Biodesulfurization
ಜೈವಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣವು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳು ಅಥವಾ ಅವುಗಳ ಕಿಣ್ವಗಳ ಬಳಕೆಯ ಮೂಲಕ ಕಚ್ಚಾ ತೈಲದಿಂದ ಗಂಧಕವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ಹಿನ್ನೆಲೆ ಕಚ್ಚಾ ತೈಲವು ಅದರ ಸಂಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ ಗಂಧಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಎರಡನೆಯದು ಇಂಗಾಲ ಮತ್ತು ಜಲಜನಕದ ನಂತರ ಅತ್ಯಂತ ಹೇರಳವಾಗಿರುವ ಅಂಶವಾಗಿದೆ. ಅದರ ಮೂಲವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ, ಕಚ್ಚಾ ತೈಲದಲ್ಲಿರುವ ಗಂಧಕದ ಪ್ರಮಾಣವು 0.05 ರಿಂದ 10 ಪ್ರತಿಶತದವರೆಗೆ ಇರುತ್ತದೆ. ಅದಕ್ಕನುಗುಣವಾಗಿ, ಗಂಧಕದ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಶೇಕಡಾ 0.5ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿದ್ದರೆ ತೈಲವನ್ನು ಸಿಹಿ ಅಥವಾ ಹುಳಿ ಎಂದು ವರ್ಗೀಕರಿಸಬಹುದು. ಕಚ್ಚಾ ತೈಲದ ದಹನವು ವಾತಾವರಣಕ್ಕೆ ಸಲ್ಫರ್ ಆಕ್ಸೈಡ್ಗಳನ್ನು (ಎಸ್ಒಎಕ್ಸ್) ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಾರ್ವಜನಿಕ ಆರೋಗ್ಯಕ್ಕೆ ಹಾನಿಕಾರಕವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವಾಯು ಮಾಲಿನ್ಯ ಮತ್ತು ಆಮ್ಲ ಮಳೆಯಂತಹ ಗಂಭೀರ ಪರಿಸರ ಪರಿಣಾಮಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಕಚ್ಚಾ ತೈಲದಲ್ಲಿನ ಗಂಧಕದ ಅಂಶವು ಸಂಸ್ಕರಣಾಗಾರಗಳಿಗೆ ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಸಮಸ್ಯೆಯಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಉಪಕರಣಗಳ ತುಕ್ಕು ಮತ್ತು ಉದಾತ್ತ ಲೋಹದ ವೇಗವರ್ಧಕಗಳ ವಿಷವನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ. ಯಾವುದೇ ತೈಲ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿನ ಗಂಧಕದ ಮಟ್ಟವು ಅದರಿಂದ ಪಡೆದ ಪಳೆಯುಳಿಕೆ ಇಂಧನಗಳಿಗೆ (ಗ್ಯಾಸೋಲಿನ್, ಡೀಸೆಲ್ ಅಥವಾ ಜೆಟ್ ಇಂಧನದಂತಹವು) ಆರ್ಗನೋಸಲ್ಫರ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಪೂರ್ವ-ಸಂಸ್ಕರಣೆಯಿಲ್ಲದೆ ದಹನ ