Magnetic-activated cell sorting
ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್-ಆಕ್ಟಿವೇಟೆಡ್ ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ (ಎಂ. ಎ. ಸಿ. ಎಸ್) ಎಂಬುದು ಮಿಲ್ಟೆನಿ ಬಯೋಟೆಕ್ ಕಂಡುಹಿಡಿದ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು (ಸಿ. ಡಿ. ಅಣುಗಳು) ಅವಲಂಬಿಸಿ ವಿವಿಧ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಒಂದು ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. MACS ಎಂಬ ಹೆಸರು ಕಂಪನಿಯ ನೋಂದಾಯಿತ ಟ್ರೇಡ್ಮಾರ್ಕ್ ಆಗಿದೆ. ಸೂಪರ್ಪ್ಯಾರಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ ಮತ್ತು ಕಾಲಮ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮಿಲ್ಟೆನಿ ಬಯೋಟೆಕ್ನ ಎಂ. ಎ. ಸಿ. ಎಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಈ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸೂಪರ್ಪ್ಯಾರಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗಳು 100 ಎನ್ಎಂನ ಕ್ರಮದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ. ಉದ್ದೇಶಿತ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಕಾಲಮ್ನೊಳಗೆ ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲು ಅವುಗಳನ್ನು ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಾಲಮ್ನನ್ನು ಶಾಶ್ವತ ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳ ನಡುವೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಆಯಸ್ಕಾಂತೀಯ ಕಣ-ಕೋಶ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಅದರ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋದಾಗ, ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಲಾದ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಸೆರೆಹಿಡಿಯಬಹುದು. ಕಂಬವು ಉಕ್ಕಿನ ಉಣ್ಣೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಶಾಶ್ವತ ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳ ನಡುವೆ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಇರಿಸಿದಾಗ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಗರಿಷ್ಠಗೊಳಿಸಲು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್-ಆಕ್ಟಿವೇಟೆಡ್ ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಎಂಬುದು ಇಮ್ಯುನಾಲಜಿ, ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಸಂಶೋಧನೆ, ನ್ಯೂರೋಸೈನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಸ್ಟೆಮ್ ಸೆಲ್ ಸಂಶೋಧನೆಯಂತಹ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿತವಾದ ಆಯಸ್ಕಾಂತೀಯ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ ಆಗಿರುವ ಮೈಕ್ರೊಬೀಡ್ಗಳನ್ನು ಮಿಲ್ಟೆನಿ ಮಾರಾಟ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಎಂ. ಎ. ಸಿ. ಎಸ್ ವಿಧಾನವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರತಿಜನಕದ ವಿರುದ್ಧ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಂದ ಲೇಪಿತವಾದ ಆಯಸ್ಕಾಂತೀಯ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಇದು ಈ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಕಾಂತೀಯ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಮಣಿಗಳು ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಕಾವುಕೊಟ್ಟ ನಂತರ, ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬಲವಾದ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿರುವ ಒಂದು ಅಂಕಣಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಜೀವಕೋಶಗಳು (ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ) ಕಾಲಮ್ನಲ್ಲಿಯೇ ಉಳಿಯುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಇತರ ಜೀವಕೋಶಗಳು (ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸದ) ಹರಿಯುತ್ತವೆ. ಈ ವಿಧಾನದಿಂದ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅಥವಾ ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಬಹುದು. ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ಆಯ್ಕೆಯು ಧನಾತ್ಮಕ ಆಯ್ಕೆಯೊಂದಿಗೆ, ಆಯಸ್ಕಾಂತೀಯ ಕಾಲಮ್ಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು (ಗಳನ್ನು) ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಆಯಸ್ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದಿಂದ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದ ನಂತರ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಪಾತ್ರೆಗೆ ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ವಿಧಾನವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀವಕೋಶದ ಪ್ರಕಾರವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಸಿಡಿ4 ದುಗ್ಧಕೋಶಗಳು. ಇದಲ್ಲದೆ, ಇದು ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವ ವೀರ್ಯವನ್ನು ಮೊದಲೇ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ ಅವು ಸಾಕಷ್ಟು ನೋಟ ಮತ್ತು ಚಲನಶೀಲತೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಬಹುದು. ಅನೆಕ್ಸಿನ್ಗೆ ಬಂಧಿಸುವ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್-ಲೇಬಲ್ ಗ್ರಾಹಕವನ್ನು ವೀರ್ಯಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಒಳಗೆ, ಫಾಸ್ಫಾಟಿಡಿಲ್ಸೆರಿನ್ ಅಣುಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ಪೊರೆಯೊಳಗೆ ಸೈಟೋಪ್ಲಾಸಂ ಕಡೆಗೆ ಇರುತ್ತವೆ. ಅದೇನೇ ಇದ್ದರೂ, ಅಪೊಪ್ಟೋಟಿಕ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಫಾಸ್ಫಾಟಿಡಿಲ್ಸೆರಿನ್ ಬದಲಿಗೆ ಜೀವಕೋಶದ ಪೊರೆಯ ಹೊರಭಾಗವನ್ನು ಎದುರಿಸಿ, ಅನೆಕ್ಸಿನ್ ಕಾಂಜುಗೇಟ್ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಸಾಮಾನ್ಯ ವೀರ್ಯವು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಗ್ರಾಹಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸದೆ ಕಾಲಮ್ನ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತದೆ. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, ಪ್ರೋಆಪೊಪ್ಟೋಟಿಕ್ ವೀರ್ಯವು ಸಿಕ್ಕಿಬೀಳುತ್ತದೆ, ಇದು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್-ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕೆ ಧನ್ಯವಾದಗಳು ವೀರ್ಯ ಆಯ್ಕೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಹೊರಹೊಮ್ಮುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಈ ತಂತ್ರವು ಸೀಮಿತವಾಗಿದ್ದರೂ ಅದರ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ. ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಆಯ್ಕೆಯೊಂದಿಗೆ, ಬಳಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರತಿಜನಕದ (ಗಳು) ವಿರುದ್ಧವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಆಸಕ್ತಿಯಿಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಮೇಲೆ ಇರುತ್ತದೆ ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ. ಜೀವಕೋಶಗಳು/ಆಯಸ್ಕಾಂತೀಯ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗಳ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕಾಲಮ್ನ ಮೇಲೆ ಹಾಕಿದ ನಂತರ ಈ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಕಾಲಂಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುವ ಭಾಗವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಈ ಅನಪೇಕ್ಷಿತ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಬಹುತೇಕ ಯಾವುದೇ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ. ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರತಿಜನಕದ ವಿರುದ್ಧ ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕೆ ಸಂಯೋಜಿತವಾದ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ ಯಾವಾಗಲೂ ಲಭ್ಯವಿರುವುದಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಅದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಒಂದು ಮಾರ್ಗವಿದೆ. ಫ್ಲೋರೋಫೋರ್-ಸಂಯೋಜಿತ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರಚಲಿತದಲ್ಲಿರುವುದರಿಂದ, ಆಂಟಿ-ಫ್ಲೂರೋಕ್ರೋಮ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಲೇಪಿತವಾದ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ. ಅವು ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರತಿಜನಕದ ವಿರುದ್ಧ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್-ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಹೀಗೆ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಜೀವಕೋಶವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡಬಹುದು. ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿ ಡೈನಾಬೀಡ್ಸ್ ಕ್ಲಸ್ಟರ್ಸ್ ಆಫ್ ಡಿಫರೆನ್ಸಿಯೇಷನ್ ಮಾಲಿಕ್ಯುಲರ್ ಬಯಾಲಜಿ ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಎಸ್. ಮಿಲ್ಟೆನಿ, ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಮುಲ್ಲರ್, ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ವೈಚೆಲ್, ಮತ್ತು ಎ. ರಾಡ್ಬ್ರೂಚ್, "ಹೈ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಸೆಲ್ ಸೆಪರೇಷನ್ ವಿತ್ ಎಂಎಸಿಎಸ್", ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿ, ಸಂಪುಟವನ್ನು ಸಹ ನೋಡಿ. 11, ಇಲ್ಲ. 2, ಪು. 231-238,1990.