Ultramicrotomy
ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿಯು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಅತ್ಯಂತ ತೆಳುವಾದ ಚೂರುಗಳಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸುವ ಒಂದು ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಥಿನ್ ವಿಭಾಗಗಳು ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಟ್ರಾನ್ಸ್ಮಿಷನ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ (ಟಿಇಎಂ) ನಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ವರ್ಧನೆಗಳಲ್ಲಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಬಹುದು ಮತ್ತು ದಾಖಲಿಸಬಹುದು. ಇದನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಜೈವಿಕ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಮೃದು ಲೋಹಗಳ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಸಹ ತಯಾರಿಸಬಹುದು. ವಿಭಾಗಗಳು ತುಂಬಾ ತೆಳುವಾಗಿರಬೇಕು ಏಕೆಂದರೆ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ 50 ರಿಂದ 125 ಕೆವಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ಗಳು 150 ಎನ್ಎಂ ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ದಪ್ಪವಾದ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ಅತ್ಯುತ್ತಮ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ಗಳಿಗಾಗಿ, ವಿಭಾಗಗಳು 30 ರಿಂದ 60 ಎನ್ಎಂ ಆಗಿರಬೇಕು. ಇದು ಸರಿಸುಮಾರು 0.1 ಮಿಮೀ ದಪ್ಪದ ಮಾನವ ಕೂದಲನ್ನು ಅದರ ವ್ಯಾಸದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ 2,000 ಚೂರುಗಳಾಗಿ ವಿಭಜಿಸುವುದಕ್ಕೆ ಅಥವಾ ಒಂದೇ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣವನ್ನು 100 ಚೂರುಗಳಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸುವುದಕ್ಕೆ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಮಾದರಿಗಳ ಅತಿ ತೆಳುವಾದ ಭಾಗಗಳನ್ನು "ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟೊಮ್" ಎಂಬ ವಿಶೇಷ ಸಾಧನವನ್ನು ಬಳಸಿ ಕತ್ತರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಜೈವಿಕ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಥಿನ್ ವಿಭಾಗಗಳಿಗೆ ವಜ್ರದ ಚಾಕು ಅಥವಾ ಗಾಜಿನ ಚಾಕುವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಲಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಆರಂಭಿಕ ಕಡಿತಗಳಿಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ಇತರ ಉಪಕರಣಗಳು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ. ಅತಿ ತೆಳುವಾದ ವಿಭಾಗವಾಗಲು ಮಾದರಿ ಬ್ಲಾಕ್ನ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು, ತಂತ್ರಜ್ಞರು ಸೆಮಿಥಿನ್ ಅಥವಾ "ದಪ್ಪ" ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು 0.5 ರಿಂದ 2 ಮೈಕ್ರಾನ್ಗಳವರೆಗೆ ಪರಿಶೀಲಿಸುತ್ತಾರೆ. ಈ ದಪ್ಪ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಸಮೀಕ್ಷೆಯ ವಿಭಾಗಗಳು ಎಂದೂ ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯ ಸರಿಯಾದ ಪ್ರದೇಶವು ತೆಳುವಾದ ವಿಭಾಗ ಮಾಡುವ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿದೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಲಘು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ನೋಡಲಾಗುತ್ತದೆ. 50 ರಿಂದ 100 ಎನ್ಎಂ ದಪ್ಪದ "ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಥಿನ್" ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಟಿಇಎಂನಲ್ಲಿ ವೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು. ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿಯಿಂದ ಪಡೆದ ಅಂಗಾಂಶದ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಚಾಕಿಯ ಕತ್ತರಿಸುವ ಬಲದಿಂದ ಸಂಕುಚಿತಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಬ್ಲಾಕ್ಗಳ ಕತ್ತರಿಸಿದ ಮೇಲ್ಮೈಯ ಇಂಟರ್ಫೆರೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ವಿಭಾಗಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಮತಟ್ಟಾಗಿರುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ತಿಳಿಸುತ್ತದೆ. ಎಪೋನ್ ಅಥವಾ ವೆಸ್ಟೋಪಲ್ ಅನ್ನು ಒಳಸೇರಿಸುವ ಮಾಧ್ಯಮವಾಗಿ, ರೇಖೆಗಳು ಮತ್ತು ಕಣಿವೆಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 0,5 ಮೈಕ್ರೋಮೀಟರ್ ಎತ್ತರವನ್ನು ಮೀರುವುದಿಲ್ಲ, ಅಂದರೆ, ಸಾಮಾನ್ಯ ವಿಭಾಗಗಳ ದಪ್ಪಕ್ಕಿಂತ (1) ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು. ತನಿಖೆಗಾಗಿ ಮಾದರಿಯೊಂದರಿಂದ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿಗಳು ಪ್ರಾಣಿ ಅಥವಾ ಸಸ್ಯದ ಅಂಗಾಂಶಗಳಂತಹ ಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳಿಂದಾಗಿರಬಹುದು ಅಥವಾ ಬಂಡೆ, ಲೋಹ, ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಟೇಪ್, ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್, ಫಿಲ್ಮ್ ಮುಂತಾದ ಅಜೈವಿಕ ವಸ್ತುಗಳಿಂದಾಗಿರಬಹುದು. ಮಾದರಿ ಬ್ಲಾಕ್ ಅನ್ನು ಮೊದಲು 1 ಮಿ. ಮೀ. ನಿಂದ 1 ಮಿ. ಮೀ. ಗಾತ್ರದ ಬ್ಲಾಕ್ ಮುಖವನ್ನು ರಚಿಸಲು ಕತ್ತರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. "ದಪ್ಪ" ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು (1 ಮೈಕ್ರೋಮೀಟರ್) ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಮೇಲೆ ನೋಡಲು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಟಿಇಎಂಗಾಗಿ ವಿಭಾಗಿಸಲು ಒಂದು ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬ್ಲಾಕ್ ಮುಖವನ್ನು ಒಂದು ಬದಿಯಲ್ಲಿ 0.7 ಮಿಮೀ ಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾಗಿರದ ಗಾತ್ರಕ್ಕೆ ಮರು-ಟ್ರಿಮ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಬ್ಲಾಕ್ ಮುಖಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಚೌಕಾಕಾರ, ತ್ರಿಕೋನ, ಆಯತಾಕಾರದ ಅಥವಾ ತ್ರಿಕೋನ ಆಕಾರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ತೆಳುವಾದ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಗಾಜು ಅಥವಾ ವಜ್ರದ ಚಾಕುವಿನಿಂದ ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟೊಮ್ ಬಳಸಿ ಕತ್ತರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಭಾಗಗಳನ್ನು ದೋಣಿ ಅಥವಾ ತೊಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿರುವ ನೀರಿನ ಮೇಲೆ ತೇಲುವಂತೆ ಬಿಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಭಾಗಗಳನ್ನು ನಂತರ ನೀರಿನ ಮೇಲ್ಮೈಯಿಂದ ಹಿಂಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ತಾಮ್ರ, ನಿಕಲ್, ಚಿನ್ನ ಅಥವಾ ಇತರ ಲೋಹದ ಗ್ರಿಡ್ ಮೇಲೆ ಜೋಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 50kV ಮತ್ತು 120kV ನಡುವಿನ ವೇಗವರ್ಧಿತ ವೋಲ್ಟೇಜ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಸರಣ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕಕ್ಕೆ ಸೂಕ್ತವಾದ ವಿಭಾಗದ ದಪ್ಪವು ಸುಮಾರು 30-100 nm ಆಗಿದೆ. 1952ರಲ್ಲಿ ಹಂಬರ್ಟೊ ಫರ್ನಾಂಡೀಸ್ ಮೊರಾನ್ ಕ್ರಯೋ ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿಯನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸಿದರು, ಇದು ಇದೇ ರೀತಿಯ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ ಆದರೆ-20 ಮತ್ತು-150 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ ನಡುವಿನ ಘನೀಕರಿಸುವ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅತಿ ತೆಳುವಾದ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿದ ಜೈವಿಕ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಲು ಕ್ರಯೋ ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿಯನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು. ಹೆಚ್ಚು "ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ" ಅಲ್ಟ್ರಾಮೈಕ್ರೋಟಮಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಒಂದು ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ವೇಗ, ಏಕೆಂದರೆ 1 ರಿಂದ 2 ಗಂಟೆಗಳಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಫ್ರೀಜ್ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ವಿಭಾಗಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ. ಮೈಕ್ರೊಸ್ಕೋಪಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೊಸ್ಕೋಪಿ ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಉಪಕರಣಗಳು