Cell counting
ಜೀವಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ಎಂಬುದು ವೈದ್ಯಕೀಯ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಸೇರಿದಂತೆ ಜೀವ ವಿಜ್ಞಾನಗಳಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಎಣಿಕೆ ಅಥವಾ ಅಂತಹುದೇ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣದ ವಿವಿಧ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದಾದರೂ ಒಂದು ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ಇದು ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿಯ ಪ್ರಮುಖ ಉಪವಿಭಾಗವಾಗಿದ್ದು, ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಅಭ್ಯಾಸದಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ರೋಗಿಯು ಏಕೆ ಅನಾರೋಗ್ಯದಿಂದ ಬಳಲುತ್ತಿದ್ದಾನೆ ಮತ್ತು ಸಹಾಯ ಮಾಡಲು ಏನು ಮಾಡಬೇಕು ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಎಣಿಕೆ ವೈದ್ಯರಿಗೆ ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ದ್ರವ ಮಾಧ್ಯಮದೊಳಗಿನ ಜೀವಕೋಶದ ಎಣಿಕೆಗಳನ್ನು (ರಕ್ತ, ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ, ದುಗ್ಧರಸ, ಅಥವಾ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ರಿನ್ಸೇಟ್ನಂತಹವು) ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪ್ರತಿ ಘಟಕದ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ಹಲವಾರು ಜೀವಕೋಶಗಳಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತದೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಪ್ರತಿ ಮಿಲಿಲೀಟರ್ಗೆ 5,000 ಜೀವಕೋಶಗಳು). ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ಮತ್ತು ವೈದ್ಯಕೀಯದಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳಿಗೆ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಎಣಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ತಿಳಿದಿರುವ ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಣಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸಬಹುದು. ಜೀವಕೋಶಗಳ ಎಣಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯತೆಯ ಉದಾಹರಣೆಗಳೆಂದರೆಃ ವೈದ್ಯಕೀಯದಲ್ಲಿ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಬಿಳಿ ರಕ್ತ ಕಣಗಳಂತಹ ವಿವಿಧ ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ವ್ಯಕ್ತಿಯ ಆರೋಗ್ಯ ಸ್ಥಿತಿಯ ಬಗ್ಗೆ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ (ನೋಡಿಃ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಎಣಿಕೆ). ಜೀವಕೋಶ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಲ್ಲಿ, ರೋಗಿಗೆ ನೀಡಲಾಗುವ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು. ಅಂತೆಯೇ, ರಕ್ತದಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಇತರ ದೈಹಿಕ ದ್ರವಗಳಲ್ಲಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ, ವೈರಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ರೋಗಕಾರಕಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗದ ಪ್ರಗತಿಯ ಬಗ್ಗೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಸೋಂಕಿನೊಂದಿಗೆ ವ್ಯವಹರಿಸುವ ಯಶಸ್ಸಿನ ಮಟ್ಟವನ್ನು ತಿಳಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸಬೇಕಾದ ಕಾರಕಗಳು ಮತ್ತು ರಾಸಾಯನಿಕಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಲು ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲಿನ ಅನೇಕ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಜೀವಕೋಶದ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ತಿಳಿದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು. ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ದರವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸುವ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ (ಬೇರೆ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಹೊಸ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಸೃಷ್ಟಿಸಲು ಅವು ಎಷ್ಟು ವೇಗವಾಗಿ ವಿಭಜನೆಯಾಗುತ್ತವೆ) ಜೀವಕೋಶಗಳ ಎಣಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ವಿಷಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಂಡ ಜೀವಕೋಶಗಳಂತಹ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯ ಅಳತೆಯಾಗಿ ಸತ್ತ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಭಾಗವನ್ನು ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕುವುದು. ಹಸ್ತಚಾಲಿತ ಜೀವಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ಜೀವಕೋಶ ಎಣಿಕೆಗೆ ಹಲವಾರು ವಿಧಾನಗಳಿವೆ. ಕೆಲವು ಪ್ರಾಚೀನ ಮತ್ತು ವಿಶೇಷ ಉಪಕರಣಗಳ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ಯಾವುದೇ ಜೈವಿಕ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ಮಾಡಬಹುದು, ಆದರೆ ಇತರರು ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನಿಕ್ ಉಪಕರಣಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತಾರೆ. ಎಣಿಕೆ ಕೊಠಡಿಯು, ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಸ್ಲೈಡ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದನ್ನು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಎಣಿಕೆಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಹೆಮೋಸೈಟೋಮೀಟರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸೆಡ್ಜ್ವಿಕ್ ರಾಫ್ಟರ್ ಎಣಿಕೆ ಕೋಣೆಗಳು ಎರಡು ರೀತಿಯ ಎಣಿಕೆ ಕೋಣೆಗಳಾಗಿವೆ. ಹಿಮೋಸೈಟೋಮೀಟರ್ ಅದರ ಮಧ್ಯದಲ್ಲಿ ಎರಡು ಗ್ರಿಡ್ಡ್ ಕೋಣೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಅವುಗಳನ್ನು ಎಣಿಸುವಾಗ ವಿಶೇಷ ಗಾಜಿನ ಸ್ಲೈಡ್ನಿಂದ ಮುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕೋಶ ಸಂವರ್ಧನೆಯ ಒಂದು ಹನಿಯನ್ನು ಚೇಂಬರ್ ಮತ್ತು ಗಾಜಿನ ಹೊದಿಕೆಯ ನಡುವಿನ ಜಾಗದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅದನ್ನು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮೂಲಕ ತುಂಬಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನೋಡಿದಾಗ, ಸಂಶೋಧಕರು ತಿಳಿದಿರುವ ಗಾತ್ರದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ಎಣಿಸಲು ಗ್ರಿಡ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತಾರೆ. ಚೇಂಬರ್ ಮತ್ತು ಕವರ್ ನಡುವಿನ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಅಂತರವನ್ನು ಪೂರ್ವನಿರ್ಧರಿತವಾಗಿದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಎಣಿಸಿದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಮತ್ತು ಅದರೊಂದಿಗೆ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಬಹುದು. ದ್ರವಕ್ಕೆ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯ ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿದರೆ ಜೀವಕೋಶದ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಸಹ ನಿರ್ಧರಿಸಬಹುದು. ಅವುಗಳ ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ಅಗ್ಗದ ಮತ್ತು ವೇಗವಾಗಿರುವುದು; ಇದು ವೇಗವಾದ ಜೈವಿಕ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಆದ್ಯತೆಯ ಎಣಿಕೆ ವಿಧಾನವನ್ನಾಗಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಿದಂತೆ ಬೆಳೆದಿದೆಯೇ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸುವುದು ಮಾತ್ರ ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ ಕಲ್ಚರ್ ಅನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಎಣಿಕೆ ಅಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸುತ್ತದೆ. ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವು ಅನನುಕೂಲವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಪ್ರತಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯು ಅಳತೆಗೆ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಸೇರಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ಲೇಟಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಸಿಎಫ್ಯು ಎಣಿಕೆ ಒಂದು ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿನ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು, ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಸರಳವಾಗಿ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಾಧ್ಯಮದೊಂದಿಗೆ ಪೆಟ್ರಿ ಖಾದ್ಯದ ಮೇಲೆ ಲೇಪಿಸಬಹುದು. ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ತಟ್ಟೆಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ವಿತರಿಸಿದರೆ, ಪ್ರತಿ ಜೀವಕೋಶವು ಒಂದೇ ವಸಾಹತು ಅಥವಾ ವಸಾಹತು ರೂಪಿಸುವ ಘಟಕವನ್ನು (ಸಿಎಫ್ಯು) ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಊಹಿಸಬಹುದು. ನಂತರ ವಸಾಹತುಗಳನ್ನು ಎಣಿಸಬಹುದು, ಮತ್ತು ತಟ್ಟೆಯ ಮೇಲೆ ಹರಡಿದ ಕಲ್ಚರ್ನ ತಿಳಿದಿರುವ ಪರಿಮಾಣದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಜೀವಕೋಶದ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಬಹುದು. ಇದನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎ. ಎಸ್. ಟಿ. ಎಂ. ಡಿ. 5465 ಮಾನದಂಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎಣಿಕೆ ಕೋಣೆಗಳಂತೆ, ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಲೇಪನ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು ಹೆಚ್ಚು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ; ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಎಣಿಸಬಹುದಾದ ಒಂದೇ ವಸಾಹತುಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುವ ಬದಲು, "ಹುಲ್ಲುಗಾವಲು" ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಒಂದು ರಚನೆಯಾಗುತ್ತದೆಃ ಸಾವಿರಾರು ವಸಾಹತುಗಳು ಪರಸ್ಪರರ ಮೇಲೆ ಬೀಳುತ್ತವೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಲೇಪನವು ಎಲ್ಲದರಲ್ಲೂ ಅತ್ಯಂತ ನಿಧಾನವಾದ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆಃ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳಿಗೆ ಗೋಚರ ವಸಾಹತುಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಕನಿಷ್ಠ 12 ಗಂಟೆಗಳ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಈ ವಿಧಾನವು ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆಯಾದರೂ, ಇದು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯವಾದ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯ ನಿಖರವಾದ ಅಂದಾಜನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ (ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಮಾತ್ರ ಬೆಳೆಯಲು ಮತ್ತು ಗೋಚರ ವಸಾಹತುಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ). ಆದ್ದರಿಂದ ಔಷಧಿಗಳನ್ನು ಅಥವಾ ಇತರ ಬಾಹ್ಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ವಿರೋಧಿಸುವ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸುವ ಗುರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಇದನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಲೂರಿಯಾ-ಡೆಲ್ಬ್ರೂಕ್ ಪ್ರಯೋಗ ಅಥವಾ ಜೆಂಟಾಮಿಸಿನ್ ರಕ್ಷಣಾ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ). ಇದಲ್ಲದೆ, ಕಾಲೋನಿ ಕೌಂಟರ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ ಅಗರ್ ಫಲಕಗಳ ಮೇಲಿನ ವಸಾಹತುಗಳ ಗಣನೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಸುಗಮಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ವಿದ್ಯುತ್ ಪ್ರತಿರೋಧ ಒಂದು ಕೌಲ್ಟರ್ ಕೌಂಟರ್ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಣಿಸುವ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಸಾಧನವಾಗಿದೆ. ಇದು ಜೀವಕೋಶಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿದ್ಯುತ್ ಪ್ರತಿರೋಧವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ ಎಂಬ ಅಂಶವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ; ಬೇರೆ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಅವು ಬಹುತೇಕ ಯಾವುದೇ ವಿದ್ಯುತ್ ಅನ್ನು ನಡೆಸುವುದಿಲ್ಲ. ಕೌಲ್ಟರ್ ಕೌಂಟರ್ನಲ್ಲಿ, ವಿದ್ಯುಚ್ಛಕ್ತಿಯನ್ನು ನಡೆಸುವ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಈಜುವ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಒಂದೊಂದಾಗಿ ಸಣ್ಣ ಅಂತರದಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂತರವನ್ನು ಸುತ್ತುವರೆದಿರುವ ಎರಡು ವಿದ್ಯುದ್ವಾರಗಳು ವಿದ್ಯುತ್ತನ್ನು ನಡೆಸುತ್ತವೆ. ಯಾವುದೇ ಕೋಶವು ಅಂತರದಲ್ಲಿ ಇಲ್ಲದಿದ್ದಾಗ, ವಿದ್ಯುತ್ ಅಡೆತಡೆಯಿಲ್ಲದೆ ಹರಿಯುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಒಂದು ಕೋಶವನ್ನು ಅಂತರದಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಂಡಾಗ ಪ್ರವಾಹವು ಪ್ರತಿರೋಧಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಕೌಲ್ಟರ್ ಕೌಂಟರ್ ಅಂತಹ ಘಟನೆಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಎಣಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರವಾಹವನ್ನು (ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರತಿರೋಧವನ್ನು) ಅಳೆಯುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಿಕ್ಕಿಬಿದ್ದ ಜೀವಕೋಶದ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಇದೇ ರೀತಿಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು CASY ಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವಾಗಿದೆ. ಕೌಲ್ಟರ್ ಮತ್ತು CASY ಕೌಂಟರ್ಗಳು ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೀಟರ್ಗಳಿಗಿಂತ ತುಂಬಾ ಅಗ್ಗವಾಗಿವೆ, ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶ-ಚಕ್ರ ಸಂಶೋಧನೆಯಂತಹ ಜೀವಕೋಶದ ಸಂಖ್ಯೆಗಳು ಮತ್ತು ಗಾತ್ರಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಅನ್ವಯಗಳಿಗೆ, ಅವು ಆಯ್ಕೆಯ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ಮೇಲಿನ ವಿಧಾನಗಳಿಗಿಂತ ಇದರ ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ಕಡಿಮೆ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಬಹುದಾದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಜೀವಕೋಶಗಳು, ಅವುಗಳೆಂದರೆಃ ಸೆಕೆಂಡಿಗೆ ಸಾವಿರಾರು ಜೀವಕೋಶಗಳು. ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಖರತೆ ಮತ್ತು ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಮಹತ್ವವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿ ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿಯು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಎಣಿಕೆಗೆ ಅತ್ಯಂತ ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಮತ್ತು ದುಬಾರಿ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ಹರಿವಿನ ಸೈಟೋಮೀಟರ್ನಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಲೇಸರ್ ಕಿರಣದ ಮುಂದೆ ಕಿರಿದಾದ ಹರಿವಿನಲ್ಲಿ ಹರಿಯುತ್ತವೆ. ಕಿರಣವು ಅವುಗಳನ್ನು ಒಂದೊಂದಾಗಿ ಹೊಡೆಯುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಬೆಳಕಿನ ಶೋಧಕವು ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಪ್ರತಿಫಲಿಸುವ ಬೆಳಕನ್ನು ಎತ್ತಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೀಟರ್ಗಳು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಆಕಾರ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಆಂತರಿಕ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ರಚನೆಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವ ಜೊತೆಗೆ ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಅಳೆಯುವಂತಹ ಅನೇಕ ಇತರ ಸಾಮರ್ಥ್ಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಣಿಸುವ ಏಕೈಕ ಉದ್ದೇಶಕ್ಕಾಗಿ ಫ್ಲೋ ಸೈಟೋಮೀಟರ್ಗಳನ್ನು ಅಪರೂಪವಾಗಿ ಖರೀದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇತ್ತೀಚಿನ ವಿಧಾನಗಳು ಉನ್ನತ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಚಿತ್ರಗಳ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತವೆ, ಅದರ ಮೇಲೆ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಜೀವಕೋಶ ಪತ್ತೆ ಮತ್ತು ಎಣಿಕೆಯನ್ನು ಚಿತ್ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಕಾರ್ಯವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವರ್ಗೀಕರಣ ಅಲ್ಗಾರಿದಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಆಫ್-ಲೈನ್ (ಬ್ಯಾಚ್) ರೀತಿಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಸ್ಥಿರ ದೋಷ ದರದೊಂದಿಗೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಉದ್ದೇಶಕ್ಕಾಗಿ ಚಿತ್ರ ವರ್ಗೀಕರಣ ತಂತ್ರಗಳ ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು. ಸ್ಟೀರಿಯೊಲಾಜಿಕ್ ಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ಪ್ರಸ್ತುತ, ಪಕ್ಷಪಾತವಿಲ್ಲದ ಸ್ಟೀರಿಯೊಲಾಜಿಕ್ ಎಣಿಕೆ ನಿಯಮಗಳ ಪ್ರಕಾರ ವಸ್ತುವಿನ ಸೇರ್ಪಡೆಗಾಗಿ ಕೈಯಿಂದ ನಿರ್ಧಾರದೊಂದಿಗೆ ಸ್ಟೀರಿಯೊಲಾಜಿಕ್ ಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ಹಿಸ್ಟೋಲಾಜಿಕ್ ಅಂಗಾಂಶ ವಿಭಾಗಗಳಲ್ಲಿ ಪಕ್ಷಪಾತವಿಲ್ಲದ ಜೀವಕೋಶದ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕೆ ಸಾಕಷ್ಟು ವಿಧಾನವಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಇದು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತವಾಗಲು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಪರೋಕ್ಷ ಜೀವಕೋಶ ಎಣಿಕೆ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿ ಜೀವಕೋಶದ ಅಮಾನತುಗಳು ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧವಾಗಿವೆ. ಜೀವಕೋಶಗಳು ಬೆಳಕನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಚದುರಿಸುತ್ತವೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ, ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ. ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೀಟರ್ಗಳು ಬೆಳಕಿನ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಬಹಳ ನಿಖರವಾಗಿ ಅಳೆಯಬಲ್ಲವು. ಜೀವಕೋಶದ ಸಂವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಪಾರದರ್ಶಕ ಕ್ಯೂವೆಟ್ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ ಮಾತ್ರ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು (OD) ಜೀವಕೋಶದ ಪ್ರಕಾರಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶದ ಅಮಾನತುಗಳಲ್ಲಿನ ಜೀವರಾಶಿಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ. ಕಲ್ಚರ್ಗಳ ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿಯನ್ನು ಬಳಸುವುದನ್ನು ಟರ್ಬಿಡೊಮೆಟ್ರಿ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿಯನ್ನು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಸಂಬಂಧಿತ ಅನ್ವಯಗಳ ಅಳತೆಗಾಗಿ ಆಯ್ಕೆಯ ವಿಧಾನಗಳನ್ನಾಗಿ ಮಾಡಿದೆ. ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೊಮೆಟ್ರಿಯ ನ್ಯೂನತೆಯೆಂದರೆ, ಜೀವಂತ ಮತ್ತು ಸತ್ತ ಜೀವಕೋಶಗಳ ನಡುವೆ ಸಂಪೂರ್ಣ ಎಣಿಕೆ ಅಥವಾ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಅದರ ಅಸಮರ್ಥತೆ. ಪ್ರತಿರೋಧ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಜೀವವಿಜ್ಞಾನವು ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಾಧ್ಯಮದ ವಿದ್ಯುತ್ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಮಾದರಿಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು (ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಆದರೆ ಯೀಸ್ಟ್ಗಳು) ಅಳೆಯಲು ಬಳಸುವ ತ್ವರಿತ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಜೀವವಿಜ್ಞಾನದ ತಂತ್ರವಾಗಿದೆ. ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಚಯಾಪಚಯವು ಚಾರ್ಜ್ ಮಾಡದ (ಅಥವಾ ದುರ್ಬಲವಾಗಿ ಚಾರ್ಜ್ ಮಾಡಲಾದ) ಸಂಯುಕ್ತಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಚಾರ್ಜ್ ಮಾಡಲಾದ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಾಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೀಗಾಗಿ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಧ್ಯಮ ವಿದ್ಯುತ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಅಂಶವನ್ನು ಇದು ಆಧರಿಸಿದೆ. ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲಾದ ವಿದ್ಯುತ್ ನಿಯತಾಂಕಗಳು ಆರಂಭಿಕ ಬೇಸ್ಲೈನ್ ಮೌಲ್ಯದಿಂದ ವಿಮುಖವಾಗಲು ಬೇಕಾದ ಸಮಯದ ಮೇಲೆ ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇಂಪೆಡೆನ್ಸ್ ಮೈಕ್ರೋಬಯಾಲಜಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲು ವಿವಿಧ ಉಪಕರಣಗಳು (ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ನಿರ್ಮಿಸಿದ ಅಥವಾ ವಾಣಿಜ್ಯಿಕವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಿರುವ) ಲಭ್ಯವಿವೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಜೀವಕೋಶ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ತಂತ್ರಗಳು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ತಂತ್ರಗಳು