Second-harmonic imaging microscopy
ಸೆಕೆಂಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ (SHIM) ಸೆಕೆಂಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಜನರೇಷನ್ (SHG) ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ. ಜೀವಕೋಶ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶದ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯದ ದೃಶ್ಯೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಎಸ್. ಎಚ್. ಐ. ಎಂ. ಅನ್ನು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯವಾದ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಚಿತ್ರಣ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಾಗಿ ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎರಡನೇ-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವು ಆಪಾದಿತ ಬೆಳಕಿನಿಂದ ಎರಡನೇ-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಬೆಳಕನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಮಾದರಿಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಂದ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯನ್ನು ಪಡೆಯುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವು ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸಾಂದ್ರತೆ, ಪಥದ ಉದ್ದ ಅಥವಾ ಮಾದರಿಯ ವಕ್ರೀಕಾರಕ ಸೂಚ್ಯಂಕದಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ಮೂಲಕ ಅದರ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯನ್ನು ಪಡೆಯುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಗೆ ಕೇಂದ್ರಸಮಮಿತಿಯಲ್ಲದ ಆಣ್ವಿಕ ರಚನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ವಸ್ತುವಿನ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುವ ತೀವ್ರವಾದ ಲೇಸರ್ ಬೆಳಕು ಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ, ಅಂತರ್ಗತವಾಗಿ ಅಥವಾ ಬಾಹ್ಯವಾಗಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ವಿದ್ಯುತ್ ಕ್ಷೇತ್ರದಿಂದ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ವಸ್ತುವಿನಿಂದ ಹೊರಹೊಮ್ಮುವ ಸೆಕೆಂಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಬೆಳಕು ವಸ್ತುವಿಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುವ ಬೆಳಕಿನ ತರಂಗಾಂತರದ ಅರ್ಧದಷ್ಟು (ಆವರ್ತನ ದ್ವಿಗುಣ) ಆಗಿರುತ್ತದೆ. ಎರಡು-ಫೋಟಾನ್-ಎಕ್ಸೈಟೆಡ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ (ಟಿಪಿಇಎಫ್) ಸಹ ಎರಡು ಫೋಟಾನ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದ್ದರೂ, ಟಿಪಿಇಎಫ್ ಉತ್ತೇಜಿತ ಸ್ಥಿತಿಯ ವಿಶ್ರಾಂತಿ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸ್ವಲ್ಪ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಕಳೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಶಕ್ತಿಯ ಸಂರಕ್ಷಣೆಯಾಗಿದೆ. ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿ, ಲಿಥಿಯಂ ನಿಯೋಬೇಟ್ (ಲಿಎನ್ಬಿಒ3), ಪೊಟ್ಯಾಸಿಯಮ್ ಟೈಟಾನಿಲ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ (ಕೆಟಿಪಿ = ಕೆಟಿಐಒಪಿಒ4) ಮತ್ತು ಲಿಥಿಯಂ ಟ್ರೈಬೋರೇಟ್ (ಎಲ್ಬಿಒ = ಲಿಬಿ3ಒ5) ನಂತಹ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಬೆಳಕನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಅಜೈವಿಕ ಸ್ಫಟಿಕವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಗೆ ಆಪಾದಿತ ಬೆಳಕಿನ ಆವರ್ತನವು ದ್ವಿಗುಣಗೊಳ್ಳಲು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಆಣ್ವಿಕ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವನ್ನು ಹೊಂದಲು ವಸ್ತುವಿನ ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೂ, ಕೆಲವು ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಧ್ರುವೀಕರಣಗೊಳ್ಳಬಹುದು, ಮತ್ತು ಸಾಕಷ್ಟು ಕ್ರಮಬದ್ಧವಾದ, ದೊಡ್ಡ ಸೆಂಟ್ರೋಸಿಮೆಟ್ರಿಕ್ ಅಲ್ಲದ ರಚನೆಗಳಾಗಿ ಜೋಡಿಸಬಹುದು. ಕೆಲವು ಜೈವಿಕ ಪದಾರ್ಥಗಳಾದ ಕಾಲಜನ್, ಮೈಕ್ರೊಟ್ಯೂಬ್ಯುಲ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸ್ನಾಯು ಮಯೋಸಿನ್ಗಳು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದರೂ, ನೀರು ಸಹ ಕ್ರಮಬದ್ಧವಾಗಬಹುದು ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಎರಡನೇ-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಬಹುದು, ಇದು ಎಸ್ಎಚ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಯಾವುದೇ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಅಣುಗಳಿಲ್ಲದೆ ಮೇಲ್ಮೈ ಸಾಮರ್ಥ್ಯಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಹಂತದ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಚಿತ್ರಣ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸೆಟಪ್ ಟೈಟಾನಿಯಂ ನೀಲಮಣಿ ಮೋಡ್-ಲಾಕ್ ಲೇಸರ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಮೂಲವಾಗಿ ಹೊಂದಿರುವ ಲೇಸರ್ ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಸಂಕೇತವನ್ನು ಮುಂದಿನ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಪ್ರಸಾರ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಉತ್ಪಾದಿಸಿದ ಸಂಕೇತದ ತರಂಗಾಂತರದ ಸುಮಾರು ಹತ್ತನೇ ಒಂದು ಭಾಗದ ಕ್ರಮದಲ್ಲಿರುವ ವಸ್ತುಗಳು ಸುಮಾರು ಸಮಾನವಾದ ಮುಂದಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಕೆಲವು ಪ್ರಯೋಗಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. ಪ್ರಯೋಜನಗಳು ಎಸ್. ಎಚ್. ಐ. ಎಂ. ಲೈವ್ ಸೆಲ್ ಮತ್ತು ಟಿಶ್ಯೂ ಇಮೇಜಿಂಗ್ಗೆ ಹಲವಾರು ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯಂತಹ ಇತರ ತಂತ್ರಗಳಂತೆ ಅಣುಗಳ ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವುದಿಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ಅಣುಗಳು ಫೋಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ ಅಥವಾ ಫೋಟೊಬ್ಲೆಚಿಂಗ್ನ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಅನುಭವಿಸಬಾರದು. ಅಲ್ಲದೆ, ಅನೇಕ ಜೈವಿಕ ರಚನೆಗಳು ಬಲವಾದ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದರಿಂದ, ಬಾಹ್ಯಜನ್ಯ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಅಣುಗಳ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ, ಇದು ಜೈವಿಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಸಹ ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದು. ಘಟನೆಯ ಬೆಳಕಿಗೆ ಹತ್ತಿರದ ಅತಿಗೆಂಪು ತರಂಗಾಂತರಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ, SHIM ದಪ್ಪ ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಆಳವಾಗಿ ಚಿತ್ರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮಾದರಿಗಳ ಮೂರು ಆಯಾಮದ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಎರಡು-ಫೋಟಾನ್ ಪ್ರತಿದೀಪಕತೆ (2ಪಿಇಎಫ್) ಎರಡು-ಫೋಟಾನ್ ಪ್ರತಿದೀಪಕತೆ (2ಪಿಇಎಫ್) ಯೊಂದಿಗಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಪೂರಕತೆಯು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಗಿಂತ ಬಹಳ ಭಿನ್ನವಾದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆಃ ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ಶಕ್ತಿಯ ಮಟ್ಟಗಳಿಗೆ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ಗಳ ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ಮತ್ತು ಫೋಟಾನ್ ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯಿಂದ ನಂತರದ ಉದ್ವೇಗವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ (ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ, ಇದು 2-ಫೋಟಾನ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದ್ದರೂ ಸಹ). ಹೀಗಾಗಿ, 2ಪಿಇಎಫ್ ಒಂದು ಸುಸಂಬದ್ಧವಲ್ಲದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದ್ದು, ಪ್ರಾದೇಶಿಕವಾಗಿ (ಐಸೊಟ್ರೊಪಿಕ್ ಆಗಿ ಹೊರಸೂಸುತ್ತದೆ) ಮತ್ತು ತಾತ್ಕಾಲಿಕವಾಗಿ (ವಿಶಾಲ, ಮಾದರಿ-ಅವಲಂಬಿತ ವರ್ಣಪಟಲ). ಇದು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರಚನೆಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿಲ್ಲ. ಆದ್ದರಿಂದ ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಎಲಾಸ್ಟಿನ್ನಂತಹ ಆಟೋಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಕೆಲವು ಅಣುಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಲು ಇದನ್ನು ಮಲ್ಟಿಪೋಟಾನ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ನಲ್ಲಿ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಗೆ ಜೋಡಿಸಬಹುದು (ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಕಾಲಜನ್ ಅಥವಾ ಮಯೋಸಿನ್ ಅನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ). ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಯನ್ನು ಚಿತ್ರಣಕ್ಕಾಗಿ ಬಳಸುವ ಮೊದಲು, ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಯ ಮೊದಲ ಪ್ರದರ್ಶನವನ್ನು 1961 ರಲ್ಲಿ ಪಿ. ಎ. ಫ್ರಾಂಕೆನ್, ಜಿ. ವೈನ್ರಿಚ್, ಸಿ. ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಪೀಟರ್ಸ್ ಮತ್ತು ಎ. ಇ. ಹಿಲ್ ಅವರು ಮಿಚಿಗನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯ, ಆನ್ ಆರ್ಬರ್ನಲ್ಲಿ ಕ್ವಾರ್ಟ್ಜ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬಳಸಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದರು. 1968ರಲ್ಲಿ, ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ಗಳಿಂದ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯನ್ನು ಬ್ಲೊಮ್ಬರ್ಗೆನ್ ಕಂಡುಹಿಡಿದನು ಮತ್ತು ಅಂದಿನಿಂದ ಇದನ್ನು ಮೇಲ್ಮೈಗಳನ್ನು ನಿರೂಪಿಸಲು ಮತ್ತು ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ ಡೈನಾಮಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಶೋಧಿಸಲು ಒಂದು ಸಾಧನವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿದೆ. 1971ರಲ್ಲಿ, ಫೈನ್ ಮತ್ತು ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಜೈವಿಕ ಅಂಗಾಂಶದ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯ ಮೊದಲ ವೀಕ್ಷಣೆಯನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿದರು. 1974ರಲ್ಲಿ, ಹೆಲ್ವರ್ತ್ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಸ್ಟೆನ್ಸನ್ ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ಪಾಲಿಕ್ರಿಸ್ಟಲೈನ್ ZnSe ನಿಂದ SHG ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸುವ ಮೂಲಕ SHG ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಏಕೀಕರಣವನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿದರು. 1977ರಲ್ಲಿ, ಕಾಲಿನ್ ಶೆಪರ್ಡ್ ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ನೊಂದಿಗೆ ವಿವಿಧ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸ್ಫಟಿಕಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಿದರು. ಇಲಿ ಬಾಲದ ಸ್ನಾಯುರಜ್ಜುಗಳಲ್ಲಿನ ಕಾಲಜನ್ ನಾರುಗಳ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು 1986ರಲ್ಲಿ ಫ್ರಾಯ್ಡ್ ಮತ್ತು ಡಾಯ್ಚ್ರಿಂದ ಮೊದಲ ಜೈವಿಕ ಚಿತ್ರಣ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಮಾಡಲಾಯಿತು. 1993 ರಲ್ಲಿ, ಲೆವಿಸ್ ವಿದ್ಯುತ್ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿನ ಸ್ಟೈರಿಲ್ ವರ್ಣಗಳ ಎರಡನೇ-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದರು. ಅವರು ಜೀವಂತ ಕೋಶಗಳ ಚಿತ್ರಣದ ಕೆಲಸವನ್ನು ಸಹ ತೋರಿಸಿದರು. 2006ರಲ್ಲಿ, ಗೋರೊ ಮಿಜುತಾನಿ ಗುಂಪು ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಮಾಡದ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿತು, ಇದು ಎರಡು-ಫೋಟಾನ್ ಅಗಲ-ಕ್ಷೇತ್ರ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು 1996ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಿಸಲಾಗಿದ್ದರೂ ಸಹ, ದೊಡ್ಡ ಮಾದರಿಗಳ ವೀಕ್ಷಣೆಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಸಮಯವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಳಸಬಹುದಾಗಿತ್ತು. ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಮಾಡದ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಸಸ್ಯದ ಪಿಷ್ಟ, ಬೃಹತ್ ಅಣು, ಜೇಡ ರೇಷ್ಮೆ ಮತ್ತು ಮುಂತಾದವುಗಳ ವೀಕ್ಷಣೆಗೆ ಬಳಸಲಾಯಿತು. 2010ರಲ್ಲಿ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯನ್ನು ವಿವೋ ಇಮೇಜಿಂಗ್ನಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸಲಾಯಿತು. 2019ರಲ್ಲಿ, ಕೀಟನಾಶಕಗಳ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಎಲೆಗಳ ಮೇಲ್ಮೈಗಳ ಮೇಲೆ ನೇರವಾಗಿ ಆಯ್ದ ಕೃಷಿ ರಾಸಾಯನಿಕಗಳ ಚಿತ್ರಣದ ಬಳಕೆಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಿದಾಗ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಅನ್ವಯಗಳು ವಿಸ್ತರಿಸಲ್ಪಟ್ಟವು. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಸಂಕೇತಗಳು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾದ ಧ್ರುವೀಕರಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದರಿಂದ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಅಳತೆಗಳಾದ ಓರಿಯೆಂಟೇಷನಲ್ ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಧ್ರುವೀಕರಣ ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿಯನ್ನು ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ವಿನ್ಯಾಸದ ದೃಷ್ಟಿಕೋನ ಮತ್ತು ಮಟ್ಟವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿ ಸಮೀಕರಣವನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕಃ ಮತ್ತು ಸಮಾನಾಂತರ ಮತ್ತು ಲಂಬ ದಿಕ್ಕುಗಳಲ್ಲಿ ಧ್ರುವೀಕರಣಗಳ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಪಡೆದುಕೊಳ್ಳುವುದು. ಹೆಚ್ಚಿನ ಮೌಲ್ಯವು ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿಕ್ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಕಡಿಮೆ ಮೌಲ್ಯವು ಐಸೊಟ್ರೊಪಿಕ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ಯಾಂಪಗ್ನೊಲಾ ಮತ್ತು ಲೋವ್ ಅವರು ಮಾಡಿದ ಕೆಲಸದಲ್ಲಿ, ಕಾಲಜನ್ ನಾರುಗಳು ಮೌಲ್ಯದೊಂದಿಗೆ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಜೋಡಿಸಲಾದ ರಚನೆಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಹಿಂದುಳಿದ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಒಂದು ಸುಸಂಬದ್ಧ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿರುವುದರಿಂದ (ಪ್ರಾದೇಶಿಕವಾಗಿ ಮತ್ತು ತಾತ್ಕಾಲಿಕವಾಗಿ), ಇದು ಪ್ರಚೋದನೆಯ ದಿಕ್ಕಿನ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಇಟ್ಟುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಐಸೊಟ್ರೊಪಿಕ್ ಆಗಿ ಹೊರಸೂಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಇದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಮುಂಭಾಗದ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ (ಪ್ರಚೋದನೆಯಂತೆಯೇ) ಹೊರಸೂಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಹಂತ-ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಹಿಂದುಳಿದ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿಯೂ ಸಹ ಹೊರಸೂಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ವಾಸ್ತವವಾಗಿ, ಸಂಕೇತದ ಪರಿವರ್ತನೆಯು ಕಡಿಮೆಯಾಗುವ ಸುಸಂಬದ್ಧತೆಯ ಉದ್ದವೆಂದರೆಃ ಮುಂದಕ್ಕೆ, ಆದರೆ ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಅಂದರೆ>>. ಆದ್ದರಿಂದ, ದಪ್ಪವಾದ ರಚನೆಗಳು ಆದ್ಯತೆಯಾಗಿ ಮುಂದಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ತೆಳುವಾದವುಗಳು ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆಃ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಪರಿವರ್ತನೆಯು ಮೊದಲ ಅಂದಾಜಿನಲ್ಲಿ ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ಪರಿವರ್ತಕಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಚೌಕವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುವುದರಿಂದ, ದಪ್ಪವಾದ ರಚನೆಗಳಿಂದ ಹೊರಸೂಸಲ್ಪಟ್ಟರೆ ಸಂಕೇತವು ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಮುಂದಕ್ಕೆ ಇರುವ ಸಂಕೇತವು ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಇರುವ ಸಂಕೇತಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅಂಗಾಂಶವು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ ಬೆಳಕನ್ನು ಚದುರಿಸಬಹುದು, ಮತ್ತು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯ ಮುಂದಿರುವ ಒಂದು ಭಾಗವನ್ನು ಹಿಂದಕ್ಕೆ ತಿರುಗಿಸಬಹುದು. ನಂತರ, ಫಾರ್ವರ್ಡ್-ಓವರ್-ಬ್ಯಾಕ್ವರ್ಡ್ ಅನುಪಾತ ಎಫ್/ಬಿ ಅನ್ನು ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಬಹುದು ಮತ್ತು ಇದು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಪರಿವರ್ತಕಗಳ (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಾಲಜನ್ ಫೈಬ್ರಿಲ್ಗಳು) ಜಾಗತಿಕ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ಜೋಡಣೆಯ ಮೆಟ್ರಿಕ್ ಆಗಿದೆ. ಸ್ಕ್ಯಾಟರರ್ನ ಸಮತಲದ ಹೊರಗಿನ ಕೋನವು ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ, ಅದರ ಎಫ್/ಬಿ ಅನುಪಾತವು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸಹ ತೋರಿಸಬಹುದು (ಅಂಜೂರವನ್ನು ನೋಡಿ. 1. 