ್ಎಂಇಎಲ್ಎ075 ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಎ2 ಎಂದು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗಿದೆಃ ಎಸ್ಎಂಇಎಲ್ಎ099 ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಬಿ ಎಂದು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗಿದೆಃ ಎಸ್ಎಂಇಎಲ್ಬಿ161 ಊಹಿಸಲಾದ ಪ್ರತಿ ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ1ಗೆ ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ ಯಾವುದೇ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪುರಾವೆಗಳಿಲ್ಲ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಾಹಿತಿ ಸಮಾನಾಂತರ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ವಿವಿಧ ಜೈವಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಎಸ್. ಮೆಲಿಲೋಟಿ 1021ರಲ್ಲಿ ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿವೆ; ಅಂದರೆ. ಟಿ. ವೈ. ಯಲ್ಲಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಬೆಳವಣಿಗೆ, ಕನಿಷ್ಠ ಮಧ್ಯಮ (ಎಂ. ಎಂ.) ಮತ್ತು ಲ್ಯುಟಿಯೋಲಿನ್-ಎಂ. ಎಂ. ಸಾರು ಮತ್ತು ಎಂಡೋಸಿಂಬಯೋಟಿಕ್ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ (ಅಂದರೆ. ಪ್ರೌಢ ಸಹಜೀವನದ ಆಲ್ಫಾಲ್ಫಾ ಗಂಟುಗಳು) ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಉಪ್ಪಿನ ಒತ್ತಡ, ಆಕ್ಸಿಡೇಟಿವ್ ಒತ್ತಡ ಮತ್ತು ಶೀತ ಮತ್ತು ಬಿಸಿ ಆಘಾತದ ಒತ್ತಡಗಳು. ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಬದುಕುವ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದಲ್ಲಿ ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಸಿ2ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯು ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸಿದಾಗ ಜೀನ್ ಬಲವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ-ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಮುಕ್ತ-ಜೀವಂತ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳೊಂದಿಗೆ (ಲಾಗ್ ಹಂತ ಟಿ. ವೈ ಅಥವಾ ಎಂ. ಎಂ. ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು) ಹೋಲಿಸಿದಾಗ ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಸಿ2ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯು ಗಂಟುಗಳಲ್ಲಿ ~ 5 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ, ಇದು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಸೋಂಕು ಮತ್ತು/ಅಥವಾ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಈ ಎಸ್. ಆರ್. ಎನ್. ಎ. ಗಳ ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಇತ್ತೀಚಿನ ಆಳವಾದ ಅನುಕ್ರಮ ದತ್ತಾಂಶವು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಕ್ ಪ್ರತಿಗಳ ಭೇದಾತ್ಮಕ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದೆ. ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಎ1 ವಿಭಿನ್ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿತು, ಸಂಕೀರ್ಣ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಟ್ಟ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಅದೇ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಶಾಖ-ಆಘಾತದ ಒತ್ತಡದಿಂದ ಇದು ಬಲವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿತು. ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಬಿ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಅದರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು 8 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು ತೋರಿಸಿದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಆಮ್ಲೀಯ, ಮೂಲ ಮತ್ತು ಆಕ್ಸಿಡೇಟಿವ್ ಒತ್ತಡ ಪ್ರವರ್ತಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೇಲೆ ಒಂದು ವಾರದ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯನ್ನು (<8 ಪಟ್ಟು) ಸಹ ತೋರಿಸಿದೆ. ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ αr14 ಕುಟುಂಬದ ಸದಸ್ಯರ ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರವರ್ತಕ ಪ್ರದೇಶಗಳು ಎಸ್. ಆರ್. ಎನ್. ಎ. ಯ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಪ್ರಾರಂಭದ ಸ್ಥಳದ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿ 120 ಬಿಪಿ ವರೆಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸಿರುವ ಅನುಕ್ರಮ ವಿಸ್ತರಣೆಯಲ್ಲಿ ಬಹಳವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ. ಎಲ್ಲಾ ಹತ್ತಿರದ ಹೋಮೋಲಾಗ್ ಲೋಕಿಯು-35/- 10 ಒಮ್ಮತದ ಲಕ್ಷಣವಾದ ಸಿಟಿಟಿಎಜಿಎಸಿ-ಎನ್ 17-ಸಿಟಿಎಟಿಎಟಿಯನ್ನು ತೋರಿಸುವ ಗುರುತಿಸಬಹುದಾದ σ70-ಅವಲಂಬಿತ ಪ್ರವರ್ತಕರನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ, ಇದನ್ನು ಈ ಹಿಂದೆ ಪ್ರೋಟಿಯೋಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ α-ಉಪಗುಂಪಿನಲ್ಲಿನ ಹಲವಾರು ಇತರ ಕುಲಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇತರ ತಿಳಿದಿರುವ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳಿಗೆ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ನಾವು ರೆಗ್ಪ್ರೆಡಿಕ್ಷನ್ (http://regpredict.lbl.gov/regpredict/help.html) ಒದಗಿಸಿದ ಫಾಸ್ಟಾ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ರೆಗ್ಯುಲಾನ್ಡಿಬಿ (http://regulondb.ccg.unam.mx) ಒದಗಿಸಿದ ಸ್ಥಾನ ತೂಕದ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ಗಳನ್ನು (ಪಿಎಸ್ಡಬ್ಲ್ಯೂಎಂ) ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ನಾವು ಒಮ್ಮತ/ಪ್ಯಾಟ್ಸರ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ರೆಗ್ಪ್ರೆಡಿಕ್ಷನ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಂದ ಪ್ರತಿ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಕ್ಕೆ ಪಿಎಸ್ಡಬ್ಲ್ಯೂಎಂ ಅನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸಿದೆವು, 14 ಮತ್ತು 30 ರ ನಡುವಿನ ಉದ್ದೇಶದ ಉದ್ದಗಳಿಗೆ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಅಂತಿಮ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿ, ಪ್ರತಿ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ಗೆ ಮಿತಿ ಸರಾಸರಿ ಇ-ಮೌಲ್ಯ <10ಇ-10 ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ, (http://gps-tools2.its.yale.edu ನಲ್ಲಿ "ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡ್ ಒಮ್ಮತ" ಅನ್ನು ನೋಡಿ). ಇದಲ್ಲದೆ, ನಾವು ಎಮ್ಇಎಂಇ (http://meme.sdsc.edu/meme4_6_1/intro.html) ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಂರಕ್ಷಿತ ಅಜ್ಞಾತ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹುಡುಕಿದೆವು ಮತ್ತು ಶಾಂತವಾದ ನಿಯಮಿತ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ (ಅಂದರೆ. ಮಾದರಿ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ) ಎಲ್ಲಾ ಎಸ್. ಎಂ. ಆರ್. 