Eukaryotic DNA replication
ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಒಂದು ಸಂರಕ್ಷಿತ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಾಗಿದ್ದು, ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರತಿ ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರಕ್ಕೆ ಒಮ್ಮೆ ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಡಿಎನ್ಎಯ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಜೀವಕೋಶದ ನಕಲು ಮಾಡಲು ಕೇಂದ್ರವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀನೋಮ್ನ ನಿರ್ವಹಣೆಗೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದ್ದು, ಮೂಲ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ಗೆ ಪೂರಕವಾದ ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲು, ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ಮುಂದೆ ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕೇಸ್ಗಳಿಂದ ಬಿಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ, ಎರಡು ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳು ಒಂದೇ ಡಿಎನ್ಎ ಡಬಲ್ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಎರಡು ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ಗಳಾಗಿ ನಕಲಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ, ಇವುಗಳನ್ನು ಮಿಟೋಸಿಸ್ನಲ್ಲಿ ಮಗಳು ಕೋಶಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುವ ಪ್ರಮುಖ ಕಿಣ್ವಕ ಕಾರ್ಯಗಳು ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಿಂದ ಹಿಡಿದು ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳವರೆಗೆ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ, ಆದರೆ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿನ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಯಂತ್ರೋಪಕರಣವು ಹೆಚ್ಚು ದೊಡ್ಡ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದ್ದು, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಜೀವಕೋಶದಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ನಕಲಿಸಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಆನುವಂಶಿಕ/ಆನುವಂಶಿಕ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಪೋಷಕರ ಜೀವಕೋಶದಿಂದ ಮಗಳು ಜೀವಕೋಶಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹತೆಯಿಂದ ರವಾನಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಇದು ಎಲ್ಲಾ ಜೀವಿಗಳಿಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಭಾಗವು ದೋಷಗಳಿಲ್ಲದೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗಿದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಅನೇಕ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ನಿಯಂತ್ರಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಲ್ಲಿ, ಬಹುಪಾಲು ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಎರಡು ಮಗಳು ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಇಡೀ ಜೀನೋಮ್ ಅನ್ನು ಬಿಚ್ಚಬೇಕು ಮತ್ತು ನಕಲು ಮಾಡಬೇಕು. ಜಿ2 ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಯಾವುದೇ ಹಾನಿಗೊಳಗಾದ ಡಿಎನ್ಎ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ದೋಷಗಳನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಜೀನೋಮ್ಗಳ ಒಂದು ಪ್ರತಿಯನ್ನು ಮಿಟೋಸಿಸ್ ಅಥವಾ ಎಂ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿ ಮಗಳು ಕೋಶವಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಮಗಳು ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ಪೋಷಕ ಡ್ಯುಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎಯಿಂದ ಒಂದು ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಮತ್ತು ಒಂದು ನವಜಾತ ಆಂಟಿಪ್ಯಾರಲಲ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಿಂದ ಹಿಡಿದು ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳವರೆಗೆ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಅರೆಸಂರಕ್ಷಕ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸ್ಥಳಕ್ಕೆ ಅರೆಸಂರಕ್ಷಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಫೋರ್ಕ್ ತರಹದ ಡಿಎನ್ಎ ರಚನೆಯಾಗಿದೆ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್, ಅಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ತೆರೆದಿರುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಗಾಯಗೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ, ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಗಾಗಿ ಜೋಡಿಯಿಲ್ಲದ ಡಿಎನ್ಎ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಒಡ್ಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮುಕ್ತ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಸೇರಿಸಲು ಬೇಸ್ ಜೋಡಣೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭವು ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೊದಲ ಹಂತವಾಗಿದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಡಬಲ್ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಗಾಯಗೊಳಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α ನಿಂದ ಆರಂಭಿಕ ಪ್ರೈಮಿಂಗ್ ಘಟನೆಯು ಪ್ರಮುಖ ಎಳೆಗಳ ಮೇಲೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿನ ಪ್ರೈಮಿಂಗ್ ಈವೆಂಟ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ನ ಪ್ರೈಮಿಂಗ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α ಮೂಲಕ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುವ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ನ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರೈಮಿಂಗ್ ಮುಂಭಾಗದ ಎಳೆಗಳ ಮೂಲದ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕಿನ ಪ್ರಾರಂಭದಲ್ಲಿ ಮಂದಗತಿಯ ಎಳೆಗಳ ಮೇಲೆ ಒಮ್ಮೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲವು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಿಂದ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ತಾಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ 1970 ರ ದಶಕದ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಯಿತು, ಆದ್ದರಿಂದ ಸ್ವಾಯತ್ತವಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು (ಎಆರ್ಎಸ್) ಹೆಸರಿಸಲಾಯಿತು. ಮೂಲಗಳು ಅವುಗಳ ದಕ್ಷತೆಯಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ, ಕೆಲವನ್ನು ಬಹುತೇಕ ಪ್ರತಿ ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಇತರವುಗಳನ್ನು ಸಾವಿರ ಎಸ್ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಕೇವಲ ಒಂದರಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಬಳಸಬಹುದು. ಯೀಸ್ಟ್ ಎಆರ್ಎಸ್ಗಳ ಒಟ್ಟು ಸಂಖ್ಯೆ ಕನಿಷ್ಠ 1600, ಆದರೆ ಕಡಿಮೆ ಸಕ್ರಿಯ ತಾಣಗಳನ್ನು ಎಣಿಸಿದರೆ 5000 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿರಬಹುದು, ಅಂದರೆ, ಪ್ರತಿ 2000 ರಿಂದ 8000 ಬೇಸ್ ಜೋಡಿಗಳಿಗೆ ಎಆರ್ಎಸ್ ಇರಬಹುದು. ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ಬಹು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಈ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಗಳಿಂದ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿ ಬೇರ್ಪಡುತ್ತವೆ. ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್. ಸಿ.) ರಚನೆಯು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಾರಂಭದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಮಧ್ಯಂತರವಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದೊಂದಿಗಿನ ಅಸೋಸಿಯೇಷನ್ ಆಫ್ ದಿ ಆರಿಜಿನ್ ರೆಕಗ್ನಿಷನ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ (ಒಆರ್ಸಿ) ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಪರವಾನಗಿ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ 1 ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಸಿಡಿಟಿ 1) ಮೂಲಕ ಸುಗಮಗೊಳಿಸಲಾದ ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣೆ (ಎಂಸಿಎಂ 2-7) ಸಂಕೀರ್ಣ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡಲು ವೇದಿಕೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಜೀವಕೋಶ ವಿಭಾಗ ಚಕ್ರ 6 ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಸಿಡಿಸಿ 6) ಅನ್ನು ನೇಮಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಗಳೊಂದಿಗೆ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2-7 ಸಂಕೀರ್ಣದ ಸ್ಥಿರ ಸಂಬಂಧಕ್ಕೆ ಒ. ಆರ್. ಸಿ., ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 6, ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಒಟ್ಟಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಮೂಲಗಳು ಹಲವಾರು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳ ರಚನೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಎರಡು ದ್ವಿಮುಖ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳ ಜೋಡಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಘಟನೆಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ) ರಚನೆಯಿಂದ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತವೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತದಲ್ಲಿ ನಡೆಯುತ್ತದೆ. ಆರ್ಸಿ-ಪೂರ್ವ ರಚನೆಯು ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಸಂಕೀರ್ಣ (ಒಆರ್ಸಿ), ಸಿಡಿಸಿ6 ಪ್ರೋಟೀನ್, ಸಿಡಿಟಿ1 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮತ್ತು ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು (ಎಂಸಿಎಂ2-7) ಸೇರಿದಂತೆ ಅನೇಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಂಶಗಳ ಕ್ರಮಬದ್ಧ ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ರಚನೆಯಾದ ನಂತರ, ಸಂಕೀರ್ಣದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯು ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ 2 (ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ) ಮತ್ತು ಡಿ. ಬಿ. ಎಫ್ 4-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ (ಡಿ. ಡಿ. ಕೆ) ಎಂಬ ಎರಡು ಕೈನೇಸ್ಗಳಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭದ ಮೊದಲು ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭದ ಸಂಕೀರ್ಣಕ್ಕೆ ಪರಿವರ್ತಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಈ ಪರಿವರ್ತನೆಯು ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಡಿಲಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಗಾಯಗೊಳ್ಳದ ಡಿಎನ್ಎಯ ಸುತ್ತ ಅನೇಕ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಂಶಗಳ ಕ್ರಮಬದ್ಧ ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ದ್ವಿ-ದಿಕ್ಕಿನ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಕೇಂದ್ರಬಿಂದುವೆಂದರೆ, ಪ್ರತಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಕ್ಕೆ ಎರಡು ತಲೆಯಿಂದ ತಲೆಗೆ ಮ್ಯಾಕ್ಎಂ2-7 ಸಂಕೀರ್ಣಗಳನ್ನು ಒಆರ್ಸಿ ನೇಮಿಸುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಸಂಕೀರ್ಣ ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ) ಜೋಡಣೆಯ ಮೊದಲ ಹಂತವೆಂದರೆ ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು (ಒಆರ್ಸಿ) ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುವುದು. ಮಿಟೋಸಿಸ್ನ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ, ಸಿಡಿಸಿ6 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬೌಂಡ್ ಒಆರ್ಸಿಗೆ ಸೇರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಸಿಡಿಟಿ1-ಎಂಸಿಎಂ2-7 ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಒಆರ್ಸಿ, ಸಿಡಿಸಿ6, ಮತ್ತು ಸಿಡಿಟಿ1 ಇವೆಲ್ಲವೂ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಆರು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಿನಿಕ್ರೋಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣೆ (ಎಂಸಿಎಂ 2-7) ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡಲು ಅಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಒಆರ್ಸಿ ಆರು-ಉಪಘಟಕ, ಒಆರ್ಸಿ1ಪಿ-6, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದ್ದು, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲ ತಾಣಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಒಆರ್ಸಿ ಬಂಧವನ್ನು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಮೂಲಕ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಒಆರ್ಸಿ ಉಪಘಟಕಗಳ ಕಾರ್ಯ ಮತ್ತು ಗಾತ್ರವನ್ನು ಅನೇಕ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀನೋಮ್ಗಳಾದ್ಯಂತ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ವ್ಯತ್ಯಾಸವೆಂದರೆ ಅವುಗಳ ಬೇರೆಯಾದ ಡಿಎನ್ಎ ಬಂಧಿಸುವ ತಾಣಗಳು. ಅತ್ಯಂತ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾದ ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯ ಸಂಕೀರ್ಣವೆಂದರೆ ಸ್ಯಾಕರೊಮೈಸಿಸ್ ಸೆರೆವಿಸಿಯಾ ಅಥವಾ ಯೀಸ್ಟ್, ಇದು ಸ್ವಾಯತ್ತವಾಗಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸುವ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ (ಎಆರ್ಎಸ್) ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಸೆರೆವಿಸಿಯಾ ಒಆರ್ಸಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಯೀಸ್ಟ್ ಮೂಲದ ಎ ಮತ್ತು ಬಿ 1 ಅಂಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ, ಇದು 30 ಬೇಸ್ ಜೋಡಿಗಳ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ವ್ಯಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸಲು ಎಟಿಪಿ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಎಆರ್ಎಸ್ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಬದ್ಧವಾಗಿರುವ ಎಸ್. ಸೆರೆವಿಸಿಯಾ ಒಆರ್ಸಿಯ ಪರಮಾಣು ರಚನೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಒಆರ್ಸಿ1, ಒಆರ್ಸಿ2, ಒಆರ್ಸಿ3, ಒಆರ್ಸಿ4, ಮತ್ತು ಒಆರ್ಸಿ5ಗಳು ಎ ಅಂಶದಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಬಾಗಿಸುವ ಬೇಸ್ ನಾನ್-ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕ್ ಮತ್ತು ಬೇಸ್-ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕ್ ಎಂಬ ಎರಡು ರೀತಿಯ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಮೂಲಕ ಎ ಅಂಶವನ್ನು ಸುತ್ತುವರೆದಿವೆ. ಎಲ್ಲಾ ಐದು ಉಪಘಟಕಗಳು ಸಕ್ಕರೆ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬನ್ನು ಎ ಅಂಶದ ಅನೇಕ ಬಿಂದುಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಪರ್ಕಿಸಿ ಬೇಸ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯಿಲ್ಲದೆ ಬಿಗಿಯಾದ ಹಿಡಿತವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ. ಒಆರ್ಸಿ1 ಮತ್ತು ಒಆರ್ಸಿ2ಗಳು ಎ ಅಂಶದ ಸಣ್ಣ ತೋಡುಗಳನ್ನು ಸಂಪರ್ಕಿಸಿದರೆ, ಒಆರ್ಸಿ4ನ ರೆಕ್ಕೆಯ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ಕ್ಷೇತ್ರವು ಎ ಅಂಶದ ಪ್ರಮುಖ ತೋಡುಗಳಲ್ಲಿನ ಅಸ್ಥಿರ ಟಿಗಳ ಮೀಥೈಲ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಒಳಸೇರಿಸುವ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ (ಐಎಚ್) ಮೂಲಕ ಸಂಪರ್ಕಿಸುತ್ತದೆ. ಮೆಟಾಝೋವಾನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಈ ಐ. ಎಚ್. ನ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯು ಮಾನವ ಒ. ಆರ್. ಸಿ. ಯಲ್ಲಿ ಅನುಕ್ರಮ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯ ಕೊರತೆಯನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಸಿ. ಓ. ಆರ್. ಸಿ. ಯಿಂದ ಐ. ಎಚ್. ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದರಿಂದ ಅದು ಎ ಅಂಶಕ್ಕೆ ತನ್ನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರವರ್ತಕ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ ಸ್ವಚ್ಛಂದವಾಗಿ ಮತ್ತು ಆದ್ಯತೆಯಾಗಿ (83 ಪ್ರತಿಶತ) ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಆರ್. ಸಿ. 2, ಆರ್. ಸಿ. 5 ಮತ್ತು ಆರ್. ಸಿ. 6 ಗಳೊಂದಿಗಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಮೂಲಕ ಎ. ಆರ್. ಎಸ್. ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯು ಬಿ1 ಅಂಶದ ಕಡೆಗೆ ಬಾಗುತ್ತದೆ. ಒ. ಆರ್. ಸಿ. ಯಿಂದ ಮೂಲದ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯ ಬಾಗುವಿಕೆಯು ವಿಕಾಸಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿರುವಂತೆ ತೋರುತ್ತದೆ, ಇದು ಮೆಕ್ಮ್2-7 ಸಂಕೀರ್ಣ ಲೋಡಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಕ್ಕೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಒಆರ್ಸಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಬಂಧಿಸಿದಾಗ, ಇದು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಇತರ ಪ್ರಮುಖ ಆರಂಭದ ಅಂಶಗಳ ಜೋಡಣೆಗೆ ಸ್ಕ್ಯಾಫೋಲ್ಡ್ ಆಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತದಲ್ಲಿ ಈ ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ಜೋಡಣೆಯು ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಮೊದಲು ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಮೆಟಾಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ನಿಂದ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಕನಿಷ್ಠ ಭಾಗವನ್ನು (ಒಆರ್ಸಿ 1) ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದು ಸಸ್ತನಿ ಒಆರ್ಸಿಯ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಭಾಗವಾಗಿದೆ, ಇದು ಮೆಟಾಫೇಸ್ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುವ ಮೊದಲು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ರಚನೆಯನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಸಿಡಿಸಿ6 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಸಂಕೀರ್ಣಕ್ಕೆ (ಒಆರ್ಸಿ) ಜೀವಕೋಶ ವಿಭಜನೆ ಚಕ್ರ 6 (ಸಿಡಿಸಿ6) ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ) ಜೋಡಣೆಯಲ್ಲಿನ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಹಂತವಾಗಿದೆ. ಸಿಡಿಸಿ6 ಡಿಎನ್ಎಯ ಒಆರ್ಸಿಗೆ ಎಟಿಪಿ-ಅವಲಂಬಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಒಆರ್ಸಿ1 ಎಟಿಪೇಸ್ನ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಮೂಲ ಬಂಧದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. Cdc6ಗೆ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಜೊತೆ ಬೆಸೆದುಕೊಳ್ಳಲು ORC ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು Cdt1-Mcm2-7 ಹೆಪ್ಟಾಮರ್ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಜೊತೆ ಬೆಸೆದುಕೊಳ್ಳಲು ಇದು ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಒಆರ್ಸಿ-ಸಿಡಿಸಿ6 ಸಂಕೀರ್ಣವು ವರ್ತುಲದ ಆಕಾರದ ರಚನೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇತರ ಎಟಿಪಿ-ಅವಲಂಬಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಯಂತ್ರಗಳಿಗೆ ಹೋಲುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಆವರ್ತನವನ್ನು ಸಿಡಿಸಿ6ನ ಮಟ್ಟಗಳು ಮತ್ತು ಚಟುವಟಿಕೆಗಳು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತವೆ. ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಾಗಿ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಪರವಾನಗಿ ಪಡೆಯಲು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಪರವಾನಗಿ ಮತ್ತು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಂಶ 1 (ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಎಸ್. ಸೆರೆವಿಸಿಯಾದಲ್ಲಿ, ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2-7 ಏಕ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ನ ಎಡಗೈ ತೆರೆದ-ಉಂಗುರದ ರಚನೆಯನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ನ ಮೇಲೆ ಒಂದು ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2-7 ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡಲು ಅನುಕೂಲ ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಸಹಕಾರಿಯಾಗಿ ಉತ್ತೇಜಿಸಲು ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಅನ್ನು ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 6ರ ಸಿ ಟರ್ಮಿನಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಒ. ಸಿ. ಸಿ. ಎಂ. (ಒ. ಆರ್. ಸಿ.-ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 6-ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ.) ಸಂಕೀರ್ಣದ ಕ್ರಯೋ-ಇ. ಎಂ. ರಚನೆಯು ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1-ಸಿ. ಟಿ. ಡಿ. ಯು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 6-ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಎಚ್. ಡಿ. ಯೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಮೆಟಾಝೋವಾನ್ಗಳಲ್ಲಿ, ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜೆಮಿನಿನ್ನೊಂದಿಗಿನ ಅದರ ಸಂಬಂಧದಿಂದ ಬಿಗಿಯಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯ ಮರು-ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟುವ ಸಲುವಾಗಿ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಸರ್ವವ್ಯಾಪಿ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಪ್ರೋಟಿಯೋಲಿಸಿಸ್ನಿಂದ ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಎಆರ್ಎಸ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಸ್ಥಿರತೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಎಸ್. ಸೆರೆವಿಸಿಯಾದಲ್ಲಿನ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಆರಂಭದ ರೂಪಾಂತರಗಳ ಆನುವಂಶಿಕ ಪರದೆಯ ಮೇಲೆ ಮಿನಿಕ್ರೋಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣೆ (ಎಂಸಿಎಂ) ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿಗೆ ಹೆಸರಿಡಲಾಗಿದೆ. ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 3, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 4, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 5, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 6 ಮತ್ತು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 7 ಹೆಕ್ಸಾಮೆರಿಕ್ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2 ಮತ್ತು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 5 ನಡುವಿನ ಅಂತರದೊಂದಿಗೆ ತೆರೆದ-ಉಂಗುರದ ರಚನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮೇಲೆ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಜೋಡಣೆಗೆ ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಸಂಕೀರ್ಣ (ಒ. ಆರ್. ಸಿ.), ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 6, ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1ಗಳ ಸಂಯೋಜಿತ ಕಾರ್ಯದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಒಮ್ಮೆ ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ, ನಂತರದ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ತಡೆಯದೆ ಒಆರ್ಸಿ ಮತ್ತು ಸಿಡಿಸಿ 6 ಅನ್ನು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ನಿಂದ ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು. ಈ ಅವಲೋಕನವು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪಾತ್ರವು ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಲೋಡ್ ಮಾಡುವುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮೇಲಿರುವ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ತಲೆಯಿಂದ ತಲೆಗೆ ಎರಡು ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಎರಡು ಉಂಗುರಗಳು ಸ್ವಲ್ಪ ಓರೆಯಾಗಿರುತ್ತವೆ, ತಿರುಚಲ್ಪಡುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿರುವುದಿಲ್ಲ, ಇದು ಕೇಂದ್ರ ಚಾನೆಲ್ನಲ್ಲಿ ಕಿಂಕ್ ಅನ್ನು ರಚಿಸುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಬೌಂಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಎರಡು ಉಂಗುರಗಳ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಹೆಕ್ಸಾಮೆರಿಕ್ ಮೆಕ್ಮ್2-7 ಉಂಗುರವು ಮೊದಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಜೋಡಣೆಗೆ ಸ್ಕ್ಯಾಫೋಲ್ಡ್ ಆಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮುಖ್ಯ ಅಂಶವಾದ ವೇಗವರ್ಧಕ ಸಿಎಮ್ಜಿ (ಸಿಡಿಸಿ45-ಎಂಸಿಎಂ-ಜಿಐಎನ್ಎಸ್) ಹೆಲಿಕೇಸ್ನ ಕೋರ್ ಆಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಎಮ್. ಸಿ. ಎಂ. ಪ್ರೋಟೀನ್ ಇತರ ಎಲ್ಲ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ, ಆದರೆ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಉಪಘಟಕದ ಪ್ರಕಾರಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವ ವಿಶಿಷ್ಟ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಾದ್ಯಂತ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎಲ್ಲಾ ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳು ನಿಖರವಾಗಿ ಆರು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾದೃಶ್ಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ವರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಕ್ಕೆ (ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2-7) ಸೇರುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಶಿಷ್ಟ ಮತ್ತು ಪ್ರಮುಖ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಮಿನಿಕ್ರೋಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ. ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಆರು ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫೋರ್ಕ್ನ ಮತ್ತಷ್ಟು ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಅನ್ನು ಮರುಬಳಕೆ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಬೇಕು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಜೊತೆಗೆ, ಸಂಕೀರ್ಣವು ಎಟಿಪೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಸಹ ಹೊಂದಿದೆ. ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣದೊಳಗೆ ಎ. ಟಿ. ಪಿ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನವನ್ನು ಸಂಘಟಿಸಲು ಒಟ್ಟಿಗೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವೇಗವರ್ಧಕ ಜೋಡಿಗಳಿವೆ ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳು, ಮೆಕ್ಮ್2-7 ಸಂಕೀರ್ಣಗಳ ಕ್ರಯೋ-ಇ. ಎಂ. ರಚನೆಗಳಿಂದ ದೃಢೀಕರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ, ಮೆಕ್ಮ್ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಮೆಕ್ಮ್2-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 6-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 4-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 7-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 3-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 5-ರ ಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ವರ್ತುಲದಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಉಪಘಟಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ ಆಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಪ್ರತಿ ವೇಗವರ್ಧಕ ಜೋಡಿಯ ಎರಡೂ ಸದಸ್ಯರು ಎಟಿಪಿ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಜಲವಿಚ್ಛೇದನಕ್ಕೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುವ ಸಂರಚನೆಗೆ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುತ್ತಾರೆ ಮತ್ತು ಸಕ್ರಿಯ ಮತ್ತು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯ ಉಪಘಟಕಗಳ ಮಿಶ್ರಣವು ಬಹುಶಃ ಮೆಕ್ಮ್ ಹೆಕ್ಸಾಮೆರಿಕ್ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಎಟಿಪಿ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಜಲವಿಚ್ಛೇದನವನ್ನು ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಮೊಳಕೆಯೊಡೆಯುವ ಯೀಸ್ಟ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಪರಮಾಣು ಸ್ಥಳೀಕರಣವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತ ಮತ್ತು ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಇರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಜಿ2 ಹಂತ ಮತ್ತು ಎಂ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸೈಟೋಪ್ಲಾಸಂಗೆ ರಫ್ತಾಗುತ್ತವೆ. ಜೀವಕೋಶದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸಲು ಸಂಪೂರ್ಣ ಮತ್ತು ಅಖಂಡವಾದ ಆರು ಉಪಘಟಕಗಳ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಎಸ್. ಸೆರೆವಿಸಿಯಾದಲ್ಲಿ, ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ (ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ) ಚಟುವಟಿಕೆಯಿಂದ ಪರಮಾಣು ರಫ್ತು ಉತ್ತೇಜಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ. ಗೆ ಲಭ್ಯತೆಯ ಕೊರತೆಯಿಂದಾಗಿ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ. ರಫ್ತು ಯಂತ್ರೋಪಕರಣಗಳಿಂದ ರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಆರಂಭದ ಅಂಶಗಳು, ಮೂಲ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಸಂಕೀರ್ಣ (ಒಆರ್ಸಿ), ಸಿಡಿಸಿ6, ಸಿಡಿಟಿ1, ಮತ್ತು ಮಿನಿಕ್ರೋಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣೆ (ಎಂಸಿಎಂ) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಬಂಧಿಸಿ ಎಂಸಿಎಂ ರಿಂಗ್ ಸಂಕೀರ್ಣದ ತಲೆಯಿಂದ ತಲೆಗೆ ಡೈಮರ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಇದನ್ನು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ) ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಯೀಸ್ಟ್ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಒಂದು ಮುಚ್ಚಿದ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸಿದರೆ, ಮಾನವ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಒಂದು ತೆರೆದ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಎಸ್ ಹಂತಕ್ಕೆ ಜಿ1 ಹಂತದ ಪರಿವರ್ತನೆಯಲ್ಲಿ, ಎಸ್ ಹಂತ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್ (ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ.) ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 7/ಡಿ. ಬಿ. ಎಫ್. 4 ಕೈನೇಸ್ (ಡಿ. ಡಿ. ಕೆ.) ಜಡ ಪೂರ್ವ-ಆರ್. ಸಿ. ಯನ್ನು ಎರಡು ದಿಕ್ಕಿನ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳನ್ನು ಜೋಡಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವಿರುವ ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತವೆ. ಕ್ರಯೋಇಎಂ ರಚನೆಗಳು ಎರಡು ಡಿಡಿಕೆಗಳು ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಎಂಸಿಎಂ ಡಬಲ್ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ನ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಎರಡು ಉಂಗುರಗಳಲ್ಲಿ ಹರಡಿಕೊಂಡಿವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 4, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2 ಮತ್ತು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 6 ನ ಎನ್. ಟಿ. ಇ. ಗಳ ಮೇಲೆ ಅನೇಕ ತಲಾಧಾರಗಳ ಅನುಕ್ರಮ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಚಲಿಸುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದಿಂದ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಡಿ. ಬಿ. ಎಫ್. 