Primer walking
ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ ಎಂಬುದು ಜೀನ್ ಅನ್ನು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ರೋಗದ ಜೀನ್) ಅದರ ಹತ್ತಿರದ ಗುರುತುಗಳಿಂದ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ತಿಳಿದಿರುವ ಜೀನ್) ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸುವ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ. ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಸಣ್ಣಪುಟ್ಟ ಬದಲಾವಣೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಸ್ಯಗಳು, ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಸಸ್ತನಿಗಳಲ್ಲಿ ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಮತ್ತು ಅನುಕ್ರಮ ಪ್ರಯತ್ನಗಳಲ್ಲಿ ಇದನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. "ನಿರ್ದೇಶಿತ ಅನುಕ್ರಮ" ಎಂದೂ ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಈ ತಂತ್ರವು, ಉಲ್ಲೇಖ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು (ಅನುಕ್ರಮ ದೃಢೀಕರಣ ಸೇವೆ) ಆಧರಿಸಿ ತಿಳಿದಿರುವ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅಥವಾ ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನದ ಉಲ್ಲೇಖ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಲು ಅಥವಾ ಪೂರ್ಣ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅಥವಾ ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನದ ಅಜ್ಞಾತ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ಸ್ಯಾಂಗರ್ ಅನುಕ್ರಮ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ಃ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮ ವಿಧಾನ ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ ಎಂಬುದು ಡಿಎನ್ಎಯ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು 1.3-7.0 ಕೆಬಿ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯವರೆಗೆ ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಒಂದು ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ವಾಕಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಜೀನ್ನ ಈಗಾಗಲೇ ತಿಳಿದಿರುವ ಅನುಕ್ರಮಗಳ ತದ್ರೂಪುಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸರಪಳಿ ಮುಕ್ತಾಯ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಓದುವ ಒಂದೇ ಅನುಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ತುಂಬಾ ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ಈ ವಿಧಾನವು ದೀರ್ಘ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಹಲವಾರು ಸತತ ಸಣ್ಣ ಅನುಕ್ರಮಗಳಾಗಿ ವಿಭಜಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಆಸಕ್ತಿಯ ಡಿಎನ್ಎ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಇನ್ಸರ್ಟ್, ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನ ಅಥವಾ ಜೀನೋಮ್ ಅನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸುವಾಗ ಅಂತರವನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುವ ತುಣುಕು ಆಗಿರಬಹುದು. "ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್" ಎಂಬ ಪದವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಜೀನೋಮ್ ಅನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ. ಅನುಕ್ರಮವು ತಿಳಿದಿರುವಾಗ ಬದಲಿಗೆ "ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ವಾಕಿಂಗ್" ಎಂಬ ಪದವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಜೀನ್ನ ಯಾವುದೇ ತದ್ರೂಪು ಇಲ್ಲ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ರೋಗದ ಜೀನ್ ಅನುಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ಆರ್. ಎಫ್. ಎಲ್. ಪಿ. ಯಂತಹ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗುರುತಿನ ಬಳಿ ನೆಲೆಗೊಂಡಿರಬಹುದು. ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ವಾಕಿಂಗ್ ಎಂಬುದು ಜೀನ್ ಅನ್ನು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ರೋಗದ ಜೀನ್) ಅದರ ಹತ್ತಿರದ ಗುರುತುಗಳಿಂದ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ತಿಳಿದಿರುವ ಜೀನ್) ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸುವ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಇದನ್ನು ಸಸ್ಯಗಳು, ಶಿಲೀಂಧ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿನ ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಮತ್ತು ಅನುಕ್ರಮ ಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ ಮಧ್ಯಮ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇನ್ನೊಂದು ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಮ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಬೇಕಾದ ಜೀನ್ನ ಬಳಿ ಇರುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು, ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಮತ್ತು ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಲು ಇದನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ದೊಡ್ಡ ತುಣುಕುಗಳ ಗ್ರಂಥಾಲಯಗಳು, ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಕೃತಕ ವರ್ಣತಂತು ಗ್ರಂಥಾಲಯಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಯೋಜನೆಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಪೇಕ್ಷಿತ ವಸಾಹತುವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತದ್ರೂಪಿಯನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲು ಗ್ರಂಥಾಲಯವನ್ನು ಮೊದಲು ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಶೋಧನೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ, ಕ್ಲೋನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರೋಬ್ನೊಂದಿಗೆ ಅತಿಕ್ರಮಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅತಿಕ್ರಮಿಸುವ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಮ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ನಂತರ ಇತರ ತದ್ರೂಪುಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಹೊಸ ಶೋಧಕವಾಗಿ (ತದ್ರೂಪುಗಳ 3′ ಅಥವಾ 5′ ತುದಿಗಳಿಂದ ಪಡೆದ ಸಣ್ಣ ಡಿಎನ್ಎ ತುಣುಕುಗಳು) ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಗ್ರಂಥಾಲಯವು ಸರಿಸುಮಾರು 96 ತದ್ರೂಪುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ತದ್ರೂಪು ವಿಭಿನ್ನ ಒಳಸೇರಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರೋಬ್ ಒನ್ λ1 ಮತ್ತು λ2 ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಅದು ಅವುಗಳನ್ನು ಅತಿಕ್ರಮಿಸುತ್ತದೆ. λ2 ತದ್ರೂಪುಗಳಿಂದ ಪಡೆದ ಪ್ರೋಬ್ ಎರಡನ್ನು λ3ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತದ್ರೂಪುಗಳ ದೃಷ್ಟಿಕೋನವನ್ನು ತದ್ರೂಪುಗಳ ನಿರ್ಬಂಧಿತ ನಕ್ಷೆಯಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಜೀನ್ನ ಸುತ್ತಮುತ್ತಲಿನ ಹೊಸ ವರ್ಣತಂತು ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಬಹುದು. ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ವಾಕಿಂಗ್ ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ಲ್ಯಾಂಡಿಂಗ್ ಜೀನ್ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯ ಆಯ್ಕೆಯ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ಈ ವಿಧಾನವು ರೂಪಾಂತರಿತ ಲೋಕಸ್ಗೆ ದೃಢವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿರುವ ಗುರುತಿನ ಆವಿಷ್ಕಾರವನ್ನು ಅಗತ್ಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ತುಣುಕನ್ನು ಮೊದಲು ಚಿಕ್ಕದಾದ ತುಣುಕಿನಂತೆ ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿ ತುದಿಯಿಂದ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಸಾರ್ವತ್ರಿಕ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಅಥವಾ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಮೊದಲ 1000 ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಬೇಸ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಬೇಕು. ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲು, ಹೊಸ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ವಿನ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ (ತಿಳಿದಿರುವ ಅನುಕ್ರಮದ ಅಂತಿಮ 20 ಬೇಸ್ಗಳಿಗೆ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ) ಸಮೀಪದ ಅನುಕ್ರಮ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಅಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ ವರ್ಸಸ್ ಶಾಟ್ಗನ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ ನಿರ್ದೇಶನದ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ಗೆ ಒಂದು ಉದಾಹರಣೆಯಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ಗೆ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನ ನೀಡಲು ಡಿಎನ್ಎಯ ತಿಳಿದ ಪ್ರದೇಶದಿಂದ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಿರ್ದೇಶಿತ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಡಿಎನ್ಎಯ ಶಾಟ್ಗನ್ ಅನುಕ್ರಮವು ಹೆಚ್ಚು ತ್ವರಿತ ಅನುಕ್ರಮ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ. ಜೀನೋಮ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ನ "ಹಳೆಯ ಕಾಲ" ದಿಂದ ಒಂದು ತಂತ್ರವಿದೆ. ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ವಿಧಾನವೆಂದರೆ ಸ್ಯಾಂಗರ್ ಚೈನ್ ಟರ್ಮಿನೇಷನ್ ವಿಧಾನವಾಗಿದ್ದು, ಇದು 100 ಮತ್ತು 1000 ಬೇಸ್ಪೇರ್ಗಳ ನಡುವೆ ಓದುವ ಉದ್ದವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ (ಬಳಸಿದ ಉಪಕರಣಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ). ಇದರರ್ಥ ನೀವು ಉದ್ದವಾದ ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುಗಳನ್ನು ಒಡೆಯಬೇಕು, ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಬೇಕು ಮತ್ತು ತರುವಾಯ ಅವುಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಬೇಕು. ಎರಡು ವಿಧಾನಗಳು ಸಾಧ್ಯ. ಮೊದಲನೆಯದನ್ನು ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ (ಅಥವಾ ಪ್ರೈಮರ್) ವಾಕಿಂಗ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮೊದಲ ತುಣುಕನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸುವುದರೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ. ಅನುಕ್ರಮದ ಮುಂದಿನ (ಪಕ್ಕದ) ತುಣುಕನ್ನು ನಂತರ ಪ್ರೈಮರ್ ಬಳಸಿ ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಮೊದಲ ಅನುಕ್ರಮದ ಅಂತ್ಯಕ್ಕೆ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ. ಈ ತಂತ್ರಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚು ಜೋಡಣೆ ಅಗತ್ಯವಿರುವುದಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ನಿಮಗೆ ಸಾಕಷ್ಟು ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಇದು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ನಿಧಾನವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ನಿವಾರಿಸಲು ಶಾಟ್ಗನ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಇಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ವಿವಿಧ ತುಂಡುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ (ಎಲ್ಲವೂ ಒಂದೇ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಮುರಿದಿಲ್ಲ), ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿಗೆ ಬಳಸುವ ವಾಹಕಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಮತ್ತು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದು ಅತಿಕ್ರಮಿಸುವ ಅನುಕ್ರಮಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಅವುಗಳನ್ನು ಕಂಪ್ಯೂಟರ್ನಲ್ಲಿ ಒಂದು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಜೋಡಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ವಿಧಾನವು ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಸಮಾನಾಂತರಗೊಳಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ (ನೀವು ಒಂದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಾಕಷ್ಟು ಅನುಕ್ರಮ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು ಚಲಾಯಿಸಬಹುದು) ಇದು ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ವೇಗವಾಗಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅನುಕ್ರಮ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ಸಹ ತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ. ಇಲ್ಲಿ ಅತಿಕ್ರಮಗಳು ಅಷ್ಟು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿಲ್ಲವಾದ್ದರಿಂದ ಅನುಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಅವುಗಳ ಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ಸಂಘಟಿಸುವುದು ಸವಾಲಾಗಿದೆ. ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಲು, ಮೊದಲ ಕರಡನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ನಂತಹ ಇತರ ತಂತ್ರಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನಿರ್ಣಾಯಕ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ ಒಟ್ಟಾರೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿದೆಃ ಡಿಎನ್ಎಯ ಆರಂಭಕ್ಕೆ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಅಜ್ಞಾತ ಅನುಕ್ರಮದ ಪಕ್ಕದಲ್ಲಿರುವ ಸಣ್ಣ ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಪ್ರೈಮರ್ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ (ಪಿಸಿಆರ್ ನೋಡಿ). ಹೊಸ ಸಣ್ಣ ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಅನ್ನು ಚೈನ್ ಟರ್ಮಿನೇಷನ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅನುಕ್ರಮವಾದ ಎಳೆಗಳ ತುದಿಯನ್ನು ದೀರ್ಘವಾದ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮದ ಮುಂದಿನ ಭಾಗಕ್ಕೆ ಪ್ರೈಮರ್ ಆಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ "ವಾಕಿಂಗ್" ಎಂಬ ಪದವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ವಿಧಾನವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣ ವರ್ಣತಂತುಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು (ಆದ್ದರಿಂದ "ವರ್ಣತಂತು ವಾಕಿಂಗ್"). ಪ್ರೈಮರ್ ವಾಕಿಂಗ್ ಸಹ ಶಾಟ್ಗನ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ನ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿತ್ತು, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿದ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ಬದಲಿಗೆ ಯಾದೃಚ್ಛಿಕ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ಜಂಪಿಂಗ್ ಕ್ರೊಮೊಸೋಮ್ ಲ್ಯಾಂಡಿಂಗ್ ಶಾಟ್ಗನ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸಹ ನೋಡಿ-ಇದು ಪರ್ಯಾಯ ವಿಧಾನವಾಗಿದ್ದು, ಸತತ, ಉಪ-ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ಗಳ ಬದಲಿಗೆ ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಡಿಎನ್ಎ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