14ಸಿ2 ಹೋಮೋಲಾಗ್ಸ್ ಪ್ರವರ್ತಕರ ಮೇಲೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಲೋಕಿಯ ಎರಡು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾದ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದವು, ಮೊದಲನೆಯದನ್ನು ಹತ್ತಿರದ ಹೋಮೋಲಾಗ್ಗಳು (ಚಿತ್ರ 5) ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು-40 ಮತ್ತು-75 ಸ್ಥಾನಗಳ ನಡುವೆ ಬಹಳ ಸಂರಕ್ಷಿತವಾದ 26 ಬಿಪಿ ಉದ್ದದ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಿತು, ಇದನ್ನು ಸಂರಕ್ಷಿತ ಎಂಇಎಂಇ ಮೋಟಿಫ್ ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 5), ಆದರೆ ತಿಳಿದಿರುವ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸೈಟ್ಗಳಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. αr14 ಕುಟುಂಬದ ಅಷ್ಟೊಂದು ನಿಕಟ ಸಂಬಂಧವಿಲ್ಲದ ಸದಸ್ಯರ ಗುಂಪು ಸಂರಕ್ಷಿತ ಪ್ರವರ್ತಕರ ಎರಡನೇ ಗುಂಪನ್ನು ರಚಿಸಿತು (ಚಿತ್ರ 6). ಅವರು ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರವರ್ತಕ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಿದರು, ಎಲ್ಲಾ ಸದಸ್ಯರಲ್ಲಿ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಅಜ್ಞಾತ 20 ಬಿಪಿ ಮೋಟಿಫನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಿದರು. ಜೆನೋಮಿಕ್ ಸನ್ನಿವೇಶವು αr14 ಕುಟುಂಬದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸದಸ್ಯರು ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಐಜಿಆರ್ಗಳಲ್ಲಿನ ಸ್ವತಂತ್ರ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಂದ ಲಿಪ್ಯಂತರಗೊಂಡ ಟ್ರಾನ್ಸ್-ಎನ್ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಎಸ್ಆರ್ಎನ್ಎಗಳಾಗಿವೆ. ಬೀಜ ಜೋಡಣೆಯ ಸದಸ್ಯರ ಅನೇಕ ನೆರೆಯ ವಂಶವಾಹಿಗಳನ್ನು ಟಿಪ್ಪಣಿ ಮಾಡಲಾಗಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಅವುಗಳನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸಿನೋರಿಝೋಬಿಯಮ್ ಗುಂಪಿನ ಜೀನೋಮ್ಗಳಲ್ಲಿನ (ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2, ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ3, ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ1, ಎಸ್ಎಂಆರ್14ಸಿ2, ಎಸ್ಎಫ್ಆರ್14ಸಿ1, ಎಸ್ಎಫ್ಆರ್14ಸಿ2) ಅನುಕ್ರಮ ಪ್ರತಿಗಳು ಸಂರಕ್ಷಿತ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಸನ್ನಿವೇಶವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಿದವು. DUF1127 ಡೊಮೇನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಅಜ್ಞಾತ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಾಗಿ ಅಪ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಚೋದಕ ಅಂಶಕ್ಕಾಗಿ ಡೌನ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಭಾಗಶಃ ಸಂರಕ್ಷಿತ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಸನ್ನಿವೇಶದಲ್ಲಿ, DUF1127 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಪ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಮತ್ತು 5-ಕೀಟೋ-4-ಡಿಯೋಕ್ಸಿಯುರೋನೇಟ್ ಐಸೋಮರೇಸ್ ಡೌನ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್, ರೈಝೋಬಿಯಮ್ ಗುಂಪಿನ Rlt1325r14p02, Rlvr14p11, Rlt2304r14p02, ಮತ್ತು ReCIATr14Aಗಳ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡಿಕ್ ಪ್ರತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಭಾಗಶಃ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಸಂರಕ್ಷಣೆಯ ಇದೇ ರೀತಿಯ ಪ್ರಕರಣ, DUF1127 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಪ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಮತ್ತು tRNA (ಯುರಾಸಿಲ್-5-)-ಮೀಥೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ ಡೌನ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್, ಮೆಸೊರ್ಹಿಝೋಬಿಯಮ್ ಪ್ರಭೇದಗಳ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ, ಇದು ಎಂ. ಲೋಟಿ (Mlr14C1, Mlr14C2) ಮತ್ತು M. ಸಿಸೆರಿ (Mr14C1, Mr14C2). ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಆಂಥ್ರೋಪಿ (ಓಆರ್14ಸಿಐಐ2) ಯ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ IIರ ಎರಡನೇ ಪ್ರತಿಯಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾ ಗುಂಪಿನ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ Iರ ಎರಡನೇ ಪ್ರತಿಯಲ್ಲಿ (ಬೋರ್14ಸಿಐ2, ಬಿಸಿಆರ್14ಸಿಐ2, ಬಿಮಿರ್14ಸಿಐ2, ಬಿಎಸ್1330ಆರ್14ಸಿಐ2, ಬಿಎಂ16ಎಂಆರ್14ಸಿಐ1, ಬಿಎಎಸ್19ಆರ್14ಸಿಐ2, ಬಿಎಂ23457ಆರ್14ಸಿಐ1, ಬಿಎಂಇಎ _ ಎ0934, ಬ್ರುಎಬಿ1 _ 0906, ಬಿಎ19941ಆರ್14ಸಿಐ2) ಇದೇ ಸಂದರ್ಭ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಈ ಎಲ್ಲಾ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಎಸ್. ಆರ್. ಎನ್. ಎ. ಗಳು ತಮ್ಮ ಐ. ಜಿ. ಆರ್. ನಲ್ಲಿ ಒಂದೇ ಪ್ರತಿಯಾಗಿ ಕಾಣಿಸಿಕೊಂಡವು. ಬಿಎಸ್23445ಆರ್14ಸಿಐ2, ಬಿಮಾರ್14ಸಿಐ2, ಮತ್ತು ಆರ್ಎಲ್ವಿಆರ್14ಸಿ2ಗಳು ಕೆಳಮುಖವಾಗಿ ಟಿಆರ್ಎನ್ಎ (ಯುರಾಸಿಲ್-5-)-ಮೀಥೈಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ಗಾಗಿ ಜೀನ್ ಕೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಂಡಿವೆ, ಆದರೆ ಅಪ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ನಲ್ಲಿ ಜೀನ್ ಕೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಂಡಿಲ್ಲ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಇನ್ನೂ ಎರಡು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಸಂದರ್ಭಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದವು. ನಿಕೋಟಿನಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಮೊನೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಅಡೆನಿಲಿಲ್ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ ಅಪ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ಗಾಗಿ ಜೀನ್ ಕೋಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಮಾಲಿಬ್ಡಿನಮ್ ಎಬಿಸಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಪೋರ್ಟರ್ಗಾಗಿ ಜೀನ್ ಕೋಡಿಂಗ್ ಹೊಂದಿರುವ ಒಂದು, ಇದು ಎ. ರೇಡಿಯೊಬ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಜೀನೋಮ್ (ಆರ್ಆರ್ 14ಸಿಐ 3) ಮತ್ತು ರೈಝೋಬಿಯಮ್ ಗುಂಪಿನ ಜೀನೋಮ್ಗಳಲ್ಲಿ (ಆರ್ಇಸಿಎಫ್ಎನ್ಆರ್ 14ಸಿ 3, ಆರ್ಎಲ್ಟಿ 1325ಆರ್ 14ಸಿ 3, ಆರ್ಎಲ್ವಿಆರ್ 14ಸಿ 3, ಆರ್ಎಲ್ಟಿ 2304ಆರ್ 14ಸಿ 3) ಆರ್ 14 ಕುಟುಂಬದ ಮೂರನೇ ನಕಲನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಎರಡನೆಯ ಗುಂಪನ್ನು ಬ್ರೂಸೆಲ್ಲಾಸ್ ಜೀನೋಮ್ಗಳಲ್ಲಿನ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ I ನಲ್ಲಿನ ಮೊದಲ ನಕಲಿಯಿಂದ ರಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅದು ಎಲ್ಆರ್ಜಿಬಿ ಮೆಂಬರೇನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಾಗಿ ಜೀನ್ ಅಪ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಕೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಜೀನ್ ಕೆಳಮುಖವಾಗಿ ಆಲ್ಫಾ/ಬೀಟಾ ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್ಗಾಗಿ ಕೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತಗಳುಃ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 1 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 2 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 3 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 4 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 5 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 6 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 7 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 8 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 9 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 10 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಡತ 11 ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಆರ್. ಎನ್. ಎ.