Adherent culture
ಅನುವರ್ತಿತ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು ಒಂದು ರೀತಿಯ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಾಗಿದ್ದು, ಬೆಳವಣಿಗೆ ಸಂಭವಿಸುವ ಸಲುವಾಗಿ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಜೋಡಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಶೇರುಕದಿಂದ ಪಡೆದ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು (ಹೆಮಟೊಪೊಯೆಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸಿ) ಸಂಸ್ಕರಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶದ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಹರಡುವಿಕೆಯನ್ನು ಸುಲಭಗೊಳಿಸಲು 2 ಆಯಾಮದ ಏಕ ಪದರದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಅಂಗಾಂಶ ಪರಿಶೋಧಕರು ಅಥವಾ ಜೀವಕೋಶದ ಅಮಾನತು ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಂದ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಲಭ್ಯವಿರುವ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಆವರಿಸುವವರೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ ಪೋಷಕಾಂಶಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುವ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು ಬೆಳೆಯುತ್ತಲೇ ಇರುತ್ತವೆ. ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ನಂತಹ ಪ್ರೋಟೀಸ್ಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್ಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಮುರಿಯಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿ, ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವುದರಿಂದ ಜೀವಕೋಶದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಗೆ ಹಾನಿಯಾಗಬಹುದಾದರೆ, ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಯಾಂತ್ರಿಕವಾಗಿ ಮುರಿಯಲು ಜೀವಕೋಶದ ಸ್ಕ್ರೇಪರ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು. ಅಮಾನತು ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಗಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿ, ಇತರ ಪ್ರಮುಖ ರೀತಿಯ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿ, ಅನುವರ್ತಕ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಗೆ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಅಥವಾ ಕಿಣ್ವದ ವಿಯೋಜನೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನಿಯಮಿತವಾಗಿ ಹಾದುಹೋಗುವ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ತಲೆಕೆಳಗಾದ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಂಸ್ಕೃತಿಯನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಬಹುದು, ಆದಾಗ್ಯೂ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯು ಲಭ್ಯವಿರುವ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಕಾರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಜೀವಕೋಶಗಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಅನುವರ್ತಕ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಬದಲಿಗೆ ಅಮಾನತು ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ಬಳಕೆಗೆ ಆದ್ಯತೆ ನೀಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕಗೊಳ್ಳುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಲ್ಚರ್ಗಳಿಗೆ ಬಳಸಲಾಗುವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ವಿಷಯದಿಂದ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಬೇಕು, ಅಥವಾ ಮೊದಲೇ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ಜೀವಕೋಶದ ರೇಖೆಗಳಿಂದ ವರ್ಗಾಯಿಸಬಹುದು. ಅನುವರ್ತಕ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಮೊದಲು ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಏಕ ಪದರಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಂದ ವರ್ಗೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಫೈಬ್ರೊಬ್ಲಾಸ್ಟ್ನಂತಹ ಅಂಟಿಕೊಂಡಿರುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ರೇಖೀಯ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಿಸಿದ ಆಕಾರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಏಕ ಪದರಕ್ಕೆ ಜೋಡಿಸಿದಾಗ ಸ್ಥಳಾಂತರಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ತರಹದ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಜೀವಕೋಶಗಳು ವಿಶಾಲವಾದ ಮತ್ತು ಬಹುಭುಜಾಕೃತಿಯ ಆಕಾರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಏಕ ಪದರಕ್ಕೆ ಜೋಡಿಸಿದಾಗ ಅವು ಸ್ಥಳಾಂತರಗೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ. ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಅವುಗಳ ಮೂಲದಿಂದ ಸರಿಯಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿದ ನಂತರ ಮತ್ತು ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿದ ನಂತರ, ಜೀವಕೋಶದ ಹಾದಿಯನ್ನು ನಡೆಸಬಹುದು. ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಿಗೆ ಅನುವರ್ತಿತ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ನಿರ್ವಹಣೆ ಅನುವರ್ತಿತ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಹಾದುಹೋಗುವಾಗ, ಖರ್ಚು ಮಾಡಿದ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಪದೇ ಪದೇ ಹೊರತೆಗೆಯಬೇಕು ಮತ್ತು ತಾಜಾ ಮಾಧ್ಯಮದೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕು. ಕಲ್ಚರ್ ನಾಳವನ್ನು ಪದೇ ಪದೇ ಸ್ಪರ್ಶಿಸಬಹುದು, ಜೀವಕೋಶದ ಬೇರ್ಪಡುವಿಕೆಯನ್ನು ಸುಲಭಗೊಳಿಸಲು ಇದನ್ನು ಯಾಂತ್ರಿಕ ಅಥವಾ ಕಿಣ್ವಕ ವಿಧಾನಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಬೇಕು. ಕಲ್ಚರ್ ಹಡಗಿನನ್ನು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಬಹುದು, ಇದು ಪೈಪೆಟ್ ಬಳಸಿ ಹೊರತೆಗೆಯಬಹುದಾದ ಸೂಪರ್ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಜೀವಕೋಶಗಳಿಗೆ ವಾರಕ್ಕೆ 2 ರಿಂದ 3 ಬಾರಿ ಆಹಾರ ನೀಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಜೀವಕೋಶ ಪ್ರಸರಣವನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಸೂಕ್ತವಾದ ತಾಪಮಾನ, ತೇವಾಂಶ, ಬೆಳಕು ಮತ್ತು ಪಿ. ಎಚ್. ನಲ್ಲಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಬೇಕು. ಹಾದುಹೋಗುವ (ಉಪಸಂಸ್ಕೃತಿಯ) ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅನುವರ್ತಕ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು ಅಮಾನತು ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಕೆಗಳನ್ನು ಹಂಚಿಕೊಂಡರೂ, ಅವುಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹಾದುಹೋಗಲಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬುದರಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಪ್ರಮುಖ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿವೆ. ಕಲ್ಚರ್ ಪ್ಯಾಸೇಜಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಅನುಸರಿಸಲು, ಖರ್ಚು ಮಾಡಿದ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಮೊದಲು ಕೋಶಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್ನಿಂದ ತ್ಯಾಜ್ಯ ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಪಾತ್ರೆಯಲ್ಲಿ ತೆಗೆದುಹಾಕದ ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಅಂಟಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ತೊಳೆಯುವ ಮತ್ತು ಕಾವುಕೊಡುವ ಹಂತಗಳ ಸರಣಿ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ತೊಳೆಯುವ ಹಂತಗಳಿಗಾಗಿ, ಸಮತೋಲಿತ ಉಪ್ಪಿನ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಜೀವಕೋಶದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಎದುರಿನ ಬದಿಗೆ ಸುರಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಮತೋಲಿತ ಉಪ್ಪಿನ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬರಿದು ಮಾಡುವ ಮೊದಲು ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಪಾತ್ರೆಯನ್ನು ಅಲುಗಾಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಾವುಕೊಡುವ ಹಂತಗಳಿಗಾಗಿ ಕಲ್ಚರ್ ನಾಳಕ್ಕೆ ಶಾಖವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಕೃತೀಕರಣಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಮಾಧ್ಯಮದಿಂದ ಕ್ರಮೇಣ ಬೇರ್ಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಸಸ್ಪೆನ್ಷನ್ ಕಲ್ಚರ್ಗಳಂತೆಯೇ, ಹಿಮೋಸೈಟೋಮೀಟರ್ ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಸಿ ಒಟ್ಟು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕ ಹಾಕಬಹುದು. ವಾಣಿಜ್ಯ ಅನ್ವಯಗಳು ಮತ್ತು ಮಿತಿಗಳು ಅನುವರ್ತಕ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕೋಶಶಾಸ್ತ್ರಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಕೊಯ್ಲು ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅವುಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯು 2ಡಿ ಗೆ ಸೀಮಿತವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಇನ್-ವಿವೋ ಜೀವಕೋಶದ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಅನುಸರಣೆಯ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಕಷ್ಟ. ಈ ಮಿತಿಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಮತ್ತು ಔಷಧ ಪರೀಕ್ಷೆಗಾಗಿ ಅನುಸರಿಸುವ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಲು 3ಡಿ ಮೈಕ್ರೋಕ್ಯಾರಿಯರ್ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಅನುಸರಿಸುವ ಜೀವಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಲು ಸಂಶೋಧನೆ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತಿದೆ. ಅನುಸರಣೆ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳ ವಾಣಿಜ್ಯ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನವುಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿವೆಃ ಲಸಿಕೆ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗೆ ಬಳಸುವ ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳನ್ನು ರಚಿಸುವ ಅನುಸರಣೆ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದು. ಜೀವಕೋಶ ಮತ್ತು ಜೀನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ವೈರಲ್ ವಾಹಕಗಳ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಅನುವರ್ತಕ ಜೀವಕೋಶಗಳು. ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಮತ್ತು ನ್ಯಾನೊತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಇನ್ ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿರುವ ಅನುವರ್ತಕ ಕೋಶಗಳಿಗೆ ತಲುಪಿಸುವುದು. ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಜೀವಕೋಶದ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ಗಾಗಿ ಅನುವರ್ತಿತ ಜೀವಕೋಶದ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸುವುದು. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಜೀವಕೋಶದ ಸಂಸ್ಕೃತಿ