4 ತನ್ನ ಬಹು ತಲಾಧಾರಗಳ ಮೇಲೆ ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 7 ಅನ್ನು ಇರಿಸಲು ವಿಭಿನ್ನ ಚಲಿಸುವ ಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಊಹಿಸುತ್ತದೆ. ಎಂಸಿಎಂ ಡಬಲ್ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್, ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಎಂಸಿಎಂ 4-ಎನ್ಎಸ್ಡಿ, ಡಿಡಿಕೆ ಯಿಂದ ಯೀಸ್ಟ್ನಲ್ಲಿನ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಡಿಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆಯಿಂದ ಎಂಸಿಎಂಗಳನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ ಸಿಡಿಸಿ 45 ಮತ್ತು ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ನೇಮಕಾತಿ ನಡೆಯುತ್ತದೆ. Cdc45 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೋಶ ವಿಭಜನೆ ಚಕ್ರ 45 (Cdc45) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭದ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಲು ನಿರ್ಣಾಯಕ ಅಂಶವಾಗಿದೆ. Cdc45 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪ್ರಾರಂಭದ ಮೊದಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಗಳಲ್ಲಿ ಜೋಡಣೆಯಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸ್ಯಾಕರೊಮೈಸಿಸ್ ಸೆರೆವಿಸಿಯಾದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗಲು ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಉದ್ದದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಾರಂಭ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಹಂತಗಳೆರಡರಲ್ಲೂ ಸಿಡಿಸಿ45 ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಜಿ1 ಹಂತದ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪ್ರಾರಂಭವಾದ ನಂತರ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಜೊತೆ ಸಿಡಿಸಿ45 ಸಹವರ್ತಿಗಳು. Cdc45 ಮ್ಯಾಕ್ಮ್5ನೊಂದಿಗೆ ದೈಹಿಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಮ್ಯಾಕ್ಮ್ ವಂಶವಾಹಿ ಕುಟುಂಬದ ಆರು ಸದಸ್ಯರಲ್ಲಿ ಐವರೊಂದಿಗೆ ಮತ್ತು ಒಆರ್ಸಿ2 ವಂಶವಾಹಿಯೊಂದಿಗೆ ಆನುವಂಶಿಕ ಸಂವಹನಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α, ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε, ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಎ (ಆರ್ಪಿಎ) ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸುವ ಸೆಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಆಂಟಿಜೆನ್ (ಪಿಸಿಎನ್ಎ) ಸೇರಿದಂತೆ ಇತರ ವಿವಿಧ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡಲು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಸಿಡಿಸಿ 45 ಅನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡುವುದು ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ. ಕ್ಸೆನೋಪಸ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್-ಮುಕ್ತ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯೊಳಗೆ, ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಬಿಚ್ಚಲು ಸಿಡಿಸಿ 45 ಅಗತ್ಯವಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕ್ಸೆನೋಪಸ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್-ಮುಕ್ತ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ವೈಂಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಬಿಗಿಯಾದ ಆರ್ಪಿಎ ಬಂಧವು ಸಿಡಿಸಿ 45 ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ Cdc45 ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವುದು ಕ್ಲಾಬ್-Cdc28 ಕೈನೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಜೊತೆಗೆ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ Cdc6 ಮತ್ತು Mcm2 ಅನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ, ಇದು S-ಹಂತದ ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ಗಳನ್ನು (CDK ಗಳು) ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ Cdc45 ಪೂರ್ವ-RC ಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಸಮಯ ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ ಅವಲಂಬನೆಯಿಂದ ಸೂಚಿಸಿದಂತೆ, ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವ ಬದ್ಧತೆಗೆ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ಗೆ ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 45 ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವುದು ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ. ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ, Cdc45 ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮೇಲೆ ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ದೈಹಿಕವಾಗಿ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ; ಆದಾಗ್ಯೂ, ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ನಿಂದ Cdc45ನ ವಿಯೋಜನೆಯು ಮೆಕ್ಮ್ಗಿಂತ ನಿಧಾನವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ವಿಭಿನ್ನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳಿಂದ ಬಿಡುಗಡೆಯಾಗುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಜಿ. ಐ. ಎನ್. ಎಸ್. ಆರು ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 45 ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಫೋರ್ಕ್ಗಳ ಚಲನೆಗೆ ಮತ್ತು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯನ್ನು ಸಡಿಲಗೊಳಿಸಲು ಪ್ರಾರಂಭ ಮತ್ತು ಉದ್ದದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯಗತ್ಯ. ಆರಂಭದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ನಂತರ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಮುಂದುವರೆದಂತೆ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 45ರ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ಜಿ. ಐ. ಎನ್. ಗಳು ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣವು ನಾಲ್ಕು ಸಣ್ಣ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಾದ ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ5 (ಸಿಡಿಸಿ105), ಪಿಎಸ್ಎಫ್1 (ಸಿಡಿಸಿ101), ಪಿಎಸ್ಎಫ್2 (ಸಿಡಿಸಿ102) ಮತ್ತು ಪಿಎಸ್ಎಫ್3 (ಸಿಡಿಸಿ103) ಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದೆ. ಸಿಡಿಸಿ45, ಎಂಸಿಎಂ2-7 ಮತ್ತು ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಒಟ್ಟಾಗಿ ಸಿಎಮ್ಜಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಆಗಿದೆ. ಮೆಕ್ಮ್2-7 ಸಂಕೀರ್ಣವು ಮಾತ್ರ ದುರ್ಬಲ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೂ, ದೃಢವಾದ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಸಿಡಿಸಿ45 ಮತ್ತು ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ, ಮೆಕ್ಮ್10 ಮ್ಯಾಕ್ಮ್10 ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣೆ 2-7 ಹೆಲಿಕೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ. ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 10 ವೇಗವರ್ಧಕ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α ಅನ್ನು ಚಾಪೆರೋನ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಡಿಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆ ಕೈನೇಸ್ಗಳು ಎಸ್ ಹಂತದ ಪ್ರಾರಂಭದಲ್ಲಿ, ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಎರಡು ಎಸ್ ಹಂತದ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕೈನೇಸ್ಗಳಿಂದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಬೇಕು, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ದೀಕ್ಷಾ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಕೈನೇಸ್ ಎಂದರೆ ಡಿಬಿಎಫ್4-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ (ಡಿಡಿಕೆ) ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುವ ಸಿಡಿಸಿ7-ಡಿಬಿಎಫ್4 ಕೈನೇಸ್ ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ (ಸಿಡಿಕೆ). ಯೀಸ್ಟ್ ಮತ್ತು ಕ್ಸೆನೋಪಸ್ನಲ್ಲಿನ Cdc45ನ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟಿನ್-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು, CDK ಕ್ರಿಯೆಯ ಕೆಳಮುಖ ಘಟನೆಯು Cdc45 ಅನ್ನು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟಿನ್ಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡುತ್ತಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿವೆ. ಸಿಡಿಸಿ6 ಮತ್ತು ಸಿಡಿಸಿ6 ಮತ್ತು ಸಿಡಿಸಿ6ನ ಸಿಡಿಸಿ-ಅವಲಂಬಿತ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ನಡುವಿನ ಸಂಬಂಧದಿಂದಾಗಿ ಸಿಡಿಸಿ6 ಅನ್ನು ಸಿಡಿಸಿ ಕ್ರಿಯೆಯ ಗುರಿಯೆಂದು ಊಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸಿಡಿಸಿ6ನ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ-ಅವಲಂಬಿತ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಎಸ್ ಹಂತಕ್ಕೆ ಪ್ರವೇಶಿಸಲು ಅಗತ್ಯವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ. ಡಿ. ಡಿ. ಕೆ. ಯ ವೇಗವರ್ಧಕ ಉಪಘಟಕಗಳಾದ ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 7 ಮತ್ತು ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್ ಪ್ರೋಟೀನ್, ಡಿ. ಬಿ. ಎಫ್. 4 ಎರಡೂ ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಲ್ಲಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಎಸ್ ಹಂತದ ಆರಂಭಕ್ಕೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮೂಲದ ಮೇಲೆ Cdc45 ಅನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡಲು Dbf4 ಮತ್ತು Cdc7 ಎರಡೂ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಡಿಡಿಕೆ ಕೈನೇಸ್ನ ಬಂಧನದ ಗುರಿಯು ಎಂಸಿಎಂ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್-ಬದ್ಧ ರೂಪವಾಗಿದೆ. ಡಿಡಿಕೆ ಯ ಡಿಬಿಎಫ್4 ಉಪಘಟಕವು ಡಿಎನ್ಎ-ಬದ್ಧ ಎಂಸಿಎಂ-ಡಿಹೆಚ್ನ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಹರಡುತ್ತದೆ, ಒಂದು ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ನ ಮೆಕ್ಎಂ2 ಮತ್ತು ವಿರುದ್ಧ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ನ ಮೆಕ್ಎಂ4/6 ಅನ್ನು ಸಂಪರ್ಕಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಹೆಚ್ಚಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಕ್ರಯೋಇಎಂ ರಚನೆಗಳು ತೋರಿಸಿದವು. ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2, ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 4 ಮತ್ತು ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 6 ಇವೆಲ್ಲವೂ ಡಿ. ಡಿ. ಕೆ. ಯಿಂದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ನ ತಲಾಧಾರಗಳಾಗಿವೆ ಆದರೆ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 4ರ ಎನ್-ಟರ್ಮಿನಲ್ ಸೆರಿನ್/ಥ್ರೆಯೊನಿನ್-ಸಮೃದ್ಧ ಡೊಮೇನ್ (ಎನ್. ಎಸ್. ಡಿ.) ಮಾತ್ರ ಡಿ. ಡಿ. ಕೆ. ಯ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ. ಎನ್ಎಸ್ಡಿಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮೆಕ್ಮ್ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಪಿಬಿ11, ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ3, ಮತ್ತು ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ2 ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಾದ ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ3, ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ2, ಮತ್ತು ಡಿಪಿಬಿ11 ಅನೇಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತವೆ. ಎಸ್. ಎಲ್. ಡಿ. 3 ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 45 ಒಂದು ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಜಿ11 ಹಂತದಲ್ಲಿಯೂ ಸಹ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಆರಂಭಿಕ ಮೂಲಗಳಲ್ಲಿ ಪೂರ್ವ-ಆರ್. ಸಿ. ಯೊಂದಿಗೆ ಮತ್ತು ಪರಸ್ಪರ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ-ಅವಲಂಬಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ನಂತರದ ಮೂಲಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಡಿ. ಪಿ. ಬಿ. 11 ಮತ್ತು ಎಸ್. ಎಲ್. ಡಿ. 2 ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅಡ್ಡ-ಜೋಡಣೆಯ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ಡಿ. ಪಿ. ಬಿ. 11 ಮತ್ತು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸಹಮೌಲ್ಯಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿವೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸಿವೆ. ಎಸ್. ಎಲ್. ಡಿ. 3 ಮತ್ತು ಎಸ್. ಎಲ್. ಡಿ. 2 ಗಳು ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ ಯಿಂದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದು ಎರಡು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಡಿಪಿಬಿ11 ಗೆ ಬಂಧಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಡಿಪಿಬಿ11 ಎರಡು ಜೋಡಿ ಬಿಆರ್ಸಿಎ1 ಸಿ ಟರ್ಮಿನಸ್ (ಬಿಆರ್ಸಿಟಿ) ಡೊಮೇನ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿತ್ತು, ಇವುಗಳನ್ನು ಫಾಸ್ಫೋಪೆಪ್ಟೈಡ್-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಡೊಮೇನ್ಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಬಿಆರ್ಸಿಟಿ ಡೊಮೇನ್ಗಳ ಎನ್-ಟರ್ಮಿನಲ್ ಜೋಡಿಯು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ3ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಿ-ಟರ್ಮಿನಲ್ ಜೋಡಿಯು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ2ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಯೀಸ್ಟ್ನಲ್ಲಿ ಮೊಳಕೆಯೊಡೆಯುವ ಡಿಎನ್ಎಯ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ-ಅವಲಂಬಿತ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಈ ಎರಡೂ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳು ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಡಿಪಿಬಿ11 ಸಹ ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕ್ರೋಮೋಸೋಮಲ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಾರಂಭ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಭಾಗವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸಿಡಿಸಿ 45 ಮತ್ತು ಎಂಸಿಎಂನೊಂದಿಗೆ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿ. ಪಿ. ಬಿ. 11, ಎಸ್. ಎಲ್. ಡಿ. 2, ಮತ್ತು ಎಸ್. ಎಲ್. ಡಿ. 3 ನಡುವಿನ ಈ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ-ಅವಲಂಬಿತ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿವೆ, ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಅಡ್ಡ-ಜೋಡಿಸುವ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ, ದುರ್ಬಲವಾದ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಪೂರ್ವ-ಲೋಡಿಂಗ್ ಸಂಕೀರ್ಣ (ಪೂರ್ವ-ಎಲ್. ಸಿ.) ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಪೋಲ್, ಜಿಐಎನ್ಎಸ್, ಎಸ್ಎಲ್ಡಿ2 ಮತ್ತು ಡಿಪಿಬಿ11 ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಪೂರ್ವ-ಎಲ್. ಸಿ. ಯು ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ-ಅವಲಂಬಿತ ಮತ್ತು ಡಿ. ಡಿ. ಕೆ-ಅವಲಂಬಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಮೂಲಗಳೊಂದಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಹೊಂದುವ ಮೊದಲು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ. ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಪೂರ್ವ-ಎಲ್. ಸಿ. ಯ ರಚನೆಯ ಮೂಲಕ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ವಿಸ್ತರಣೆಯು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್. ಸಿ.) ರಚನೆಯು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಾರಂಭಕ್ಕೆ ಸಂಭಾವ್ಯ ತಾಣಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ. ಡಬಲ್ ಸ್ಟ್ರ್ಯಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸುತ್ತುವರೆದಿರುವ ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಸಂಕೀರ್ಣಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ರಚನೆಯು ಮೂಲದ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ ಬಿಚ್ಚಲು ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ನೇಮಕಾತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಬದಲಾಗಿ, ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಸಮಯದಲ್ಲಿ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುವ ಪೂರ್ವ-ಆರ್. ಸಿ. ಯು ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಡಿಲಗೊಳಿಸಲು ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ನಿಂದ ಎಸ್ ಹಂತಕ್ಕೆ ಹಾದುಹೋದ ನಂತರ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಮಾತ್ರ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಒಮ್ಮೆ ದೀಕ್ಷಾ ಸಂಕೀರ್ಣವು ರೂಪುಗೊಂಡ ನಂತರ ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶಗಳು ಎಸ್ ಹಂತಕ್ಕೆ ಹಾದುಹೋದ ನಂತರ, ಸಂಕೀರ್ಣವು ಪುನರಾವರ್ತನೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸುವ ಜವಾಬ್ದಾರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε ಮತ್ತು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δಗಳಿಂದ ಮುಂಭಾಗದ ಮತ್ತು ಹಿಂದುಳಿದ ಎಳೆಗಳ ಮೇಲೆ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್, ಎಂಡ್1, ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಸಿ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಲೋಡರ್ ಮತ್ತು ಫೋರ್ಕ್ ಪ್ರೊಟೆಕ್ಷನ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಸೇರಿದಂತೆ ಅನೇಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಂಶಗಳು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು ಮತ್ತು ಸಿಡಿಸಿ45-ಎಂಸಿಎಂ-ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ಅನ್ವೈಂಡಿಂಗ್ನೊಂದಿಗೆ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಸಂಘಟಿಸಲು ಕಾರಣವಾಗಿವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಶಿಥಿಲಗೊಂಡಂತೆ ಟ್ವಿಸ್ಟ್ ಸಂಖ್ಯೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ. ಇದನ್ನು ಸರಿದೂಗಿಸಲು ರಿಥ್ ಸಂಖ್ಯೆ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ, ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಧನಾತ್ಮಕ ಸೂಪರ್ ಕಾಯಿಲ್ಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಸೂಪರ್ ಕಾಯಿಲ್ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕದಿದ್ದರೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯು ಸ್ಥಗಿತಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಈ ಸೂಪರ್ ಕಾಯಿಲ್ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಟೋಪೋಯಿಸೊಮೆರೇಸ್ಗಳು ಕಾರಣವಾಗಿವೆ. ಪ್ರತಿ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಜೀವಕೋಶದಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ನಕಲಿಸಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಡಾಟರ್ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಬೇಸ್ ಜೋಡಣೆ ಮತ್ತು ಸರಪಳಿ ರಚನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ. ಈ ಕಿಣ್ವಗಳು ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಚಲಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು "ಓದುವ" ಮೂಲಕ ಮತ್ತು ಸರಿಯಾದ ಪ್ಯೂರಿನ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಬೇಸ್ಗಳು, ಅಡೆನಿನ್ ಮತ್ತು ಗ್ವಾನೈನ್, ಮತ್ತು ಪಿರಿಮಿಡಿನ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಬೇಸ್ಗಳು, ಥೈಮಿನ್ ಮತ್ತು ಸೈಟೋಸಿನ್ಗಳನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುವ ಮೂಲಕ ನವಜಾತ ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ವಿಸ್ತರಣೆಗೆ ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತವೆ. ಸಕ್ರಿಯಗೊಂಡ ಮುಕ್ತ ಡಿಯೋಕ್ಸಿರೈಬೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ಗಳು ಜೀವಕೋಶದಲ್ಲಿ ಡಿಯೋಕ್ಸಿರೈಬೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ಗಳಾಗಿ (ಡಿ. ಎನ್. ಟಿ. ಪಿ. ಗಳು) ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿವೆ. ಈ ಮುಕ್ತ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಕೊನೆಯದಾಗಿ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ನ 3 '-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲ್ ಗುಂಪಿಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ, ಮುಕ್ತ ಡಿ. ಎನ್. ಟಿ. ಪಿ ಯಿಂದ ಪೈರೋಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬಿಡುಗಡೆಯಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪಾಲಿಮರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 5 'ಮೊನೊಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಅನ್ನು ಒಡ್ಡುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಅದನ್ನು 3' ಆಮ್ಲಜನಕಕ್ಕೆ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಆಗಿ ಬಂಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ತಪ್ಪಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು ಮತ್ತು ಶಕ್ತಿಯುತವಾಗಿ ಅನುಕೂಲಕರವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಸರಿಯಾದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳಿಂದ ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದು. ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುವ ದೋಷಗಳ ಸರಿಯಾದ ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ದುರಸ್ತಿಗೆ ಈ ಗುಣವು ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫೋರ್ಕ್ ಎಂಬುದು ಹೊಸದಾಗಿ ಬೇರ್ಪಟ್ಟ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ಗಳ ನಡುವಿನ ಜಂಕ್ಷನ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದನ್ನು ಲೀಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡಬಲ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ. ಡ್ಯುಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ ಎರಡು ಹೊಸ ಎಳೆಗಳ ನಡುವೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಎಲ್ಲಾ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಹೊಸದಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ಎಳೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು 5 'ರಿಂದ 3' ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಮನ್ವಯದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಎರಡು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತವೆ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε "ಪ್ರಮುಖ" ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ಮೇಲೆ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ನಿರಂತರವಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ಬಿಚ್ಚುವ ಅದೇ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ, ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿರುವ "ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್" ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ಮೇಲೆ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ವಿಭಜಿತ ಅಥವಾ ನಿರಂತರವಾದ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ. ಹಿಂದುಳಿದ ಎಳೆಗಳ ಮೇಲೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ನಿರಂತರ ವಿಸ್ತರಣೆಗಳನ್ನು ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 100 ರಿಂದ 200 ಬೇಸ್ ಉದ್ದವಿರುತ್ತದೆ. ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯ ಉದ್ದನೆಯ ವಿಸ್ತರಣೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಲೇಪಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸೆಕೆಂಡರಿ ಸ್ಟ್ರಕ್ಚರ್ ರಚನೆಯನ್ನು ತಡೆಯುವ ಮೂಲಕ ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಲ್ಲಿ, ಈ ಏಕ-ಎಳೆ ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಎ (ಆರ್ಪಿಎ) ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಹೆಟೆರೊಟ್ರಿಮೆರಿಕ್ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗೂ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಆರ್. ಎನ್. ಎ ಪ್ರೈಮರ್ ಇರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮುಂದಿನ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕಿನ ಚಲನೆಗಳಿಂದ ಸ್ಥಳಾಂತರಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಆರ್ಎನ್ಎ ಎಚ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆಃ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ಬಳಕೆಯಿಂದ ರಚಿಸಲಾದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಮಿಶ್ರತಳಿಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಎಳೆಗಳಿಂದ ತೆಗೆದುಹಾಕುವ ಜವಾಬ್ದಾರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಬಿಟ್ಟುಬಿಡುತ್ತದೆಃ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಜಂಕ್ಷನ್. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α, ಈ ತಾಣಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್ ತೆಗೆದುಹಾಕುವಿಕೆಯಿಂದ ಉಳಿದ ವಿರಾಮಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ, ಆರ್. ಎನ್. ಎ ಪ್ರೈಮರ್ನ ತಕ್ಷಣದ ಮೇಲ್ಭಾಗದ ಡಿಎನ್ಎ ವಿಭಾಗದ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣವು ಸ್ಥಳಾಂತರಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಇದು ಫ್ಲಾಪ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಸೃಷ್ಟಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಫ್ಲಾಪ್ ಅನ್ನು ನಂತರ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ, ಫ್ಲಾಪ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದ ನಂತರ ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿನ ಅಂತರವನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಲಿಗೇಸ್ I ನಿಂದ ಮುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೊಸದಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ 3 '-ಒಹೆಚ್ ಮತ್ತು 5' ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ನಡುವೆ ಉಳಿದಿರುವ ನಿಕ್ಗಳನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕಿನ ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಣ್ಣ ಸ್ವರೂಪದಿಂದಾಗಿ, ಹಿಂದುಳಿದ ಎಳೆಗಳ ಮೇಲೆ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಸಂಭವಿಸುವ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಕಡಿಮೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಲೀಡಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಎಲ್ಲಾ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದ ನಂತರ ಮತ್ತು ನಿಕ್ಗಳನ್ನು ದುರಸ್ತಿ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಪೋಷಕರ ಡ್ಯುಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು 5 'ರಿಂದ 3' ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಎರಡು ಏಕ-ಎಳೆಗಳ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಫೋರ್ಕ್ ಆಗಿ ಬಿಚ್ಚುತ್ತದೆ. ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫೋರ್ಕ್ನ ಚಲನೆಯ ಅದೇ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲಾಗುತ್ತಿರುವ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಆಗಿದೆ. ಇದು ಮೂಲ ಎಳೆಗೆ ಪೂರಕವಾದ ಹೊಸದಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಎಳೆಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನ ಚಲನೆಯ ಅದೇ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ 5 'ರಿಂದ 3' ಸಂಶ್ಲೇಷಿತಗೊಳಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಆರ್. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಪ್ರೈಮೇಸ್ನಿಂದ ಮುಂಭಾಗದ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ 3 'ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ, ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಮುಂಭಾಗದ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ 3' ರಿಂದ 5 'ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε ನಿರಂತರವಾಗಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ಗೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುತ್ತದೆ ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಕೇವಲ ಒಂದು ಪ್ರೈಮರ್ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಿರಂತರ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿ ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ನಿರಂತರವಾಗಿದೆ. ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನ ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನ ಚಲನೆಗೆ ಅನೇಕ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ಬಳಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಓಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಡಿಎನ್ಎಯ ಸಣ್ಣ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ, ಇವುಗಳನ್ನು ಪ್ರೈಮರ್ನ 3 'ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ತುಣುಕುಗಳು ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಲ್ಲಿ 100 ರಿಂದ 400 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳ ಉದ್ದವಿರಬಹುದು. ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕು ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ, ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ ಹಿಂದಿನ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗೆ ಹರಿಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎಯ ಸಣ್ಣ ಭಾಗವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಅದರ 5 'ತುದಿಯನ್ನು ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸುತ್ತದೆ. ಇದು ಆರ್ಎನ್ಎ-ಡಿಎನ್ಎ ಸಿಂಗಲ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಫ್ಲಾಪ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಅದನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಎರಡು ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗಳ ನಡುವಿನ ನಿಕ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಲಿಗೇಸ್ I ನಿಂದ ಮುಚ್ಚಬೇಕು. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕು ಪಕ್ವತೆ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಎರಡು ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದುಃ ಒಂದು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಸಣ್ಣ ಫ್ಲಾಪ್ಗಳನ್ನು ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಇನ್ನೊಂದು ಉದ್ದವಾದ ಫ್ಲಾಪ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ವ್ಯವಹರಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ತನ್ನ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣಕ್ಕೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎ ಅಥವಾ ಆರ್ಎನ್ಎಯ 2 ರಿಂದ 3 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಫೆನ್ 1 ಗಾಗಿ ಒಂದು ಸಣ್ಣ "ಫ್ಲಾಪ್" ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಫ್ಲಾಪ್ನಿಂದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು, ಒಂದು ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಒಂದು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಚಕ್ರಗಳನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ ಮತ್ತು ಫೆನ್1 ಆರ್. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ತೆಗೆದುಹಾಕುವಿಕೆಯನ್ನು ಸಂಘಟಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಹಿಂದುಳಿದ ಎಳೆಗಳಲ್ಲಿ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ನಿಕ್ ಅನ್ನು ಬಿಡಬಹುದು. ಈ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಜೀವಕೋಶಕ್ಕಿಂತ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಬಿಗಿಯಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯಬೇಕಾದ ದೊಡ್ಡ ಫ್ಲಾಪ್ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಅನಿಯಂತ್ರಿತ ಫೆನ್1/ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಜೀವಕೋಶವು ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಡಿಎನ್ಎ2 ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ದೀರ್ಘ ಫ್ಲಾಪ್ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಮತ್ತು ಸಂಸ್ಕರಿಸಲು ಪರ್ಯಾಯ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಈ ಉದ್ದವಾದ ಮಡಿಕೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. 2ನ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಅಗತ್ಯವಾಗಿದ್ದು, ಸಣ್ಣ ಮಡಿಕೆಗಳನ್ನು ಫೆನ್ 1 ಸಂಸ್ಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ಮೇಲೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ ಲೋಡ್ ಮಾಡುವುದು ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸ್ಥಳಕ್ಕೆ ಬಹಳ ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕು ಪಕ್ವತೆಯು ಒಂದು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದ್ದು, ಇದು ನವಜಾತ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ತಕ್ಷಣ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಪೋಷಕ ಡಿಎನ್ಎ ಡ್ಯುಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಬಿಚ್ಚಿದ ನಂತರ, ಎರಡು ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದ ನಂತರ, ಪೋಷಕ ಜೀನೋಮ್ನ ಎರಡು ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಕಾರ್ಯವು ಹೆಚ್ಚು ವಿಶೇಷವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಕಿರಿದಾದ ಸ್ಥಳೀಕರಣಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಸಾಧಿಸುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ, ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುವ ಮೂರು ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳಿವೆಃ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α, ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ, ಮತ್ತು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε. ಜೀವಕೋಶದ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಗೆ ಈ ಮೂರು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳಿಗೆ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಪ್ರೈಮರ್ ಅಗತ್ಯವಿರುವುದರಿಂದ, ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α (ಪೋಲ್ α) ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೈಮೇಸ್ ಆಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಪೋಲ್ α ಒಂದು ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಈ ಸಂಕೀರ್ಣವು 10 ರಿಂದ 20 ಡಿಎನ್ಎ ಬೇಸ್ಗಳ ನಂತರ ಆರ್ಎನ್ಎಯ ಸಣ್ಣ 10 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ವಿಸ್ತರಣೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುವ ಮೂಲಕ ಪ್ರೈಮಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಸಾಧಿಸುತ್ತದೆ. ಮುಖ್ಯವಾಗಿ, ಈ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಕ್ರಿಯೆಯು ಲೀಡಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಹಿಂದುಳಿದ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರತಿ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕಿನ 5 'ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಪೋಲ್ α ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಮುಂದುವರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮುಂದುವರಿಸಲು ಮತ್ತೊಂದು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಸ್ವಿಚಿಂಗ್ಗೆ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಲೋಡರ್ಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಎಲ್ಲಾ ಮೂರು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ಸಂಘಟಿತ ಕ್ರಿಯೆಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ ಎಂದು ಸಾಬೀತಾಗಿದೆಃ ಪ್ರೈಮಿಂಗ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಪೋಲ್ α, ಲೀಡಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಪೋಲ್ ε, ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ನಿರಂತರವಾಗಿ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗುವ ಪೋಲ್ δ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α (ಪೋಲ್ α): ಸಣ್ಣ ವೇಗವರ್ಧಕ ಉಪಘಟಕ (ಪ್ರಿಎಸ್) ಮತ್ತು ದೊಡ್ಡ ವೇಗವರ್ಧಕವಲ್ಲದ (ಪ್ರಿಎಲ್) ಉಪಘಟಕದೊಂದಿಗೆ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ನ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಆಲ್ಫಾದಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಅವಕಾಶ ನೀಡುತ್ತದೆ. ಮುಂಭಾಗದ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕಿನ ಪ್ರಾರಂಭದಲ್ಲಿ ಮಂದಗತಿಯ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ ಮೇಲೆ ಒಮ್ಮೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಿ ಉಪಘಟಕಗಳು ಪ್ರೈಮೇಸ್ ಆಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ, ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪೋಲ್ α ಹೊಸದಾಗಿ ರೂಪುಗೊಂಡ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಉದ್ದಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಸುಮಾರು 20 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳ ನಂತರ, ಉದ್ದವನ್ನು ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿ ಪೋಲ್ ε ಮತ್ತು ಮಂದಗತಿಯ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿ ಪೋಲ್ δ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ (ಪೋಲ್ δ): ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರೊಸೆಸಿವ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡಿಂಗ್, 3 '-> 5' ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ವಿವೊದಲ್ಲಿ, ಇದು ಮಂದಗತಿಯ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಮತ್ತು ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ ಎರಡರಲ್ಲೂ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಮುಖ್ಯ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಆಗಿದೆ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε (ಪೋಲ್ ε): ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರೊಸೆಸಿವ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡಿಂಗ್, 3 '-> 5' ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ವಿವೋದಲ್ಲಿ ಇದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಪೋಲ್ δ. ಸಿಡಿಸಿ45-ಎಂಸಿಎಂ-ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣದ ದೋಷ ಪರಿಶೀಲನೆಯಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕೇಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ ನಿಕಟ ಸಂಪರ್ಕದಲ್ಲಿರಬೇಕು. ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಅನ್ವೈಂಡಿಂಗ್ ಸಂಭವಿಸಿದರೆ, ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯ ದೊಡ್ಡ ಪ್ರದೇಶಗಳು ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಇದು ಡಿಎನ್ಎ ಹಾನಿ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಬಹುದು ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎ ದುರಸ್ತಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸಬಹುದು. ಈ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ತಡೆಯಲು, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ವಿಶೇಷ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಇವು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಹೆಲಿಕೇಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ನಡುವಿನ ಭೌತಿಕ ಸಂವಹನಕ್ಕಾಗಿ ಡಾಕಿಂಗ್ ತಾಣಗಳನ್ನು ಸಹ ಒದಗಿಸುತ್ತವೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಡ್ಯುಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಅನ್ವೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಲು, ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಾಗಿ ಎರಡು ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಲು ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಬಿಚ್ಚಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ವರ್ಣತಂತು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಡಿಲಗೊಳಿಸಲು ಡಿಎನ್ಎ ಹೆಲಿಕೇಸ್ಗಳು ಕಾರಣವಾಗಿವೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಹೆಲಿಕ್ಕೇಸ್ಗಳು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿವೆ. ಹೆಲಿಕೇಸ್ನ ವೇಗವರ್ಧಕ ಕೇಂದ್ರವು ಆರು ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ (ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. 2-7) ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದೆ, ಇದು ಹೆಕ್ಸಾಮೆರಿಕ್ ವಲಯವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎಯಿಂದ ದೂರದಲ್ಲಿ, ಮೆಕ್ಮ್2-7 ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಒಂದೇ ಹೆಟೆರೊಹೆಕ್ಸಾಮರ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸುತ್ತಲೂ ತಲೆಯಿಂದ ತಲೆಗೆ ಡಬಲ್ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ಗಳಾಗಿ ಲೋಡ್ ಆಗುತ್ತವೆ. ಮೆಕ್ಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಗಳಿಗೆ ನೇಮಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಮರುಹಂಚಿಕೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗೆ ಅವುಗಳ ಸ್ಥಳೀಕರಣವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಲೋಡ್ ಆಗಬಹುದು, ಮತ್ತು ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಸಿ45 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮತ್ತು ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫೋರ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಸಕ್ರಿಯ ಸಿಡಿಸಿ45-ಎಂಸಿಎಂ-ಜಿಐಎನ್ಎಸ್ (ಸಿಎಮ್ಜಿ) ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಗೆ ಎಸ್ ಹಂತದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಎಂಸಿಎಂ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಸಿಎಮ್ಜಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ನ ಸುತ್ತಲೂ ವಿವಿಧ ನಿಯಂತ್ರಕ ಅಂಶಗಳು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿ 'ರೆಪ್ಲಿಸೋಮ್ ಪ್ರೊಗ್ರೆಷನ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್' ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಿ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರ ರಚನೆಯನ್ನು ಅದರ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರತಿರೂಪಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಇನ್ನೂ ಸರಿಯಾಗಿ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾದ ಸಿಎಮ್ಜಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಮತ್ತು ರೆಪ್ಲಿಸೋಮ್ ಪ್ರೊಗ್ರೆಷನ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಒಂದೇ ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ ರಿಂಗ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, ಮೂಲದಲ್ಲಿರುವ ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಡಬಲ್ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ ಅನ್ನು ಇನಿಶಿಯೇಷನ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಭಾಗವಾಗಿ ಎರಡು ಏಕ ಹೆಕ್ಸಾಮೆರಿಕ್ ರಿಂಗ್ಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಪ್ರತಿ ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ರಿಂಗ್ ಪ್ರತಿ ಮೂಲದಿಂದ ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾದ ಎರಡು ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫೋರ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಸಿಎಮ್ಜಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ನ ಕೋರ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಅನ್ನು ಸಡಿಲಗೊಳಿಸಲು ಸಂಪೂರ್ಣ ಸಿ. ಎಂ. ಜಿ. ಸಂಕೀರ್ಣದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ, ಮತ್ತು ಸಿ. ಡಿ. ಸಿ. 45-ಎಂ. ಸಿ. ಎಂ.-ಜಿ. ಐ. ಎನ್. ಎಸ್. ನ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಆಗಿದೆ. ಸಿ. ಟಿ. ಎಫ್. 4 ಮತ್ತು ಎಂಡ್1 ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಸಿ. ಎಂ. ಜಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಸಿ. ಟಿ. ಎಫ್. 4 ಮತ್ತು ಎಂಡ್1 ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ. ಸಿಟಿಎಫ್ 4/ಮತ್ತು 1 ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಸಿಎಂಜಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α ಎರಡರೊಂದಿಗೂ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತವೆ. ಸಿಟಿಎಫ್ 4 ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α ಪೂರಕ ಅಂಶವಾಗಿದೆ, ಇದು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α ಅನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಮೂಲಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಎಮ್ಆರ್ಸಿ1 ಮತ್ತು ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಎಮ್ಆರ್ಸಿ1/ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಸಿಎಮ್ಜಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಲೀಡಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. ಎಮ್ಆರ್ಸಿ1 ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ε ಮತ್ತು ಎಂಸಿಎಂ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ. ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಮತ್ತು ಲೀಡಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರ್ಯಾಂಡ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ನಡುವಿನ ಈ ನೇರ ಸಂಪರ್ಕದ ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಯು ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಮಾನವ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಂದ ಒತ್ತಿಹೇಳುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಸಮರ್ಥ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಪ್ರಗತಿಗೆ ಎಮ್ಆರ್ಸಿ1/ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಹೆಲಿಕೇಸ್ಗಳ ಜೋಡಣೆ ಮತ್ತು ಲೀಡಿಂಗ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ವಿಸ್ತರಿಸುವ ಜೀವಕೋಶದ ಪರಮಾಣು ಪ್ರತಿಜನಕ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳಿಗೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸಲು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಅಂಶಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಅರೆ ಮುಚ್ಚಿದ 'ಕೈ' ರಚನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ, ಇದು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಈ ರಚನೆಯು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗೆ ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಹಿಡಿದಿಡಲು, ಸಕ್ರಿಯ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಟಿಪಿಗಳನ್ನು ಅಳವಡಿಸಲು ಮತ್ತು ಹೊಸದಾಗಿ ರೂಪುಗೊಂಡ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ರಚನೆಯು ಮಾದರಿ ಡಿಎನ್ಎಯೊಂದಿಗೆ ನಿರಂತರ ಸ್ಥಿರವಾದ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್ಎ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬಲಪಡಿಸಲು, ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಲೈಡಿಂಗ್ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಲು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತವೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಲ್ಲಿ, ಸ್ಲೈಡಿಂಗ್ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಎಂಬುದು ಪ್ರೊಲಿಫೆರೇಟಿಂಗ್ ಸೆಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಆಂಟಿಜೆನ್ (ಪಿಸಿಎನ್ಎ) ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಹೋಮೋಟ್ರಿಮರ್ ರಿಂಗ್ ರಚನೆಯಾಗಿದೆ. ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಉಂಗುರವು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುವ ಮೇಲ್ಮೈಗಳೊಂದಿಗೆ ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ಗೆ ಸುರಕ್ಷಿತವಾಗಿ ಕಟ್ಟಿಹಾಕುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳ ಪಿಸಿಎನ್ಎ-ಅವಲಂಬಿತ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೇಲೆ ಗಮನಾರ್ಹ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಬೀರುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಪಿಸಿಎನ್ಎಗಳು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು 1,000 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಸಮರ್ಥವಾಗಿವೆ. ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಆಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಅವಕಾಶ ಕಲ್ಪಿಸುವ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿನ ಅತ್ಯಂತ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಂವಹನ ವೇದಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಪಿಸಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳಿಗೆ ನಿಯಂತ್ರಕ ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಎಂದೂ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಂಶ ಸಿ ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಡಿಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಸುತ್ತುವರೆದಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಬೇಕು. ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿ, ಪಿಸಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡುವುದು ಅಪರೂಪದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯು ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ಕೊನೆಗೊಳಿಸುವವರೆಗೆ ನಿರಂತರವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಮಂದಗತಿಯ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನಲ್ಲಿ, ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ δ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿ ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕಿನ ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಲೋಡ್ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಓಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕು ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಈ ನಿರಂತರ ಪ್ರಾರಂಭಕ್ಕೆ ಸಮರ್ಥ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಾಗಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಲೋಡಿಂಗ್ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಲೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಸಿ (ಆರ್ಎಫ್ಸಿ) ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆರ್ಎಫ್ಸಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಐದು ಎಟಿಪಿ ಕೇಂದ್ರಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದೆಃ ಆರ್ಎಫ್ಸಿ1, ಆರ್ಎಫ್ಸಿ2, ಆರ್ಎಫ್ಸಿ3, ಆರ್ಎಫ್ಸಿ4 ಮತ್ತು ಆರ್ಎಫ್ಸಿ5. ಆರ್ಎಫ್ಸಿ ಪ್ರೈಮರ್-ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಜಂಕ್ಷನ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಈ ಸ್ಥಳಗಳಲ್ಲಿ ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಲೋಡ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಹೋಮೋಟ್ರಿಮರ್ ಅನ್ನು ಆರ್ಎಫ್ಸಿ ಎಟಿಪಿ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನದಿಂದ ತೆರೆಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಅದರ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಸುಲಭಗೊಳಿಸಲು ಸರಿಯಾದ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಲೋಡರ್ಗಳು ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯಿಂದ ಪಿ. ಸಿ. ಎನ್. ಎ. ಅನ್ನು ಇಳಿಸಬಹುದು; ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಕೊನೆಗೊಳಿಸಬೇಕಾದರೆ ಈ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಗಿತಗೊಂಡ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಡಿಯೋಕ್ಸಿನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ಗಳ (ಡಿಎನ್ಟಿಪಿಗಳು) ಕೊರತೆಯಿಂದ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎ ಹಾನಿಯಿಂದ ನಿಲ್ಲಿಸಬಹುದು, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಒತ್ತಡಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಈ ನಿಲುಗಡೆ ಸ್ಥಗಿತಗೊಂಡ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಎಂದು ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಫೋರ್ಕ್ ಪ್ರೊಟೆಕ್ಷನ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಹಾನಿ ಅಥವಾ ಇತರ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸುವವರೆಗೆ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಅನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ನಿಲುಗಡೆ ಮತ್ತಷ್ಟು ಡಿಎನ್ಎ ಹಾನಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಿದರೆ ನಿಲುಗಡೆ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮುಕ್ತಾಯವು ವರ್ಣತಂತುಗಳು ವೃತ್ತಾಕಾರದಲ್ಲಿವೆಯೇ ಅಥವಾ ರೇಖೀಯವಾಗಿವೆಯೇ ಎಂಬುದರ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ರೇಖೀಯ ಅಣುಗಳಿಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ, ವೃತ್ತಾಕಾರದ ವರ್ಣತಂತುಗಳು ಸಂಪೂರ್ಣ ಅಣುವನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲು ಸಮರ್ಥವಾಗಿವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಎರಡು ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುಗಳು ಒಟ್ಟಿಗೆ ಸಂಪರ್ಕದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ. ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಎರಡು ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುಗಳನ್ನು ಟೈಪ್ II ಟೊಪೊಯಿಸೊಮೆರೇಸ್ನಿಂದ ವಿಘಟಿಸುವ ಮೂಲಕ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಟೈಪ್ II ಟೋಪೋಐಸೋಮರೇಸ್ಗಳನ್ನು ರೇಖೀಯ ಎಳೆಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸಹ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಜೀವಕೋಶದೊಳಗಿನ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ನಲ್ಲಿ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿ ಮಡಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಹಿಂದೆ ಹೇಳಿದಂತೆ, ರೇಖೀಯ ವರ್ಣತಂತುಗಳು ವೃತ್ತಾಕಾರದ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಕಾಣದ ಮತ್ತೊಂದು ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಎದುರಿಸುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪ್ರಾರಂಭಕ್ಕೆ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ ಅಗತ್ಯವಿರುವುದರಿಂದ, ಸಂಪೂರ್ಣ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ಅನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸುವಲ್ಲಿ ಮಂದಗತಿಯ ಎಳೆ ಅನನುಕೂಲವಾಗಿದೆ. ಪ್ರಮುಖ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ 5 'ಟರ್ಮಿನಸ್ ಅನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಲು ಒಂದೇ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದಾದರೂ, ಅನೇಕ ಆರ್ಎನ್ಎ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಲ್ಯಾಗಿಂಗ್ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ, ಇದು ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಸೃಷ್ಟಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ 3 'ತುದಿಯನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೇರಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಅಂಶದಿಂದಾಗಿ ಇದು ಸಮಸ್ಯೆಯೊಂದಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಮೂಲ ಎಳೆಗಳ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನ 3 '-5' ಕ್ರಿಯೆಯು ಒಕಾಜಾಕಿ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ದುರಸ್ತಿ ಮಾಡಿದಾಗ ಮೂಲ ಎಳೆಗಳ 3 'ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಸಣ್ಣ ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎ (ಎಸ್ಎಸ್ಡಿಎನ್ಎ) ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಬಿಡುತ್ತದೆ. ಮೂಲ ವರ್ಣತಂತುಗಳ ವಿರುದ್ಧ ತುದಿಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳು ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕುಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುವುದರಿಂದ, ಪ್ರತಿ ಎಳೆ ಒಂದು ತುದಿಯಲ್ಲಿ ಹಿಂದುಳಿದ ಎಳೆಗಳಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಕಾಲಾನಂತರದಲ್ಲಿ ಇದು ಎರಡೂ ಮಗಳು ವರ್ಣತಂತುಗಳ ಹಂತಹಂತವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಇದನ್ನು ಅಂತಿಮ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಮಸ್ಯೆ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಟೆಲೋಮಿಯರ್ ಪ್ರದೇಶಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಲೋಮರೇಸ್ ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ. ಟೆಲೋಮಿಯರ್ಗಳು ಪೋಷಕ ವರ್ಣತಂತುಗಳ 3 'ತುದಿಯನ್ನು ಮಗಳು ಎಳೆಗಳ 5' ತುದಿಯನ್ನು ಮೀರಿ ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತವೆ. ಈ ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎ ರಚನೆಯು ಟೆಲೋಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ನೇಮಿಸುವ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮರೇಸ್ ಒಂದು ವಿಶೇಷ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಆಗಿದ್ದು ಅದು ಅನೇಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಉಪಘಟಕಗಳು ಮತ್ತು ಆರ್ಎನ್ಎ ಘಟಕವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮೆರೇಸ್ನ ಆರ್. ಎನ್. ಎ ಘಟಕವು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಯ ಏಕ ಎಳೆತದ 3 'ತುದಿಯನ್ನು ತಲುಪುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಟೆಲೋಮೆರಿಕ್ ಅನುಕ್ರಮದ 1.5 ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮರೇಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಉಪಘಟಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಟೆಲೋಮರೇಸ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಅಥವಾ ಟಿಇಆರ್ಟಿ ಎಂಬ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಆಗಿದೆ. ಟಿಇಆರ್ಟಿ ಟೆಲೋಮರೇಸ್ ಆರ್ಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ನ ಅಂತ್ಯದವರೆಗೆ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಬೇರ್ಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಪೋಷಕರ ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುವಿನ 3 'ತುದಿಯ ವಿಸ್ತರಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅಗತ್ಯವಿರುವಷ್ಟು ಬಾರಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಬಹುದು. ಈ 3 'ಸೇರ್ಪಡೆಯು ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೂಲಕ ಮಗಳು ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ನ 5' ತುದಿಯನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಲು ಒಂದು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಟೆಲೋಮೆರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಟೆಲೋಮೆರ್-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತವೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಅಡೆತಡೆಗಳು ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಎರಡು ದಿಕ್ಕುಗಳಲ್ಲಿ ಇರುತ್ತದೆ; ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದೊಳಗೆ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದ ಪ್ರತಿ ತುದಿಯಲ್ಲಿ ರಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳು ಆರಂಭಿಕ ಪ್ರಾರಂಭದ ಹಂತದಿಂದ ಪರಸ್ಪರ ದೂರ ಹೋಗುತ್ತವೆ. ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟ್ಗಳಲ್ಲಿ, ಎರಡು ದಿಕ್ಕಿನ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ವೃತ್ತಾಕಾರದ ವರ್ಣತಂತುಗಳ ಮೇಲೆ ಒಂದು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮೂಲದ ಆರಂಭಿಕ ಆರಂಭದಿಂದ ವಿರುದ್ಧವಾದ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಕೊನೆಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಈ ಮುಕ್ತಾಯ ಪ್ರದೇಶಗಳು ಟರ್ ಸೈಟ್ಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. ಈ ಟರ್ ಸೈಟ್ಗಳು ಟಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ನಿಂದ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ. ಟೆರ್-ಟಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಕೊನೆಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮುಕ್ತಾಯವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎರಡು ಸಕ್ರಿಯ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲಗಳ ನಡುವಿನ ಎರಡು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳ ಘರ್ಷಣೆಯ ಮೂಲಕ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಘರ್ಷಣೆಯ ಸ್ಥಳವು ಮೂಲ ಗುಂಡಿನ ಸಮಯವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ರೀತಿಯಾಗಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಸ್ಥಗಿತಗೊಂಡರೆ ಅಥವಾ ಕುಸಿದರೆ, ವಿರುದ್ಧ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಪ್ರಯಾಣಿಸುವ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಆ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ನಕಲಿಸುವುದನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಿದಾಗ ಸೈಟ್ನ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ರಕ್ಷಿಸಬಹುದು. ಜೀನೋಮ್ನ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ವಿವಿಧ ಸ್ಥಳಗಳಲ್ಲಿ ಆರ್ಎಫ್ಬಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿಂದ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರೋಗ್ರಾಮ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ ಅಡೆತಡೆಗಳು (ಆರ್ಎಫ್ಬಿಗಳು) ಇವೆ, ಅವು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳನ್ನು ಕೊನೆಗೊಳಿಸಲು ಅಥವಾ ವಿರಾಮಗೊಳಿಸಲು ಸಮರ್ಥವಾಗಿವೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಕಾರ್ಖಾನೆಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಳೀಯ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ನಡೆಯುತ್ತದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ನಿಂತಿರುವ ಡಿಎನ್ಎ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಚಲಿಸುವ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ದೃಷ್ಟಿಕೋನಕ್ಕೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಕಾರ್ಖಾನೆಗಳ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯು ಹೊರಹೊಮ್ಮಿತು, ಅಂದರೆ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗಳು ಕೆಲವು ನಿಶ್ಚಲವಾದ 'ಕಾರ್ಖಾನೆ' ಪ್ರದೇಶಗಳ ಕಡೆಗೆ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿವೆ, ಅದರ ಮೂಲಕ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎಳೆಗಳು ಕನ್ವೇಯರ್ ಬೆಲ್ಟ್ಗಳಂತೆ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತವೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ನಿಯಂತ್ರಣ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಸನ್ನಿವೇಶದಲ್ಲಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಡುವ ಬಿಗಿಯಾಗಿ ಆಯೋಜಿಸಲಾದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಮೂಲಕ ಪ್ರಗತಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪೂರ್ವ-ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳ (ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿಗಳು) ರಚನೆ ಮತ್ತು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಿಂದ ಬಿಗಿಯಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ಗಳ (ಸಿಡಿಎಕ್ಸ್, ಸಿಡಿಕೆಗಳು) ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಸೈಕ್ಲಿನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸೈಕ್ಲಿನ್ ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ಗಳ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳು ಜಿ1 ನಿಂದ ಎಸ್-ಹಂತಕ್ಕೆ ಪರಿವರ್ತನೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಿವೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ1 ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಮಟ್ಟದ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ. ಚಟುವಟಿಕೆಯಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಕಡಿಮೆ ಮಟ್ಟದ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಹೊಸ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳ ರಚನೆಗೆ ಅವಕಾಶ ನೀಡುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಹೊಸದಾಗಿ ರೂಪುಗೊಂಡ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿಗಳಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಉಳಿದ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮಟ್ಟವು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಉನ್ನತ ಮಟ್ಟದ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ಮತ್ತು ಹೊಸ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ರಚನೆಯನ್ನು ತಡೆಯಲು ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿದ ನಂತರ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ವಿಭಜಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಎಸ್ ಹಂತ, ಜಿ 2 ಮತ್ತು ಎಂ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ. ಡಿ. ಕೆ ಮಟ್ಟಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುವುದರಿಂದ ಯಾವುದೇ ಹೊಸ ಪೂರ್ವ-ಆರ್ಸಿ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಜೀವಕೋಶ ವಿಭಜನೆ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುವವರೆಗೆ ಯಾವುದೇ ಆರಂಭವು ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಇವೆಲ್ಲವೂ ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಸೈಕ್ಲಿನ್ ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ಗಳ ಜೊತೆಗೆ ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಅನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಹೊಸ ಸುತ್ತಿನ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ತಡೆಯಬಹುದು ಎಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದನ್ನು ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1ನ ಅವನತಿಯ ಮೂಲಕ ಮತ್ತು ಜೆಮಿನಿನ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಮೂಲಕ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಜೆಮಿನಿನ್ ಸಿ. ಡಿ. ಟಿ. 1 ಗೆ ಬಿಗಿಯಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮರು-ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಮುಖ ಪ್ರತಿಬಂಧಕವೆಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ. ಜೆಮಿನಿನ್ ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ಎಸ್-ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮೆಟಾಫೇಸ್-ಅನಾಫೇಸ್ ಪರಿವರ್ತನೆಯಲ್ಲಿ ಅವನತಿ ಹೊಂದುತ್ತದೆ, ಬಹುಶಃ ಅನಾಫೇಸ್ ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ (ಎ. ಪಿ. ಸಿ.) ಸರ್ವವ್ಯಾಪಿಯಾಗುವ ಮೂಲಕ. ಜೀವಕೋಶವು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ವಿಭಜನೆಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರಗತಿ ಹೊಂದುತ್ತದೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ವಿವಿಧ ಜೀವಕೋಶ ಚಕ್ರ ತಪಾಸಣಾ ಕೇಂದ್ರಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಅವಧಿಯುದ್ದಕ್ಕೂ ಇರುತ್ತವೆ. ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಜಿ1, ಅಥವಾ ನಿರ್ಬಂಧದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಾರಂಭವು ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆಯೋ ಇಲ್ಲವೋ ಅಥವಾ ಜೀವಕೋಶವನ್ನು ಜಿ0 ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುವ ವಿಶ್ರಾಂತಿ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದ ಜಿ0 ಹಂತದ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಒಂದು ಸುತ್ತಿನ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಮಿನಿಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ನಿರ್ವಹಣಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಎಸ್-ಹಂತಕ್ಕೆ ಪರಿವರ್ತನೆಯು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ರೆಪ್ಲಿಕೇಷನ್ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಜೀವಕೋಶ ವಿಭಜನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಆನುವಂಶಿಕ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಸಂರಕ್ಷಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ, ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯೊಂದಿಗೆ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಬೇಕು. ಈ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಸಾಧಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಕೆಲವು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ, ಅವು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ದೋಷಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಜೀನೋಮಿಕ್ ಸಮಗ್ರತೆಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎ ದುರಸ್ತಿಗೆ ಸಮಯವನ್ನು ಅನುಮತಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ ಈ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರವನ್ನು ಮಿಟೋಸಿಸ್ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಕೆಲವು ಡಿಎನ್ಎ ದುರಸ್ತಿ ಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಸಹ ತೊಡಗಿಕೊಂಡಿವೆ, ಆದರೆ ಅವು ಮತ್ತಷ್ಟು ಹಾನಿಯನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನ ರಚನೆಯನ್ನು ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ. ರೂಪಾಂತರಗಳು ಅಥವಾ ಇತರ ವರ್ಣತಂತು ವೈಪರೀತ್ಯಗಳನ್ನು ಸಂತತಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸುವುದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಈ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಅತ್ಯಗತ್ಯ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ ಮತ್ತು ಎರಡು ಫಾಸ್ಫಾಟಿಡಿಲಿನೊಸಿಟಾಲ್ 3-ಕೈನೇಸ್-ಸಂಬಂಧಿತ ಕೈನೇಸ್ಗಳು (ಪಿಐಕೆಕೆಗಳು), ಎಟಿಆರ್ ಮತ್ತು ಎಟಿಎಂ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ. ಎಟಿಆರ್ ಮತ್ತು ಎಟಿಎಂ ಎರಡೂ ಗುರಿ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ, SQ/TQ ಮೋಟಿಫ್, ಆದರೆ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ವೈಯಕ್ತಿಕ ಪಾತ್ರಗಳು ಭಿನ್ನವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಡಿಎನ್ಎ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಬ್ರೇಕ್ಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರವನ್ನು ಬಂಧಿಸುವಲ್ಲಿ ಎಟಿಆರ್ ತೊಡಗಿದೆ. ಎ. ಟಿ. ಆರ್.-ಇಂಟರಾಕ್ಟಿಂಗ್-ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಎ. ಟಿ. ಆರ್. ಐ. ಪಿ.) ಎಂಬ ಕಡ್ಡಾಯ ತಪಾಸಣಾ ಕೇಂದ್ರ ಪಾಲುದಾರಿಕೆಯನ್ನು ಎ. ಟಿ. ಆರ್. ಹೊಂದಿದೆ, ಮತ್ತು ಈ ಎರಡು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಒಟ್ಟಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಎ (ಆರ್. ಪಿ. ಎ.) ಯಿಂದ ಲೇಪಿತವಾಗಿರುವ ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿ. ಎನ್. ಎ. ಗೆ ಸ್ಪಂದಿಸುತ್ತವೆ. ಏಕ-ಎಳೆ ಡಿಎನ್ಎ ರಚನೆಯು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಒತ್ತಡದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ. ಜೀನೋಮ್ ಸಮಗ್ರತೆಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಎ. ಟಿ. ಆರ್-ಎ. ಟಿ. ಆರ್. ಐ. ಪಿ. ಯು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರವನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಆರ್ಪಿಎ ಮತ್ತು ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ಗಳಂತೆಯೇ ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮೇಲೆ ಎಟಿಆರ್ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಹಾನಿಯ ಕೆಳಭಾಗದ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುವಲ್ಲಿ ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಟ್ರ್ಯಾಕ್ಟ್ಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆಯು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ. ಒಮ್ಮೆ ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸಾಕಷ್ಟು ಉದ್ದವಾದಾಗ, ಆರ್ಪಿಎಯೊಂದಿಗೆ ಲೇಪಿತವಾದ ಸಿಂಗಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎಟಿಆರ್-ಎಟಿಆರ್ಐಪಿ ಅನ್ನು ನೇಮಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಲು, ಎಟಿಆರ್ ಕೈನೇಸ್ ಸಂವೇದಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ, ಅದು ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಒತ್ತಡದ ಮಾನ್ಯ ಸ್ಥಳಕ್ಕೆ ಸ್ಥಳೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ಗ್ರಹಿಸುತ್ತದೆ. ಆರ್. ಎ. ಡಿ. 9-ಎಚ್. ಯು. ಎಸ್. 1-ರಾಡ್1 (<ಐ. ಡಿ. 1>) ಹೆಟೆರೊಟ್ರಿಮೆರಿಕ್ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಮತ್ತು ಅದರ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಲೋಡರ್ ಆರ್. ಎಫ್. ಸಿ. ಆರ್. ಎ. ಡಿ. ಎನ್. ಎ ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. RFCRad17 ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಲೋಡರ್ 9-1-1 ಅನ್ನು ಹಾನಿಗೊಳಗಾದ ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ 9-1-1 ಇರುವಿಕೆಯು ಎಟಿಆರ್-ಎಟಿಆರ್ಐಪಿ ಮತ್ತು ಟಿಒಪಿಬಿಪಿ1 ಮತ್ತು ಎಮ್ಆರ್ಸಿ1/ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ಗಳಂತಹ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಮಧ್ಯವರ್ತಿಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಗುಂಪಿನ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸುಲಭಗೊಳಿಸಲು ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ. ಟಿಒಪಿಬಿಪಿ1 9-1-1 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ರಾಡ್9 ಘಟಕದೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ನೇಮಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಿಎಚ್ಕೆ1 ಅನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ ಮಾಡುವ ಎಟಿಆರ್-ಎಟಿಆರ್ಐಪಿ ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಎ. ಟಿ. ಆರ್.-ಎ. ಟಿ. ಆರ್. ಐ. ಪಿ. ಯ ಸಂಪೂರ್ಣ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಎಂ. ಆರ್. ಸಿ. 1/ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ ಸಹ ಅಗತ್ಯವಾಗಿದೆ, ಇದು ಸಿಎಚ್ಕೆ 1 ಅನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರಮುಖ ಕೆಳಭಾಗದ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಎಫೆಕ್ಟರ್ ಕೈನೇಸ್ ಆಗಿದೆ. ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಒಂದು ಅಂಶವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸಿಎಚ್ಕೆ 1 ನೊಂದಿಗೆ ಡಾಕಿಂಗ್ ಮಾಡಲು ಒಂದು ಡೊಮೇನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕ್ಲಾಸ್ಪಿನ್ನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆಃ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಚೆಕ್ಪಾಯಿಂಟ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವುದು. ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರವನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಮತ್ತು ಅಪೂರ್ಣ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎ ಹಾನಿಯೊಂದಿಗೆ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮಿಟೋಸಿಸ್ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲು ಸಿಎಚ್ಕೆ 1 ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಎಟಿಆರ್-ಸಿಎಚ್ಕೆ1 ತಪಾಸಣಾ ಕೇಂದ್ರದ ಕಾರ್ಯಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರವನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎ ದುರಸ್ತಿ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಸಮಯವನ್ನು ಅನುಮತಿಸಲು ಸಿಎಚ್ಕೆ1-ಅವಲಂಬಿತ ಸಿಡಿಕೆ ಪ್ರತಿಬಂಧವು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ, ಇದು ಹಾನಿಗೊಳಗಾದ ಡಿಎನ್ಎಯ ಆನುವಂಶಿಕತೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಸಿಎಚ್ಕೆ1-ಅವಲಂಬಿತ ಸಿಡಿಕೆ ಪ್ರತಿಬಂಧವು ಎಸ್ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಮೂಲ ಗುಂಡಿನ ದಾಳಿಯನ್ನು ತಡೆಯುವಲ್ಲಿ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಮುಂದುವರಿದ ಡಿಎನ್ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಒತ್ತಡ ಮತ್ತು ಸಂಭಾವ್ಯ ಜೀನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಜೀನೋಮ್ನ ರಕ್ಷಣೆಗೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಜೀವಕೋಶ-ಚಕ್ರ ಬಂಧನವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಕ್ಯಾಸ್ಕೇಡ್ ಅನ್ನು ಆಫ್ ಮಾಡುವವರೆಗೆ, ಜೀನೋಮ್ನ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಾರಂಭವನ್ನು ತಡೆಯುವ ಮೂಲಕ ಏಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲದ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ಸಂಭಾವ್ಯ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ಎಟಿಆರ್-ಸಿಎಚ್ಕೆ 1 ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಮತ್ತಷ್ಟು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ಗಳ ಮೂಲಕ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯಾಗುವ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ನ ಸೀಮಿತ ಜಾಗದೊಳಗೆ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳಲು ಬಿಗಿಯಾಗಿ ಜೋಡಿಸಬೇಕು. ವರ್ಣತಂತುಗಳನ್ನು ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಆಕ್ಟಾಮರ್ನ ಸುತ್ತ 147 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ಗಳನ್ನು ಸುತ್ತುವ ಮೂಲಕ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ ಆಕ್ಟಾಮರ್ ಪ್ರತಿ ಹಿಸ್ಟೋನ್ H2A, H2B, H3, ಮತ್ತು H4 ನ ಎರಡು ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಬಿಗಿಯಾದ ಸಂಬಂಧದಿಂದಾಗಿ, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಸುಗಮ ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ಗೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳನ್ನು ಮರುರೂಪಿಸಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಮರುಸ್ಥಾಪಿಸಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನ ಹಿಂದೆ ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳನ್ನು ಮರುಸೇರ್ಪಡಿಸುವಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ. ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ನಂತರ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ ಜೋಡಣೆಯಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿರುವ ಹಲವಾರು ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಚಾಪೆರೋನ್ಗಳಿವೆ. ಎಫ್ಎಸಿಟಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ α-ಪ್ರೈಮೇಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣದೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುವುದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ, ಮತ್ತು ಎಫ್ಎಸಿಟಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಉಪಘಟಕಗಳು ಆನುವಂಶಿಕವಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಅಂಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತವೆ. ಎಫ್ಎಸಿಟಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಹೆಟೆರೊಡೈಮರ್ ಆಗಿದ್ದು ಅದು ಎಟಿಪಿಯನ್ನು ಹೈಡ್ರೋಲೈಸ್ ಮಾಡುವುದಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ಗಳಲ್ಲಿನ ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳನ್ನು "ಸಡಿಲಗೊಳಿಸಲು" ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಎಫ್ಎಸಿಟಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಡಿಎನ್ಎ ತೆಗೆದುಹಾಕುವಿಕೆಗೆ ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳ ಬಿಗಿಯಾದ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಹೇಗೆ ನಿವಾರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದಕ್ಕೆ ಉತ್ತರವಿಲ್ಲ. ರೆಪ್ಲಿಸೋಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿರುವ ಮತ್ತೊಂದು ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಚಾಪೆರೋನ್ ಎಎಸ್ಎಫ್ 1 ಆಗಿದೆ, ಇದು ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಡೈಮರ್ಗಳಾದ ಎಚ್ 3-ಎಚ್ 4 ಅನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುವ ಎಂಸಿಎಂ ಸಂಕೀರ್ಣದೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ. ASF1 ಹೊಸದಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತವಾದ H3-H4 ಡೈಮರ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನ ಹಿಂದಿನ ಶೇಖರಣೆ ಅಂಶಗಳಿಗೆ ರವಾನಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಈ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ನಂತರ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಶೇಖರಣೆಯ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ H3-H4 ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಡೈಮರ್ಗಳನ್ನು ಲಭ್ಯವಾಗುವಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಎಸ್-ಹಂತದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ವಂಶವಾಹಿಗಳಿಂದ ವಂಶವಾಹಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ತಡೆಯುವಲ್ಲಿ ಎಎಸ್ಎಫ್1 (ಮತ್ತು ಅದರ ಪಾಲುದಾರ ಆರ್ಟಿಟಿ109) ಸಹ ತೊಡಗಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ. ಹೆಟೆರೊಟ್ರಿಮೆರಿಕ್ ಚಾಪೆರೋನ್ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಅಸೆಂಬ್ಲಿ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ 1 (ಸಿಎಎಫ್-1) ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಹೊಸದಾಗಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಡಿಎನ್ಎ ಎಳೆಗಳ ಮೇಲೆ ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸುವಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿದೆ. ಸಿಎಎಫ್-1 ಪಿಐಪಿ-ಬಾಕ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಪಿಸಿಎನ್ಎ-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮೋಟಿಫ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇದು ಸಿಎಎಫ್-1 ಅನ್ನು ಪಿಸಿಎನ್ಎ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೊಸದಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಎಚ್3-ಎಚ್4 ಡೈಮರ್ಗಳನ್ನು ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. Rtt106 ಚಾಪೆರೋನ್ ಸಹ ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ CAF-1 ಮತ್ತು H3-H4 ಡೈಮರ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳು ಹೊಸದಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತವಾದ ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳನ್ನು ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡುತ್ತವೆ. H3-H4 ಹಿಸ್ಟೋನ್ಗಳ ಶೇಖರಣೆಯ ನಂತರ, ಹಿಸ್ಟೋನ್ H2A-H2Bಯ ಸಂಯೋಜನೆಯಿಂದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ಗಳು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಎಫ್ಎಸಿಟಿ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಮೂಲಕ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಈಗಾಗಲೇ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಮುಕ್ತ ಎಚ್ 2 ಎ-ಎಚ್ 2 ಬಿ ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಮತ್ತೊಂದು ಎಚ್ 2 ಎ-ಎಚ್ 2 ಬಿ ಚಾಪೆರೋನ್, ಎನ್ಎಪಿ 1 ಸಾಧ್ಯತೆ ಇದೆ. ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಇದು ಬಹಳ ಬೇಗನೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ, ಏಕೆಂದರೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಫೋರ್ಕ್ನ ನಂತರ ಕೆಲವೇ ನೂರು ಬೇಸ್ ಜೋಡಿಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸುವುದನ್ನು ಗಮನಿಸಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ, ಹೊಸ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೋಮ್ಗಳನ್ನು ರಚಿಸುವ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಚಾಪೆರೋನ್ಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಜೋಡಿಸುವುದರಿಂದಾಗಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ನಂತರ ನಡೆಯುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳ ನಡುವಿನ ಹೋಲಿಕೆಗಳು ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದಾಗ, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯು ಹೆಚ್ಚು ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಸಾಧಿಸಲು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಅನೇಕ ಮೂಲಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ವೃತ್ತಾಕಾರದ ಆಕಾರದಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುವಾಗ ಕೇವಲ ಒಂದು ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಮೂಲವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ರೇಖೀಯವಾಗಿದೆ. ಪುನರಾವರ್ತನೆಯಾದಾಗ, ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಸುಮಾರು ಒಂದು ಸಾವಿರ ಮೂಲಗಳಿವೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎರಡು ದಿಕ್ಕಿನದ್ದಾಗಿದೆ. ಇಲ್ಲಿ ದ್ವಿದಿಶೆಯ ಪದದ ಅರ್ಥವು ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ರೇಖೀಯ ಡಿಎನ್ಎ ಅನೇಕ ಮೂಲಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ (ಒ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ) ಮತ್ತು ಟರ್ಮಿನೈ (ಟಿ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ). "ಒ" ನ ಬಲಭಾಗದಲ್ಲಿ "ಟಿ" ಇರುತ್ತದೆ. ಒಂದು "ಒ" ಮತ್ತು ಒಂದು "ಟಿ" ಒಟ್ಟಾಗಿ ಒಂದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ. ಪೂರ್ವ-ಆರಂಭದ ಸಂಕೀರ್ಣದ ರಚನೆಯ ನಂತರ, ಒಂದು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಉದ್ದವಾಗಲು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿದಾಗ, ದೀಕ್ಷೆಯು ಎರಡನೇ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ. ಈಗ, ಮೊದಲ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಪ್ರದಕ್ಷಿಣಾಕಾರವಾಗಿ ಚಲಿಸಿದರೆ, ಎರಡನೇ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಮೊದಲ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ "ಟಿ" ಅನ್ನು ತಲುಪುವವರೆಗೆ ಪ್ರದಕ್ಷಿಣಾಕಾರವಾಗಿ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ. "ಟಿ" ಯಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಲು ಎರಡೂ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳು ವಿಲೀನಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಏತನ್ಮಧ್ಯೆ, ಎರಡನೇ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯು ಮೂರನೇ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಎದುರಿಸಲು ಮುಂದಕ್ಕೆ ಸಾಗುತ್ತಿದೆ. ಎರಡು ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳ ಈ ಪ್ರದಕ್ಷಿಣಾಕಾರ ಮತ್ತು ಅಪ್ರದಕ್ಷಿಣಾಕಾರದ ಚಲನೆಯನ್ನು ದ್ವಿದಿಶೆಯ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗೆ ಎಲ್ಲಾ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ನಿಖರವಾದ ಸಮನ್ವಯದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ, ಪ್ರತಿ ಬಾರಿ ಜೀವಕೋಶವು ವಿಭಜನೆಯಾದಾಗ ಇಡೀ ಜೀನೋಮ್ ಅನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಮೂಲದಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜೋಡಣೆಗಳ ಸರಣಿಗಳ ಮೂಲಕ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎಯೊಂದಿಗೆ ಎಂಸಿಎಂ ಹೆಲಿಕೇಸ್ನ ಸಂಬಂಧದ ಮೇಲೆ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಈ ಮೂಲಗಳು ಪ್ರತಿಕೃತಿಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ನಿರ್ದೇಶಿಸುತ್ತವೆ. ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ನಿಯಂತ್ರಣವು ಡಿಎನ್ಎಗೆ ಡಿಎನ್ಎಎ ಇನಿಶಿಯೇಟರ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ಬಂಧನದ ಮೇಲೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುತ್ತದೆ, ಒಂದು ಜೀವಕೋಶದ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಪ್ರಾರಂಭವು ಅನೇಕ ಬಾರಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎರಡೂ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಲೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ದೇಶಿಸಲು ಎಟಿಪಿ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಜಲವಿಚ್ಛೇದನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಎರಡೂ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಲಿಕೇಸ್ ಅನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಹೆಲೀಕೇಸ್ಗಳು ಡಬಲ್ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ಗಳಾಗಿದ್ದು, ಅವು ಡಬಲ್ ಸ್ಟ್ರ್ಯಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಲೋಡ್ ಆಗುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಹೆಲೀಕೇಸ್ಗಳು ಸಿಂಗಲ್ ಹೆಕ್ಸಾಮರ್ಗಳಾಗಿದ್ದು ಸಿಂಗಲ್ ಸ್ಟ್ರ್ಯಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್ಎಯಲ್ಲಿ ಲೋಡ್ ಆಗುತ್ತವೆ. ವರ್ಣತಂತುಗಳ ವಿಭಜನೆಯು ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳ ನಡುವಿನ ಮತ್ತೊಂದು ವ್ಯತ್ಯಾಸವಾಗಿದೆ. ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದಂತಹ ತ್ವರಿತವಾಗಿ ವಿಭಜಿಸುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು, ಇನ್ನೂ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿರುವ ವರ್ಣತಂತುಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುತ್ತವೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಎಲ್ಲಾ ವರ್ಣತಂತುಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳ್ಳುವವರೆಗೆ ಮಗಳು ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ವರ್ಣತಂತು ವಿಭಜನೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಪ್ರತಿಕೃತಿಯ ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಎರಡಕ್ಕೂ ಹೋಲುತ್ತದೆ. ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪಟ್ಟಿ ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪ್ರಮುಖ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಪಟ್ಟಿಃ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರೊಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳನ್ನೂ ನೋಡಿ.