14). ಧ್ರುವೀಕರಣ-ಪರಿಹರಿಸಿದ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಧ್ರುವಮಾಪನದ ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು 2002ರಲ್ಲಿ ಸ್ಟೋಲರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಿದರು. ಧ್ರುವಮಾಪನವು ಆಣ್ವಿಕ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ದೃಷ್ಟಿಕೋನ ಮತ್ತು ಕ್ರಮವನ್ನು ಅಳೆಯಬಹುದು, ಮತ್ತು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಗೆ ಜೋಡಿಯಾಗಿ ಇದು ಕಾಲಜನ್ ನಂತಹ ಕೆಲವು ರಚನೆಗಳಿಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯೊಂದಿಗೆ ಹಾಗೆ ಮಾಡಬಹುದುಃ ಧ್ರುವೀಕರಣ-ಪರಿಹರಿಸಿದ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವು (ಪಿ-ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ) ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ವಿಸ್ತರಣೆಯಾಗಿದೆ. ಪಿ-ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಮತ್ತೊಂದು ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿ ನಿಯತಾಂಕವನ್ನು ಹೀಗೆ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸುತ್ತದೆಃ ಇದು, ಆರ್ ನಂತೆ, ಚಿತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತಿರುವ ರಚನೆಯ ಪ್ರಮುಖ ದೃಷ್ಟಿಕೋನ ಮತ್ತು ಅಸ್ವಸ್ಥತೆಯ ಅಳತೆಯಾಗಿದೆ. ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಉದ್ದವಾದ ಸಿಲಿಂಡರಾಕಾರದ ತಂತುಗಳಲ್ಲಿ (ಕಾಲಜನ್ ನಂತಹ) ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆಯಾದ್ದರಿಂದ, ಈ ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿಯು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ಒಳಗಾಗುವ ಟೆನ್ಸರ್ ಮತ್ತು X ತಂತುಗಳ ದಿಕ್ಕು (ಅಥವಾ ರಚನೆಯ ಮುಖ್ಯ ದಿಕ್ಕು), Y ನಿಂದ X ಗೆ ಆರ್ಥೋಗೋನಲ್ ಮತ್ತು Z ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಸರಣ. ಚಿತ್ರದ XY ಸಮತಲದಲ್ಲಿರುವ ತಂತುಗಳ ದೃಷ್ಟಿಕೋನ φ ಅನ್ನು ಎಫ್ಎಫ್ಟಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೂಲಕ ಪಿ-ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಯಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಬಹುದು ಮತ್ತು ನಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಹಾಕಬಹುದು. ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ ಕ್ವಾಂಟೈಸೇಶನ್ ಕೊಲಾಜೆನ್ (ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಕರಣ, ಆದರೆ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ), ವಿವಿಧ ರೂಪಗಳಲ್ಲಿ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರಬಹುದುಃ 28 ವಿವಿಧ ವಿಧಗಳು, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ 5 ಫೈಬ್ರಿಲ್ಲರ್ಗಳಾಗಿವೆ. ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿನ ಫೈಬ್ರಿಲ್ಲರ್ ಕಾಲಜನ್ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸುವುದು, ಅದರ ವಿಕಸನ ಮತ್ತು ಇತರ ಕಾಲಜನ್ ಅಲ್ಲದ ವಸ್ತುಗಳೊಂದಿಗೆ ಅದರ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ನೋಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದು ಒಂದು ಸವಾಲಾಗಿದೆ. ಆ ನಿಟ್ಟಿನಲ್ಲಿ, ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ತರಂಗಾಂತರದಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಅಥವಾ ಶಬ್ದವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಚಿತ್ರವನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ. ಅದರ ನಂತರ, ಚಿತ್ರದೊಳಗಿನ ಕಾಲಜನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ಮುಖವಾಡವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು. ಇತರ ಕ್ವಾಂಟೈಸೇಶನ್ ತಂತ್ರಗಳಲ್ಲಿ, ಇದು ಸಾಕಷ್ಟು ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದ್ದರೂ ಸಹ ಬಹುಶಃ ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ, ಪುನರುತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಿಕತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಇತರರು ಬ್ಯಾಕ್ಪ್ರೊಪಗೇಟಿಂಗ್ ಆಕ್ಷನ್ ಪೊಟೆನ್ಷಿಯಲ್ಗಳು ವೋಲ್ಟೇಜ್ ಅಟೆನ್ಯುಯೇಷನ್ ಇಲ್ಲದೆ ಡೆಂಡ್ರಿಟಿಕ್ ಸ್ಪೈನ್ಗಳ ಮೇಲೆ ಆಕ್ರಮಣ ಮಾಡುತ್ತವೆ ಎಂದು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಲು ಸಹ ಇದನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಪೊಟೆನ್ಷಿಯೇಷನ್ನಲ್ಲಿ ಭವಿಷ್ಯದ ಕೆಲಸಕ್ಕೆ ಉತ್ತಮ ಆಧಾರವನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ಇಲ್ಲಿ ಇದರ ಬಳಕೆಯೆಂದರೆ, ಪ್ರಮಾಣಿತ ಎರಡು-ಫೋಟಾನ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದೊಂದಿಗೆ ಸಾಧಿಸಲಾಗದ ನಿಖರತೆಯೊಂದಿಗೆ ಸಣ್ಣ ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಬೆನ್ನೆಲುಬುಗಳಲ್ಲಿನ ವೋಲ್ಟೇಜ್ ಅನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಅಳೆಯುವ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಇದು ಒದಗಿಸಿದೆ. ಏತನ್ಮಧ್ಯೆ, ಒಳನುಗ್ಗುವಿಕೆಯ ಆಳದ ಮಿತಿಗಳನ್ನು ಮೀರಿ, ಇಮೇಜಿಂಗ್-ಗೈಡೆಡ್ ಫೋಟೊಡೈನಮಿಕ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸಮೀಪದ-ಅತಿಗೆಂಪು ಬೆಳಕನ್ನು ಗೋಚರ ಬೆಳಕಿಗೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಬಹುದು. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಮತ್ತು ಅದರ ವಿಸ್ತರಣೆಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಬಹುದಾದ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ವಿವಿಧ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಬಳಸಬಹುದುಃ ಕೆಲವು ಉದಾಹರಣೆ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಕೆಳಗಿನ ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ವರದಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆಃ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ನೊಳಗಿನ ಕಾಲಜನ್ ಮುಖ್ಯ ಅನ್ವಯವಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ. ಇದು ಸ್ನಾಯುರಜ್ಜು, ಚರ್ಮ, ಮೂಳೆ, ಕಾರ್ನಿಯಾ, ಮಹಾಪಧಮನಿ, ತಂತುಕೋಶ, ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್, ಚಂದ್ರಾಕೃತಿ, ಇಂಟರ್ವರ್ಟೆಬ್ರಲ್ ಡಿಸ್ಕ್ಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ. ಅಸ್ಥಿಪಂಜರದ ಸ್ನಾಯು ಅಥವಾ ಹೃದಯ ಸ್ನಾಯುವಿನಲ್ಲಿಯೂ ಸಹ ಮಯೋಸಿನ್ ಅನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಬಹುದು. ಟಿಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಣೆ ಥರ್ಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಜನರೇಷನ್ (ಟಿಎಚ್ಜಿ) ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕಕ್ಕೆ ಪೂರಕವಾಗಬಹುದು, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಅಡ್ಡಲಾಗಿರುವ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು 3 ನೇ ಕ್ರಮಾಂಕದ ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ಒಳಗಾಗುವಿಕೆ ಅನ್ವಯಗಳಿಗೆ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಪ್ರಗತಿ, ಗೆಡ್ಡೆಯ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಮ್ಯಾಮೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಕಾಲಜನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯೊಂದಿಗೆ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಯನ್ನು ಸ್ತನ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕೊಹೆರೆಂಟ್ ಆಂಟಿ-ಸ್ಟೋಕ್ಸ್ ರಾಮನ್ ಸ್ಕ್ಯಾಟರಿಂಗ್ ಅಥವಾ ಟೂ-ಫೋಟಾನ್ ಎಕ್ಸೈಟೇಶನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯಂತಹ ಇತರ ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ತಂತ್ರಗಳೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಮಲ್ಟಿಪೋಟಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ (ಅಥವಾ ಟೋಮೋಗ್ರಫಿ) ಎಂಬ ವಾಡಿಕೆಯ ಭಾಗವಾಗಿದೆ, ಇದು ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಆಗಿರಬಹುದಾದ ಬಯಾಪ್ಸಿಗಳ ಇನ್ವೇಸಿವ್ ಅಲ್ಲದ ಮತ್ತು ವಿವೋ ಹಿಸ್ಟಾಲಜಿಯಲ್ಲಿ ವೇಗವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಸ್ತನ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಮುಂದಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಇರುವ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಚಿತ್ರಗಳ ಹೋಲಿಕೆಯು ಕೊಲಾಜೆನ್ನ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ರಚನೆಯ ಬಗ್ಗೆ ಒಳನೋಟವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಸ್ವತಃ ಗೆಡ್ಡೆಯ ಶ್ರೇಣಿ ಮತ್ತು ಹಂತಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಸ್ತನದಲ್ಲಿ ಅದರ ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಮತ್ತು 2ಪಿಇಎಫ್ನ ಹೋಲಿಕೆಯು ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ ಕಾಲಜನ್ ದೃಷ್ಟಿಕೋನದ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಸಹ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವು ಸ್ತನ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಸಂಶೋಧನೆಗೆ ಸಾಕಷ್ಟು ಕೊಡುಗೆ ನೀಡಿದ್ದರೂ ಸಹ, ಇದು ಆಸ್ಪತ್ರೆಗಳಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಈ ರೋಗಲಕ್ಷಣದ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕಾಗಿ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ತಂತ್ರವಾಗಿ ಇನ್ನೂ ಸ್ಥಾಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿಲ್ಲ. ಅಂಡಾಶಯದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಆರೋಗ್ಯಕರ ಅಂಡಾಶಯಗಳು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯಲ್ಲಿ ಏಕರೂಪದ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಪದರವನ್ನು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಸ್ಟ್ರೋಮಾದಲ್ಲಿ ಸುಸಂಘಟಿತ ಕಾಲಜನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಅಸಹಜವಾದವುಗಳು ದೊಡ್ಡ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಬದಲಾದ ಕಾಲಜನ್ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ ಎಪಿಥೀಲಿಯಂ ಅನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ. ಆರ್ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗಿಂತ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ಗೆ ಫೈಬ್ರಿಲ್ಗಳ ಜೋಡಣೆಯು ಸ್ವಲ್ಪ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲು ಸಹ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಚರ್ಮದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಅನ್ನು ಮತ್ತೊಮ್ಮೆ 2ಪಿಇಎಫ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಿ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆಃ ಅಲ್ಲಿ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ (ರೆಸ್ಪ್). ಟಿ. ಪಿ. ಇ. ಎಫ್.) ಎಂಬುದು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯಲ್ಲಿ (ರೆಸ್ಪ್) ಮಿತಿ ಪಿಕ್ಸೆಲ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯಾಗಿದೆ. 2ಪಿಇಎಫ್) ಚಿತ್ರ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಎಂಎಫ್ಎಸ್ಐ ಎಂದರೆ ಶುದ್ಧ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಚಿತ್ರ (ಪ್ರತಿದೀಪಕತೆ ಇಲ್ಲದ). ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಅತಿ ಹೆಚ್ಚು ಎಂ. ಎಫ್. ಎಸ್. ಐ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ವ್ಯತಿರಿಕ್ತ ವಿಧಾನವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಹಿಂಭಾಗದ ಟಿಎಚ್ಜಿ ಗೆಡ್ಡೆಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನದಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿಯನ್ನು ಥರ್ಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಜನರೇಷನ್ (ಟಿಎಚ್ಜಿ) ಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ಯಾಂಕ್ರಿಯಾಟಿಕ್ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ನಲ್ಲಿನ ಕಾಲಜನ್ ಅಲ್ಟ್ರಾಸ್ಟ್ರಕ್ಚರ್ನಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಮಲ್ಟಿಪೋಟಾನ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಕರಣ-ಪರಿಹರಿಸಿದ ಎಸ್. ಎಚ್. ಐ. ಎಂ. ನಿಂದ ತನಿಖೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಶ್ವಾಸಕೋಶ, ಕೊಲೊನಿಕ್, ಅನ್ನನಾಳದ ಸ್ಟ್ರೋಮಾ ಮತ್ತು ಗರ್ಭಕಂಠದ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ಗಳ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಾಗಿ ಇತರ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ಗಳಾದ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರದ ಪತ್ತೆ ಸಂಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಅಥವಾ ಕಾಲಜನ್ ಫೈಬ್ರಿಲ್ಗಳ ಧ್ರುವೀಯತೆಯು ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರದ ಚಿಹ್ನೆಗಳಾಗಿರಬಹುದು. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಕಾಲಜನ್ ನಾರುಗಳ ಅನಿಸೊಟ್ರೊಪಿಕ್ ಜೋಡಣೆಯು ಚರ್ಮದಲ್ಲಿನ ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಗುರುತುಗಳಿಂದ ಆರೋಗ್ಯಕರ ಚರ್ಮವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಟ್ಟಿತು. ಅಲ್ಲದೆ, ಅಸ್ಥಿಸಂಧಿವಾತದಂತಹ ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ನಲ್ಲಿನ ರೋಗಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಧ್ರುವೀಕರಣ-ಪರಿಹರಿಸಿದ ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಿಂದ ತನಿಖೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಶಿಮ್ ಅನ್ನು ನಂತರ ಫೈಬ್ರೋ-ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ (ಚಂದ್ರಾಕೃತಿ) ಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸಲಾಯಿತು. ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಣುಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸುವ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಂಗಾಂಶದ ರಚನೆಯನ್ನು ಒಂದು ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಒಂದು ವಸ್ತುವಿನಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ವಿವಿಧ ಮಾಪಕಗಳಲ್ಲಿ (ಸ್ಥೂಲದಿಂದ ಸೂಕ್ಷ್ಮದವರೆಗೆ) ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಬಹುದು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕಾಲಜನ್ (ಟೈಪ್ I) ಅನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ನಿಂದ (ಇಸಿಎಂ) ಚಿತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಇದು ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಸ್ಕ್ಯಾಫೋಲ್ಡ್ ಅಥವಾ ಸಂಯೋಜಿತ ವಸ್ತುವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯು ರೇಷ್ಮೆಯಲ್ಲಿ ಫೈಬ್ರೋಯಿನ್, ಸ್ನಾಯುಗಳಲ್ಲಿ ಮಯೋಸಿನ್ ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಸೆಲ್ಯುಲೋಸ್ ಅನ್ನು ಸಹ ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಅಂಗಾಂಶದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಿಂದುಗಳನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕೃತಕ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲು ಈ ಎಲ್ಲಾ ಚಿತ್ರಣ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಬಳಸಬಹುದುಃ ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯು ವಾಸ್ತವವಾಗಿ ಕೆಲವು ದೃಷ್ಟಿಕೋನಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ವಸ್ತುಗಳ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅಳೆಯಬಹುದು. ಅಲ್ಲದೆ, ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ. ಯು ಇತರ ಮಲ್ಟಿಪೋಟಾನ್ ತಂತ್ರಗಳೊಂದಿಗೆ ಸೇರಿಕೊಂಡು, ಮಾದರಿಯು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ತೆಳ್ಳಗಿರುವಾಗ, ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಸಹಜವಾಗಿ, ಅವುಗಳನ್ನು ಅಂತಿಮವಾಗಿ ತಯಾರಿಸಿದ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಕಣ್ಣಿನ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿರುವ ಕಣ್ಣಿನ ಕಾರ್ನಿಯಾದ ರಚನೆಯು, ಸಾಕಷ್ಟು ದಟ್ಟವಾದ ಕಾಲಜನ್ಗಳ ಸ್ವಯಂ-ಸಂಘಟಣಾ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಂದಾಗಿ, ಕಾಲಜನ್ಗಳ ಪ್ಲೈವುಡ್ ತರಹದ ರಚನೆಯಿಂದ ಮಾಡಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆದರೂ, ಈ ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿ ಲ್ಯಾಮೆಲ್ಲೆಯಲ್ಲಿನ ಕಾಲಜನ್ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವು ಇನ್ನೂ ಚರ್ಚೆಯಲ್ಲಿದೆ. ಕಾಲಜನ್ ನ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಲು ಕೆರಾಟೋಕೊನಸ್ ಕಾರ್ನಿಯಾವನ್ನು ಎಸ್. ಎಚ್. ಜಿ ಚಿತ್ರಿಸಬಹುದು. ಥರ್ಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಜನರೇಷನ್ (ಟಿಎಚ್ಜಿ) ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಕಾರ್ನಿಯಾವನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಸಿಗ್ನಲ್ಗೆ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಈ ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿನ ಟಿಎಚ್ಜಿ ಮತ್ತು ಎಸ್ಎಚ್ಜಿ ಮ್ಯಾಕ್ಸಿಮಾ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ವಿವಿಧ ಸ್ಥಳಗಳಲ್ಲಿ ಇರುತ್ತವೆ. ಸೆಕೆಂಡ್-ಹಾರ್ಮೋನಿಕ್ ಪೀಳಿಗೆಯ ನಾನ್ ಲೀನಿಯರ್ ಆಪ್ಟಿಕ್ಸ್ ಟು-ಫೋಟಾನ್ ಎಕ್ಸೈಟೇಶನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಮೂಲಗಳು ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಸೆಲ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಲ್ಯಾಬೊರೇಟರಿ ಉಪಕರಣಗಳು ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯನ್ನು ಸಹ ನೋಡಿ.