CFTR inhibitory factor
ಸಿ. ಎಫ್. ಟಿ. ಆರ್. ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಅಂಶವು (ಸಿ. ಐ. ಎಫ್.) ಗ್ರಾಂ-ಋಣಾತ್ಮಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಸೂಡೊಮೊನಸ್ ಎರುಜಿನೋಸಾ ಮತ್ತು ಅಸಿನೆಟೊಬ್ಯಾಕ್ಟರ್ ನೊಸೊಕೊಮಿಯಾಲಿಸ್ನಿಂದ ಸ್ರವಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ ವೈರಲೆನ್ಸ್ ಅಂಶವಾಗಿದೆ. ಡಾರ್ಟ್ಮೌತ್ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಶಾಲೆಯಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಯಾದ ಸಿಫ್, ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಆಯ್ದ ಎಬಿಸಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಪೋರ್ಟರ್ಗಳ ಕಳ್ಳಸಾಗಣೆಯನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಸಿಸ್ಟಿಕ್ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಮೆಂಬ್ರೇನ್ ಕಂಡಕ್ಟನ್ಸ್ ರೆಗ್ಯುಲೇಟರ್ (ಸಿಎಫ್ಟಿಆರ್), ಮತ್ತು ಪಿ-ಗ್ಲೈಕೊಪ್ರೋಟೀನ್ ಹೋಸ್ಟ್ ಡ್ಯೂಬಿಕ್ವಿಟೇಟಿಂಗ್ ಯಂತ್ರೋಪಕರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಮಧ್ಯಪ್ರವೇಶಿಸುವ ಮೂಲಕ. ಸಿಎಫ್ಟಿಆರ್ನ ಯುಬಿಕ್ವಿಟಿನ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಅವನತಿಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಸಿಎಫ್ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ಸಿಸ್ಟಿಕ್ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಫಿನೋಕಪಿ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಸಿ. ಐ. ಎಫ್ ವಂಶವಾಹಿಯನ್ನು 3 ಜೀನ್ ಒಪೆರಾನ್ನ ಭಾಗವಾಗಿ ಲಿಪ್ಯಂತರ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಟಿ. ಟಿ. ಆರ್ ಕುಟುಂಬದ ದಮನಕವಾದ ಸಿ. ಐ. ಎಫ್. ಆರ್ ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಮಾನವ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಪಿ. ಎರುಜಿನೋಸಾವನ್ನು ಸಹ-ಬೆಳೆಸುವ ಮೂಲಕ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಕೃತ ಏಕ ಪದರದಾದ್ಯಂತ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಅಯಾನು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯ ಮೇಲೆ ಉಂಟಾಗುವ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಸಿಫ್ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಮೊದಲು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು. ಸಹ-ಕೃಷಿಯ ನಂತರ, ಸಿ. ಎಫ್. ಟಿ. ಆರ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಅಯಾನು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯು ತೀವ್ರವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿರುವುದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ. ಈ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಮೇಲ್ಭಾಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಸಿ. ಎಫ್. ಟಿ. ಆರ್ ಮಟ್ಟ ಕಡಿಮೆಯಾಗುವುದರಿಂದ ಇದು ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು. ಈ ಪರಿಣಾಮವು ಪಿ. ಎರುಜಿನೋಸಾದಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾದ ಏಕೈಕ ಸ್ರವಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿದೆ ಎಂದು ನಂತರ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ, ಇದನ್ನು ಈ ಆರಂಭಿಕ ಫಿನೋಟೈಪ್ಗೆ ಸಿಎಫ್ಟಿಆರ್ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಅಂಶ ಎಂದು ಹೆಸರಿಸಲಾಯಿತು. ಸಿ. ಐ. ಎಫ್ ಅನ್ನು ಪಿ. ಏರುಗಿನೋಸಾ ಪಿ. ಎ. 14 ಕರಗುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಆಗಿ ಸ್ರವಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೊರಗಿನ ಮೆಂಬರೇನ್ ವೆಸಿಕಲ್ಸ್ (ಒಎಂವಿ) ಗೆ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಒಎಂವಿಗಳಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸಿದಾಗ ಸಿಫ್ ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರಬಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಬಹುಶಃ ವಿತರಣೆಯ ದಕ್ಷತೆಯಿಂದಾಗಿ. ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ, ಮರುಸಂಯೋಜಿತ ಸಿಫ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಸಸ್ತನಿ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಧ್ರುವೀಕೃತ ಮೊನೊಲೇಯರ್ಗಳಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಅಪಿಕಲ್ ಮೆಂಬರೇನ್ನಿಂದ ಸಿ. ಎಫ್. ಟಿ. ಆರ್ ಮತ್ತು ಪಿ-ಗ್ಲೈಕೊಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಬಹುದು. ಆತಿಥೇಯ ಡ್ಯೂಬಿಕ್ವಿಟಿಲೇಷನ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಮಧ್ಯಪ್ರವೇಶಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಿಫ್ ಇದನ್ನು ಸಾಧಿಸುತ್ತದೆ. ಎಪಾಕ್ಸೈಡ್ ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್ ಕಿಣ್ವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನ ಸಿ. ಐ. ಎಫ್. ವಿಶಿಷ್ಟ ತಲಾಧಾರದ ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಎಪಾಕ್ಸೈಡ್ ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್ (ಇ. ಎಚ್.) ಆಗಿದೆ. ವೈರಸ್ ಅಂಶವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಇ. ಎಚ್. ಗೆ ಸಿ. ಐ. ಎಫ್ ಮೊದಲ ಉದಾಹರಣೆಯಾಗಿದೆ. ರಚನಾತ್ಮಕ ಹೋಲಿಕೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಕಿಣ್ವವು ಆಸ್ಪ್129, ಗ್ಲು153 ಮತ್ತು ಹಿಸ್297 ಅವಶೇಷಗಳ ವೇಗವರ್ಧಕ ತ್ರಿಕೋನವನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರುತ್ತದೆ, ಸಹಾಯಕ ಅವಶೇಷಗಳಾದ ಹಿಸ್177 ಮತ್ತು ಟೈರ್239 ರಿಂಗ್ ತೆರೆಯುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಎಪಾಕ್ಸೈಡ್ ಆಮ್ಲಜನಕವನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತವೆ. ಕ್ಯಾನೊನಿಕಲ್ ಟೈರ್-ಟೈರ್ ಜೋಡಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಎಪಾಕ್ಸೈಡ್ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಸಂಘಟಿಸಲು ಹಿಸ್-ಟೈರ್ ಜೋಡಿಯನ್ನು ಬಳಸುವ ಇಎಚ್ಗೆ ಸಿಫ್ ಮೊದಲ ಉದಾಹರಣೆಯಾಗಿದೆ. ಪ್ರಸ್ತಾವಿತ ಕಿಣ್ವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದಲ್ಲಿ, ಆಸ್ಪ್129 ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಫಿಲಿಕ್ ಆಗಿ ತಲಾಧಾರದ ಎಪಾಕ್ಸೈಡ್ ಭಾಗದ ಇಂಗಾಲದ ಮೇಲೆ ದಾಳಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಎಸ್ಟರ್-ಲಿಂಕ್ಡ್ ಕಿಣ್ವ-ಆಸಿಲ್ ಮಧ್ಯಂತರವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಇಂಗಾಲದ ಮೇಲೆ ದಾಳಿ ಮಾಡುವ ಆದ್ಯತೆಯು ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಎರಡನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಚಾರ್ಜ್-ರಿಲೇ ಹಿಸ್297-ಗ್ಲೂ153 ಜೋಡಿಯು ನೀರಿನ ಅಣುವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆಸ್ಪ್129 ರ ಸಿಜಿಎಂ ಮೇಲೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಫಿಲಿಕ್ ದಾಳಿಗೆ ಒಳಗಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಎಸ್ಟರ್ ಗುಂಪನ್ನು ಜಲವಿಚ್ಛೇದನಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಜಲವಿಚ್ಛೇದನದ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ವಿಸಿನಲ್ ಡೈಯೋಲ್ ಆಗಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಸಿಫ್ ರಚನೆಯು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ α/β ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್ ಕುಟುಂಬಕ್ಕೆ ಸೇರಿದೆ. ಇದರ ರಚನೆಯನ್ನು ಕ್ಷ-ಕಿರಣ ಸ್ಫಟಿಕಶಾಸ್ತ್ರದಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಪ್ ಡೊಮೇನ್ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ಯಾನೊನಿಕಲ್ α/β ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್ ಪದರವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಇದನ್ನು ಇದು ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಏಕರೂಪವಾಗಿ ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸಲು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಸಕ್ರಿಯ ತಾಣವನ್ನು ಪ್ರೋಟೀನ್ನ ಒಳಭಾಗದಲ್ಲಿ α/β ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್ ಕೋರ್ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಪ್ ನಡುವಿನ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ನಲ್ಲಿ ಹೂಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ವೈರಲೆನ್ಸ್ ಅಂಶಗಳು ಸಿಸ್ಟಿಕ್ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್