ELISA
ಕಿಣ್ವ-ಸಂಯೋಜಿತ ಇಮ್ಯುನೊಸಾರ್ಬೆಂಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (ELISA) (,) ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಜೀವರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಮೊದಲು 1971 ರಲ್ಲಿ ಇವಾ ಎಂಗ್ವಾಲ್ ಮತ್ತು ಪೀಟರ್ ಪರ್ಲ್ಮನ್ ವಿವರಿಸಿದ್ದಾರೆ. ಅಳೆಯಲು ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿರುದ್ಧ ನಿರ್ದೇಶಿಸಲಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ದ್ರವ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಲಿಗ್ಯಾಂಡ್ನ (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪ್ರೋಟೀನ್) ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಘನ-ಹಂತದ ರೀತಿಯ ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇ (ಇಐಎ) ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಎಲಿಸಾವನ್ನು ಔಷಧ, ಸಸ್ಯ ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರ ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಲ್ಲಿ ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಸಾಧನವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗಿದೆ, ಜೊತೆಗೆ ವಿವಿಧ ಕೈಗಾರಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ ತಪಾಸಣೆಯೂ ಆಗಿದೆ. ಎಲಿಸಾದ ಅತ್ಯಂತ ಸರಳ ರೂಪದಲ್ಲಿ, ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ ಮಾದರಿಯ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಂತರ, ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಆದ್ದರಿಂದ ಅದು ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಕಿಣ್ವದೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಯಾವುದೇ ನಿರ್ಬಂಧವಿಲ್ಲದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಕಿಣ್ವದ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪದಾರ್ಥವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಇದ್ದರೆ, ನಂತರದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಣ್ಣ ಬದಲಾವಣೆ. ಎಲಿಸಾವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವುದು ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಜನಕದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯೊಂದಿಗೆ ಕನಿಷ್ಠ ಒಂದು ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಅಜ್ಞಾತ ಪ್ರಮಾಣದ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ (ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ) ಅಥವಾ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ (ಅದೇ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಮತ್ತೊಂದು ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ಸೆರೆಹಿಡಿಯುವ ಮೂಲಕ, "ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್" ಎಲಿಸಾದಲ್ಲಿ) ಘನ ಬೆಂಬಲದ ಮೇಲೆ (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಮೈಕ್ರೋಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್) ನಿಶ್ಚಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ನಿಶ್ಚಲಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ, ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಆಗಿ ಜೋಡಿಸಬಹುದು ಅಥವಾ ಜೈವಿಕ ಸಂಯೋಗದ ಮೂಲಕ ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ಸ್ವತಃ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದು. ಪ್ರತಿ ಹಂತದ ನಡುವೆ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸದ ಯಾವುದೇ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸೌಮ್ಯವಾದ ಮಾರ್ಜಕ ದ್ರಾವಣದಿಂದ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮ ತೊಳೆಯುವ ಹಂತದ ನಂತರ, ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸೂಚಿಸುವ ಗೋಚರ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಕಿಣ್ವದ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಫಲಕವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಗಮನಿಸಬೇಕಾದ ಸಂಗತಿಯೆಂದರೆ, ELISA ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾಗಿ "ಇಮ್ಯುನೊ" ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳ ಬದಲಿಗೆ ಇತರ ರೀತಿಯ ಲಿಗ್ಯಾಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಮಾಡಬಹುದು, ಆದರೂ ಈ ವಿಧಾನದ ಸಾಮಾನ್ಯ ಬಳಕೆ ಮತ್ತು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯ ಇತಿಹಾಸದಿಂದಾಗಿ ಈ ಹೆಸರು ಮೂಲ "ಇಮ್ಯುನೊ" ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಈ ತಂತ್ರಕ್ಕೆ ಮೂಲಭೂತವಾಗಿ ಘನ ಹಂತದಲ್ಲಿ ನಿಶ್ಚಲಗೊಳಿಸಬಹುದಾದ ಯಾವುದೇ ಲಿಗೇಟಿಂಗ್ ಕಾರಕದ ಜೊತೆಗೆ ಪತ್ತೆ ಕಾರಕದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ, ಅದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸರಿಯಾಗಿ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಬಹುದಾದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ತೊಳೆಯುವಿಕೆಯ ನಡುವೆ, ಲಿಗಂಡ್ ಮತ್ತು ಅದರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರತಿರೂಪಗಳು ಮಾತ್ರ ಘನ ಹಂತಕ್ಕೆ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿರುತ್ತವೆ ಅಥವಾ "ಇಮ್ಯುನೊಸೋರ್ಬೆಡ್" ಆಗಿರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಥವಾ ಬಂಧಿಸದ ಘಟಕಗಳನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇತರ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿಕ್ ವೆಟ್ ಲ್ಯಾಬ್ ಅಸ್ಸೇ ಸ್ವರೂಪಗಳಿಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ, ಅದೇ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ತೊಳೆದ ನಂತರ ಮರುಬಳಕೆ ಮಾಡಬಹುದು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕ್ಯುವೆಟ್ಟೆ), ಎಲಿಸಾ ಪ್ಲೇಟ್ಗಳು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಘನ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಇಮ್ಯುನೊಸೋರ್ಬ್ ಮಾಡುತ್ತವೆ, ಇದು ಪ್ಲೇಟ್ನ ಭಾಗವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಸುಲಭವಾಗಿ ಮರುಬಳಕೆ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಒಂದು ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಜೀವರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು "ಆರ್ದ್ರ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ" ತಂತ್ರವಾಗಿ, ಎಲಿಸಾ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ದ್ರವ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದನ್ನು ಮುಂದುವರೆಸುವ ವಿಧಾನದ ಮೂಲಕ ದ್ರವ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಒಂದು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು (ಅಂದರೆ, ಅದರ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಅಥವಾ ಗುಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗುತ್ತಿರುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪದಾರ್ಥ) ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ (ಅಂದರೆ, ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಅನುಕ್ರಮವು ಸುಲಭವಾಗಿ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಬಹುದಾದ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪ್ರಮಾಣದ ಅಳತೆಯಾಗಿ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಬಹುದಾದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ) ಅದು ದ್ರವವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಕೊಠಡಿಯೊಳಗೆ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾಕಾರಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವಂತೆ ಇರಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಇದು ಒಣ ಪಟ್ಟಿಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ "ಡ್ರೈ ಲ್ಯಾಬ್" ತಂತ್ರಗಳಿಗೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಮಾದರಿಯು ದ್ರವವಾಗಿದ್ದರೂ ಸಹ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಅಳತೆ ಮಾಡಿದ ಸಣ್ಣ ಹನಿ), "ಒಣ" ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಅಂತಿಮ ಪತ್ತೆ ಹಂತವು ರಿಫ್ಲೆಕ್ಟೋಮೆಟ್ರಿಯಂತಹ ವಿಧಾನಗಳಿಂದ ಒಣಗಿದ ಪಟ್ಟಿಯನ್ನು ಓದುವುದನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸ್ಪಿಲ್ಓವರ್ ಅಥವಾ ಮಾದರಿಗಳ ನಡುವೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಡೆಯಲು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಧಾರಕ ಕೊಠಡಿಯ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ. ವೈವಿಧ್ಯಮಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಾಗಿ, ELISA ಕೆಲವು ಘಟಕಗಳನ್ನು ಭೌತಿಕವಾಗಿ ನಿಶ್ಚಲವಾಗಿರುವ ಘನ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮಿಶ್ರಣದ ಕೆಲವು ಘಟಕಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತದೆ. ಎಲಿಸಾದಲ್ಲಿ, ದ್ರವ ಮಾದರಿಯನ್ನು ವಿಶೇಷ ಬಂಧಿಸುವ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿರವಾದ ಘನ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುವ, ಕಾವುಕೊಡುವ ಮತ್ತು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಅನೇಕ ದ್ರವ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಕೆಲವು ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಬದಲಾವಣೆಗಳು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕಿಣ್ವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಉತ್ಪನ್ನದಿಂದ ಬಣ್ಣದ ಬೆಳವಣಿಗೆ) ಕಿಣ್ವದಲ್ಲಿನ ಅಂತಿಮ ದ್ರವದಿಂದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ "ಓದುವಿಕೆ" ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿಯಿಂದ ಹರಡುವ ಬೆಳಕಿನ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ, ಇದು ದ್ರವದ ಮೂಲಕ ಬೆಳಕಿನ ಕೆಲವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತರಂಗಾಂತರದ ಪ್ರಸರಣದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ (ಜೊತೆಗೆ ಬಾವಿಯ ಪಾರದರ್ಶಕ ತಳವು ಬಹು-ಬಾವಿ ಫಲಕದ ಸ್ವರೂಪದಲ್ಲಿದೆ). ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯು ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಂಕೇತದ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಬಹಳ ಪ್ರಸಿದ್ಧವಾದ ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ನಿಖರವಾದ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವನ್ನು ಅನುಮತಿಸಲು ನಿಗದಿತ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆ ಮಾಡುವ ಕಾರಕಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿರುವ ಕಿಣ್ವಗಳಿಂದ ಸಂಕೇತವು ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ "ಕಿಣ್ವ-ಸಂಬಂಧಿತ" ಎಂಬ ಹೆಸರು ಬರುತ್ತದೆ. ವಿಶ್ಲೇಷಕವನ್ನು ಲಿಗಂಡ್ ಎಂದೂ ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಪತ್ತೆ ಕಾರಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಲಗತ್ತಿಸುತ್ತದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ELISA ಲಿಗ್ಯಾಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳ ದೊಡ್ಡ ವರ್ಗಕ್ಕೆ ಸೇರುತ್ತದೆ. ಲಿಗಂಡ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಂಧಿಸುವ ಕಾರಕವನ್ನು "ನಿಶ್ಚಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ", ಅಂದರೆ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪಾರದರ್ಶಕ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ಬಾವಿಯ ಪಕ್ಕದ ಗೋಡೆಯ ಮೇಲೆ ಲೇಪಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಒಣಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಇಲ್ಲಿ ನಿಂತಿರುವ "ಘನ ಹಂತ"/"ಘನ ತಲಾಧಾರ" ವನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಬಹುದಾದ ಘನ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಕಣಗಳು/ಮಣಿಗಳಿಗೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ), ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ "ಎಲಿಸಾ ಫಲಕ" ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುವ ಬಹು-ಬಾವಿ ಫಲಕವಾಗಿ ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕವಾಗಿ, ಇತರ ರೀತಿಯ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇಗಳಂತೆಯೇ, ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ವಿಧದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಪ್ರತಿಜನಕದ ವಿರುದ್ಧ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಕಾರಕವಾಗಿ ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದು ಸುಲಭ. ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿ, ಅನಲೈಟ್ ಸ್ವತಃ ಪ್ರತಿಕಾಯವಾಗಿದ್ದರೆ, ಅದರ ಗುರಿ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಬಂಧಿಸುವ ಕಾರಕವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಇತಿಹಾಸ ELISA ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಾಗುವ ಮೊದಲು, ರೋಗನಿರೋಧಕ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ನಡೆಸುವ ಏಕೈಕ ಆಯ್ಕೆಯು ರೇಡಿಯೋ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇ ಆಗಿತ್ತು, ಇದು ವಿಕಿರಣಶೀಲವಾಗಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ. ರೇಡಿಯೋ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇಯಲ್ಲಿ, ವಿಕಿರಣಶೀಲತೆಯು ಸಂಕೇತವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯವಿದೆಯೇ ಎಂಬುದನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. 1960ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟವಾದ ರೊಸಾಲಿನ್ ಸುಸ್ಮಾನ್ ಯಾಲೋವ್ ಮತ್ತು ಸೊಲೊಮನ್ ಬೆರ್ಸನ್ ಅವರ ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಪ್ರಬಂಧವೊಂದರಲ್ಲಿ ರೇಡಿಯೋ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇಯನ್ನು ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಿಕಿರಣಶೀಲತೆಯು ಸಂಭಾವ್ಯ ಆರೋಗ್ಯ ಅಪಾಯವನ್ನುಂಟುಮಾಡುವುದರಿಂದ, ಸುರಕ್ಷಿತ ಪರ್ಯಾಯವನ್ನು ಹುಡುಕಲಾಯಿತು. ರೇಡಿಯೋ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇಗೆ ಸೂಕ್ತವಾದ ಪರ್ಯಾಯವು ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಸಂಕೇತದ ಬದಲಿಗೆ ವಿಕಿರಣಶೀಲವಲ್ಲದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಬದಲಿಸುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವಗಳು (ಹಾರ್ಸ್ರಡಿಶ್ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ನಂತಹವು) ಸೂಕ್ತವಾದ ತಲಾಧಾರಗಳೊಂದಿಗೆ (ಎಬಿಟಿಎಸ್ ಅಥವಾ ಟಿಎಂಬಿಯಂತಹವು) ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸಿದಾಗ, ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಯು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಸಂಕೇತವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಸಂಕೇತವು ಪ್ರತಿಕಾಯ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿರಬೇಕು, ಅದಕ್ಕಾಗಿಯೇ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಸೂಕ್ತ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ. ಈ ಜೋಡಣೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸ್ಟ್ರಾಟಿಸ್ ಅವ್ರಾಮಿಯಸ್ ಮತ್ತು ಜಿ. ಬಿ. ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದರು. ಪಿಯರ್ಸ್. ತೊಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ಯಾವುದೇ ಅನ್ಬೌಂಡ್ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದು ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಪ್ರತಿಕಾಯ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಧಾರಕದ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಜೋಡಿಸಬೇಕು; ಅಂದರೆ, ಇಮ್ಯುನೊಸಾರ್ಬೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಬೇಕು. ಇದನ್ನು ಸಾಧಿಸುವ ತಂತ್ರವನ್ನು ವೈಡ್ ಮತ್ತು ಜೆರ್ಕರ್ ಪೋರತ್ 1966ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು. 1971ರಲ್ಲಿ, ಸ್ವೀಡನ್ನ ಸ್ಟಾಕ್ಹೋಮ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾನಿಲಯದಲ್ಲಿ ಪೀಟರ್ ಪರ್ಲ್ಮನ್ ಮತ್ತು ಇವಾ ಎಂಗ್ವಾಲ್ ಮತ್ತು ನೆದರ್ಲೆಂಡ್ಸ್ನ ಆಂಟನ್ ಶೂರ್ಸ್ ಮತ್ತು ಬೌಕ್ ವ್ಯಾನ್ ವೀಮೆನ್ ಈ ಜ್ಞಾನವನ್ನು ಇಐಎ/ಎಲಿಸಾವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವ ವಿಧಾನಗಳಾಗಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ಪ್ರಬಂಧಗಳನ್ನು ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ELISA ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿ ಕ್ರೋಮೋಜೆನಿಕ್ ವರದಿಗಾರರು ಮತ್ತು ತಲಾಧಾರಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಅನಲೈಟ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸೂಚಿಸಲು ಕೆಲವು ರೀತಿಯ ಗಮನಿಸಬಹುದಾದ ಬಣ್ಣದ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಹೊಸ ELISA-ರೀತಿಯ ತಂತ್ರಗಳು ಫ್ಲೋರೋಜೆನಿಕ್, ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕೆಮಿಲುಮಿನಿಸೆಂಟ್ ಮತ್ತು ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಿಸಿಆರ್ ವರದಿಗಾರರನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲು ಬಳಸುತ್ತವೆ. ಈ ಹೊಸ ವರದಿಗಾರರು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಗಳು ಮತ್ತು ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸಿಂಗ್ ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಹುದು. ತಾಂತ್ರಿಕ ಪರಿಭಾಷೆಯಲ್ಲಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಈ ರೀತಿಯ ಹೊಸ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾಗಿ ELISAಗಳಲ್ಲ, ಏಕೆಂದರೆ ಅವು "ಕಿಣ್ವ-ಸಂಪರ್ಕಿತವಾಗಿಲ್ಲ", ಬದಲಿಗೆ ಕೆಲವು ಕಿಣ್ವರಹಿತ ವರದಿಗಾರರೊಂದಿಗೆ ಸಂಪರ್ಕ ಹೊಂದಿವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಲ್ಲಿನ ಸಾಮಾನ್ಯ ತತ್ವಗಳು ಬಹುಮಟ್ಟಿಗೆ ಹೋಲುತ್ತವೆಯಾದ್ದರಿಂದ, ಅವುಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ELISAಗಳಂತೆಯೇ ಅದೇ ವರ್ಗದಲ್ಲಿ ವರ್ಗೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 2012ರಲ್ಲಿ, ಕ್ರೋಮೋಜೆನಿಕ್ ವರದಿಗಾರನಾಗಿ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ಸ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಅಲ್ಟ್ರಾಸೆನ್ಸಿಟಿವ್, ಕಿಣ್ವ-ಆಧಾರಿತ ELISA ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಕೇವಲ ಅನಲೈಟ್ನ ಅಟೋಗ್ರಾಮ್ಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದರಿಂದ ನಗ್ನ-ಕಣ್ಣಿನ ಬಣ್ಣದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ನೀಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ಧನಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೆ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಈ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆಯು ಅನಲೈಟ್ನ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು ಅಥವಾ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಮಾತ್ರ ದೃಢೀಕರಿಸಬಲ್ಲದು ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಿ, ನಿಜವಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲ. ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಣುಗಳಿಗೆ ಅನೇಕ ELISA ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿವೆ. ಎಲಿಸಾ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ಬಂಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬುದರ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಹಲವಾರು ರೀತಿಯ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಮುಖ ವಿಧಗಳನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ನೇರ ಎಲಿಸಾ ನೇರ ಎಲಿಸಾದ ಹಂತಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುತ್ತವೆಃ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಮೈಕ್ರೋಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್ನ ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 96-ಬಾವಿ ಫಲಕಗಳು) ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಚಾರ್ಜ್ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಮೂಲಕ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಮಯವನ್ನು ನೀಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕದಿಂದ ಲೇಪಿತವಾಗದ ಬಾವಿಯಲ್ಲಿನ ಯಾವುದೇ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಮುಚ್ಚುವ ಸಲುವಾಗಿ ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸದ ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ದ್ರಾವಣವಾದ ಬೋವಿನ್ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ ಅಥವಾ ಕ್ಯಾಸೀನ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಲಗತ್ತಿಸಲಾದ (ಸಂಯೋಜಿತ) ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಬಾವಿಯ ಪರೀಕ್ಷಾ ಪ್ರತಿಜನಕ ಲೇಪನಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಈ ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಈ ತಲಾಧಾರವು ಕಿಣ್ವದೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸಿದಾಗ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ. ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ, ಬಣ್ಣವು ಬಲವಾಗಿ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಬಣ್ಣದ ಬಲಕ್ಕೆ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ನೀಡಲು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೀಟರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವವು ವರ್ಧಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ; ಕೆಲವೇ ಕೆಲವು ಕಿಣ್ವ-ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಬಂಧಿಯಾಗಿದ್ದರೂ ಸಹ, ಕಿಣ್ವ ಅಣುಗಳು ಅನೇಕ ಸಂಕೇತ ಅಣುಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಜ್ಞಾನದ ಮಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಕಿಣ್ವವು ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತಲೇ ಹೋಗಬಹುದು, ಆದರೆ ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟರೆ, ಬಣ್ಣವು ವೇಗವಾಗಿ ಬೆಳೆಯುತ್ತದೆ. ನೇರ ಎಲಿಸಾದ ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಅನನುಕೂಲವೆಂದರೆ ಪ್ರತಿಜನಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ವಿಧಾನವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿಲ್ಲ; ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಾ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಮೂಲವಾಗಿ ಬಳಸಿದಾಗ, ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮೈಕ್ರೋಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್ಗೆ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು, ಆದ್ದರಿಂದ ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿನ ಅನಲೈಟ್ನ ಸಣ್ಣ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಬಾವಿಯ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಬಂಧಿಸುವಾಗ ಇತರ ಸೀರಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸ್ಪರ್ಧಿಸಬೇಕು. ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್ ಅಥವಾ ಪರೋಕ್ಷ ELISA ಈ ಸಮಸ್ಯೆಗೆ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಪರೀಕ್ಷಾ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ "ಕ್ಯಾಪ್ಚರ್" ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಸೀರಮ್ನ ಆಣ್ವಿಕ ಮಿಶ್ರಣದಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಎಲಿಸಾವನ್ನು ಗುಣಾತ್ಮಕ ಅಥವಾ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಸ್ವರೂಪದಲ್ಲಿ ಚಲಾಯಿಸಬಹುದು. ಗುಣಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮಾದರಿಯ ಸರಳ ಧನಾತ್ಮಕ ಅಥವಾ ಋಣಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು (ಹೌದು ಅಥವಾ ಇಲ್ಲ) ಒದಗಿಸುತ್ತವೆ. ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ನಡುವಿನ ಕಡಿತವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಕರು ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತಾರೆ ಮತ್ತು ಇದು ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿರಬಹುದು. ಎರಡು ಅಥವಾ ಮೂರು ಬಾರಿ ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಿಚಲನವನ್ನು (ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಅಂತರ್ಗತವಾಗಿರುವ ದೋಷ) ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಎಲಿಸಾದಲ್ಲಿ, ಮಾದರಿಯ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು (ಓಡಿ) ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಕ್ರರೇಖೆಗೆ ಹೋಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಗುರಿ ಅಣುವಿನ ತಿಳಿದಿರುವ-ಸಾಂದ್ರತೆಯ ದ್ರಾವಣದ ಸರಣಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಾಗಿದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಒಂದು ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯು 1 ರ OD ಅನ್ನು ಹಿಂದಿರುಗಿಸಿದರೆ, OD = 1 ಅನ್ನು ನೀಡಿದ ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಕ್ರರೇಖೆಯ ಮೇಲಿನ ಬಿಂದುವು ಮಾದರಿಯ ಅದೇ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು. "ಪರೋಕ್ಷ ಎಲಿಸಾ" ಮತ್ತು "ನೇರ ಎಲಿಸಾ" ಎಂಬ ಹೆಸರುಗಳ ಬಳಕೆ ಮತ್ತು ಅರ್ಥವು ಪ್ರಯೋಗದ ಸಂದರ್ಭವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಸಾಹಿತ್ಯದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಜಾಲತಾಣಗಳಲ್ಲಿ ಭಿನ್ನವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದಾಗ, "ನೇರ ಎಲಿಸಾ" ಎಂಬ ಹೆಸರು ಎಲಿಸಾವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಮಾತ್ರ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು "ಪರೋಕ್ಷ ಎಲಿಸಾ" ಎಂಬ ಪದವು ಎಲಿಸಾವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕವು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ, ನಂತರ ಅದನ್ನು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ದ್ವಿತೀಯ ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಂತರದ ಪ್ರಕರಣದಲ್ಲಿ ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್ ಎಲಿಸಾ ಪರೋಕ್ಷ ಎಲಿಸಾದಿಂದ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಭಿನ್ನವಾಗಿದೆ. "ಪ್ರಾಥಮಿಕ" ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಆಸಕ್ತಿಯಿರುವಾಗ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ. ರೋಗನಿರೋಧಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಈ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ನೇರವಾಗಿ ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು "ಪರೋಕ್ಷ ಎಲಿಸಾ" ಎಂಬ ಪದವು ಎರಡು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್ಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ. ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್ ಎಲಿಸಾ ಎ "ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್" ಎಲಿಸಾವನ್ನು ಮಾದರಿ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹಂತಗಳೆಂದರೆಃ ತಿಳಿದಿರುವ ಪ್ರಮಾಣದ ಕ್ಯಾಪ್ಚರ್ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಂಧಿಸುವ ತಾಣಗಳನ್ನು ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಫಲಕಕ್ಕೆ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅನ್ಬೌಂಡ್ ಆಂಟಿಜೆನ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಆದ್ದರಿಂದ 'ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್': ಪ್ರತಿಜನಕವು ಎರಡು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ನಡುವೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ). ಈ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ದಾನಿಗಳ ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿರಬಹುದು, ಇದನ್ನು ಪ್ರತಿಜನಕದ ಕಡೆಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕತೆಗಾಗಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವ-ಸಂಯೋಜಿತ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಾಗಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಎಫ್ಸಿ ಪ್ರದೇಶಕ್ಕೆ (ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ) ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಬಂಧಿಸದ ಪ್ರತಿಕಾಯ-ಕಿಣ್ವಗಳ ಸಂಯೋಗಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವದಿಂದ ಬಣ್ಣ, ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಅಥವಾ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕೆಮಿಕಲ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಲು ರಾಸಾಯನಿಕವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕದ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಫಲಕದ ಬಾವಿಗಳ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ, ಪ್ರತಿದೀಪಕತೆ ಅಥವಾ ವಿದ್ಯುದ್ರಾಸಾಯನಿಕ ಸಂಕೇತವನ್ನು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಪ್ರವಾಹ) ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಬಲಭಾಗದಲ್ಲಿರುವ ಚಿತ್ರವು ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ಸಂಯೋಜಿತವಾದ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ, ತಾಂತ್ರಿಕ ಅರ್ಥದಲ್ಲಿ, ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ಸಂಯೋಜಿತಗೊಳಿಸಿದರೆ ಇದು ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ (ಇದು ನೇರ ELISA ಆಗಿರುತ್ತದೆ). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಸೆಕೆಂಡರಿ-ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಕಾಂಜುಗೇಟ್ನ ಬಳಕೆಯು ಒಬ್ಬರು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಯಸುವ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೂ ಕಿಣ್ವ-ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ರಚಿಸುವ ದುಬಾರಿ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ. ಇತರ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಎಫ್ಸಿ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಬಂಧಿಸುವ ಕಿಣ್ವ-ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ, ಅದೇ ಕಿಣ್ವ-ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ವಿವಿಧ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು. "ಕ್ಯಾಪ್ಚರ್" ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಮೊದಲ ಪದರವಿಲ್ಲದೆ, ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿರುವ ಯಾವುದೇ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು (ಸೀರಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ) ಪ್ಲೇಟ್ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು, ಇದು ನಿಶ್ಚಲವಾದ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ಗೆ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಜೋಡಿಸಲು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬಳಸುವುದರಿಂದ ಅಳತೆಯ ಮೊದಲು ಸಂಕೀರ್ಣ ಮಿಶ್ರಣಗಳಿಂದ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸುವ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ನಿವಾರಿಸುತ್ತದೆ, ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಅಪಾಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು, ಸಂಶೋಧನೆಗೆ ಬಳಸುವ ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್ ELISAಗೆ ಅನೇಕವೇಳೆ ದೃಢೀಕರಣದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಎಲಿಸಾ ಎಲಿಸಾದ ಮೂರನೇ ಬಳಕೆಯು ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಬಂಧನದ ಮೂಲಕವಾಗಿದೆ. ಈ ಎಲಿಸಾದ ಹಂತಗಳು ಮೊದಲ ಎರಡು ಉದಾಹರಣೆಗಳಿಗಿಂತ ಸ್ವಲ್ಪ ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆಃ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡದ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಅದರ ಪ್ರತಿಜನಕದ (ಮಾದರಿ) ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಬಂಧಿಸಲಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯ/ಪ್ರತಿಜನಕ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳನ್ನು ನಂತರ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಲೇಪಿತ ಬಾವಿಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ನಿರ್ಬಂಧವಿಲ್ಲದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ. (ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರತಿಜನಕವಿದ್ದರೆ, ಹೆಚ್ಚು ಏಜಿ-ಅಬ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಬಾವಿಯಲ್ಲಿನ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸಲು ಕಡಿಮೆ ನಿರ್ಬಂಧವಿಲ್ಲದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಲಭ್ಯವಿರುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ "ಸ್ಪರ್ಧೆ".) ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಎರಡನೇ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಕಿಣ್ವದೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉಳಿದ ಕಿಣ್ವಗಳು ವರ್ಣತಂತು ಅಥವಾ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಹೊರಹೊಮ್ಮಿಸುತ್ತವೆ. ಸಿಗ್ನಲ್ ಅಂತಿಮವಾಗಿ ಸ್ಯಾಚುರೇಶನ್ ಆಗುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕೆಲವು ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ELISA ಕಿಟ್ಗಳು ಕಿಣ್ವ-ಸಂಯೋಜಿತ ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಕಿಣ್ವ-ಸಂಯೋಜಿತ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ. ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಜನಕವು ಮಾದರಿ ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ (ಲೇಬಲ್ ಮಾಡದ) ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಬಂಧಿಸುವ ತಾಣಗಳಿಗೆ ಸ್ಪರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಆಂಟಿಜೆನ್ ಇದ್ದರೆ, ಹೆಚ್ಚು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಆಂಟಿಜೆನ್ ಅನ್ನು ಬಾವಿಯಲ್ಲಿ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಿಗ್ನಲ್ ಬಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಮೊದಲು ಬಾವಿಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಎಚ್ಐವಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು, ಮೈಕ್ರೋಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್ನ ಬಾವಿಗಳನ್ನು ಎಚ್ಐವಿ ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಲೇಪಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎರಡು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಒಂದು ಕಿಣ್ವದೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿತವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿದೆ (ಸೀರಮ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕೆ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿದ್ದರೆ). ಒಂದೇ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕಾಗಿ ಎರಡು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ನಡುವೆ ಸಂಚಿತ ಸ್ಪರ್ಧೆಯು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಬಲವಾದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಕಾಣುವಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ ಸೆರಾವನ್ನು ಈ ಬಾವಿಗಳಿಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 37 ಡಿಗ್ರಿ ಸೆಲ್ಸಿಯಸ್ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಇದ್ದರೆ, ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವ-ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಎಚ್ಐವಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಪ್ರತಿಜನಕ ಉಳಿದಿಲ್ಲ. ಈ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಮುಕ್ತವಾಗಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ತೊಳೆಯುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ತೊಳೆಯಲ್ಪಡುತ್ತವೆ. ಸಬ್ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಅದರ ಮೇಲೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಲು ಯಾವುದೇ ಕಿಣ್ವವಿಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ಧನಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶವು ಯಾವುದೇ ಬಣ್ಣದ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ರಿವರ್ಸ್ ಎಲಿಸಾ (ಪರೋಕ್ಷ ಎಲಿಸಾ) ನಾಲ್ಕನೇ ಎಲಿಸಾ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಬಾವಿಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದಿಲ್ಲ. ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಾ ದ್ರವದಲ್ಲಿ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಲೇಬಲ್ ಮಾಡದ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಅದರ ಪ್ರತಿಜನಕದ (ಮಾದರಿ) ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಪ್ರತಿಜನಕಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಂಧಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಕಾವುಕೊಡುವ ಅವಧಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಂತರ ಸ್ಕ್ಯಾವೆಂಜರ್ ಧಾರಕದ ಮೂಲಕ ರವಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಟೆಸ್ಟ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಆಗಿರಬಹುದು ಅಥವಾ ಚಾನೆಲ್ ಮೂಲಕ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ ಹರಿವು ಆಗಿರಬಹುದು. ಸ್ಕ್ಯಾವೆಂಜರ್ ಧಾರಕ ಅಥವಾ ಕಾಲುವೆಯ ಮೇಲ್ಮೈಯು "ಸ್ಕ್ಯಾವೆಂಜರ್ ಆಂಟಿಜೆನ್ಸ್" ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಇವು ಮುಕ್ತ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳಿಗೆ ಹೋಲುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ಸಾಕಷ್ಟು ಹೋಲುತ್ತವೆ. ಸ್ಕ್ಯಾವೆಂಜರ್ ಧಾರಕವು ಸಾಕಷ್ಟು ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು ಮತ್ತು ಸ್ಕ್ಯಾವೆಂಜರ್ ಆಂಟಿಜೆನ್ಗಳು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಪರಿಚಯಿಸಲಾದ ಎಲ್ಲಾ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಂಧಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಸಮಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು. ಈಗ ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಲಾದ ಮತ್ತು ಬಂಧಿಸಲಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಮೂಲಕ ರವಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಸಾಧನವು ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೀಟರ್ ಅಥವಾ ಟ್ಯಾಗ್ಗಳನ್ನು ಬೆಳಗಿಸುವ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನೋಂದಾಯಿಸುವ ಇತರ ಸಾಧನವಾಗಿರಬಹುದು. ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಅನೇಕ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಒಂದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ಎಣಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಇದು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಳಿಗಳನ್ನು ಎರಡು (ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚು) ವಿಭಿನ್ನ ಬಣ್ಣದ ಟ್ಯಾಗ್ಗಳಿಂದ ಗುರುತಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಎರಡೂ ಟ್ಯಾಗ್ಗಳು ಕೋಶದ ಮೇಲೆ ಇದ್ದರೆ, ಆ ಕೋಶವು ಆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಒತ್ತಡವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಮಾತ್ರ ಇದ್ದರೆ, ಅದು ಅಲ್ಲ. ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಒಂದು ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಒಂದು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಮೈಕ್ರೋಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಉಪಕರಣಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು ಹೊಲದಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಕಿಣ್ವ ಗುರುತುಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಕೋಷ್ಟಕವು ELISA ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಕಿಣ್ವ ಗುರುತುಗಳನ್ನು ಪಟ್ಟಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ನಂತರ ಅಳೆಯಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಒ. ಪಿ. ಡಿ. (ಓ-ಫೆನೈಲೆನೆಡಿಯಮೈನ್ ಡೈಹೈಡ್ರೋಕ್ಲೋರೈಡ್) ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಂಯೋಜಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಆಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಎಚ್. ಆರ್. ಪಿ. (ಹಾರ್ಸ್ರಡಿಶ್ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್) ಅನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಅಂಬರ್ ಅನ್ನು ತಿರುಗಿಸುತ್ತದೆ. ಟಿಎಂಬಿ (3,3 ', 5,5'-ಟೆಟ್ರಾಮೆಥೈಲ್ ಬೆನ್ಜಿಡಿನ್) ಎಚ್ಆರ್ಪಿ ಪತ್ತೆ ಮಾಡುವಾಗ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಲ್ಫ್ಯೂರಿಕ್ ಅಥವಾ ಫಾಸ್ಪರಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಹಳದಿ ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ. ಎಚ್ಆರ್ಪಿ ಪತ್ತೆ ಮಾಡುವಾಗ ಎಬಿಟಿಎಸ್ (2,2 '-ಅಜಿನೋಬಿಸ್ [3-ಎಥೈಲ್ಬೆನ್ಜೋಥಿಯಾಜೋಲಿನ್-6-ಸಲ್ಫೋನಿಕ್ ಆಮ್ಲ]-ಡಯಾಮೋನಿಯಂ ಉಪ್ಪು) ಹಸಿರು ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಷಾರೀಯ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಅನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡುವಾಗ ಪಿ. ಎನ್. ಪಿ. ಪಿ. (ಪಿ-ನೈಟ್ರೋಫೆನಿಲ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್, ಡೈಸೋಡಿಯಂ ಸಾಲ್ಟ್) ಹಳದಿ ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ತಿರುಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕದ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಅಥವಾ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ELISA ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದಾದ್ದರಿಂದ, ಇದು ಸೀರಮ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಉಪಯುಕ್ತ ಸಾಧನವಾಗಿದೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಎಚ್ಐವಿ ಪರೀಕ್ಷೆ ಅಥವಾ ವೆಸ್ಟ್ ನೈಲ್ ವೈರಸ್). ಹಾಲು, ಕಡಲೆಕಾಯಿ, ವಾಲ್ನಟ್ಸ್, ಬಾದಾಮಿ ಮತ್ತು ಮೊಟ್ಟೆಗಳಂತಹ ಸಂಭಾವ್ಯ ಆಹಾರ ಅಲರ್ಜಿನ್ಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಮತ್ತು ಸೀಲಿಯಾಕ್ ಕಾಯಿಲೆಗೆ ಸೀರೋಲಾಜಿಕಲ್ ರಕ್ತ ಪರೀಕ್ಷೆಯಾಗಿ ಇದು ಆಹಾರ ಉದ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಗಳನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದೆ. ELISAಯನ್ನು ವಿಷಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ವರ್ಗದ ಔಷಧಿಗಳಿಗೆ ಕ್ಷಿಪ್ರ ಸಂಭಾವ್ಯ ಪರದೆಯಾಗಿಯೂ ಬಳಸಬಹುದು. ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ಎಚ್. ಐ. ವಿ. ಗೆ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಮೊದಲ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ಎಲಿಸಾ ಆಗಿದೆ. ಎಲಿಸಾದಲ್ಲಿ, ವ್ಯಕ್ತಿಯ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು 400 ಬಾರಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎಚ್ಐವಿ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಜೋಡಿಸಲಾಗಿರುವ ತಟ್ಟೆಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎಚ್ಐವಿಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಇದ್ದರೆ, ಅವು ಈ ಎಚ್ಐವಿ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಡಬಹುದು. ನಂತರ ಸೀರಮ್ನ ಎಲ್ಲಾ ಇತರ ಘಟಕಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ತಟ್ಟೆಯನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ವಿಶೇಷವಾಗಿ ತಯಾರಿಸಿದ "ಸೆಕೆಂಡರಿ ಆಂಟಿಬಾಡಿ"-ಇತರ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ-ನಂತರ ಪ್ಲೇಟ್ಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಮತ್ತೊಂದು ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ರಾಸಾಯನಿಕವಾಗಿ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಪ್ಲೇಟ್ಗೆ ಬಂಧಿಸಲಾದ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಪ್ಲೇಟ್ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವದ ವೇಗವರ್ಧನೆಯು ಬಣ್ಣ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿದೀಪಕದಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ELISA ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಒಂದು ಸಂಖ್ಯೆಯಾಗಿ ವರದಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ; ಈ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಅತ್ಯಂತ ವಿವಾದಾತ್ಮಕ ಅಂಶವೆಂದರೆ ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶದ ನಡುವಿನ "ಕಟ್-ಆಫ್" ಬಿಂದುವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವುದು. ಒಂದು ಕಟ್-ಆಫ್ ಬಿಂದುವನ್ನು ತಿಳಿದಿರುವ ಮಾನದಂಡದೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸುವ ಮೂಲಕ ನಿರ್ಧರಿಸಬಹುದು. ಕೆಲಸದ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಡ್ರಗ್ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ಗಾಗಿ ELISA ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಿದರೆ, ಕಟ್-ಆಫ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 50 ng/ml, ಮತ್ತು ಅನಲೈಟ್ನ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಿಳಿದಿರುವ ಮಾದರಿಗಿಂತ ಬಲವಾದ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಅಜ್ಞಾತಗಳು "ಧನಾತ್ಮಕ" ವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ದುರ್ಬಲ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಸಂಕೇತಗಳು "ಋಣಾತ್ಮಕ" ಆಗಿರುತ್ತವೆ. ಡೆಂಗ್ಯೂ, ಮಲೇರಿಯಾ, ಚಾಗಸ್ ಕಾಯಿಲೆ, ಜಾನ್ಸ್ ಕಾಯಿಲೆ ಮತ್ತು ಇತರ ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಕಾಯಿಲೆಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಎಲಿಸಾ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿವೆ. ವೈದ್ಯಕೀಯ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಲ್ಲಿ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಡಯಾಗ್ನೋಸ್ಟಿಕ್ಸ್ಗಾಗಿ ಎಲಿಸಾ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ELISAಯ ಇತರ ಉಪಯೋಗಗಳು ಹೀಗಿವೆಃ ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ SARS-CoV-2 ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದು ಕೂಡ ನೋಡಿ ಅಗ್ಲೂಟಿನೇಶನ್-ಪಿಸಿಆರ್ ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಲ್ಯಾಟರಲ್ ಫ್ಲೋ ಟೆಸ್ಟ್ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇ ಮೈಕ್ರೊಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್ ನೆಫೆಲೋಮೆಟ್ರಿ ಪ್ಲೇಕ್ ರಿಡಕ್ಷನ್ ನ್ಯೂಟ್ರಲೈಸೇಶನ್ ಟೆಸ್ಟ್ ಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್ ಸ್ರವಿಸುವಿಕೆಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು ಮತ್ತು ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಬಾಹ್ಯ ಕೊಂಡಿಗಳು "ELISA ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪರಿಚಯ"-ಅರಿಝೋನಾ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದಲ್ಲಿ ಅನಿಮೇಷನ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಎಚ್ಐವಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಳಸುವ ELISAಯ ಆರಂಭಿಕ ವಾಕ್-ಥ್ರೂ "ELISA ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ತತ್ವ"-ಎಲಿಸಾದ ತತ್ವದ ಅವಲೋಕನ ಮತ್ತು ಅಸ್ಸೇ ಜೀನಿ ಡಯಾಗ್ನೋಸ್ಟಿಕ್ ವೈರಾಲಜಿ ಇಮ್ಯುನೊಲಾಜಿಕ್ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಉಪಕರಣಗಳು.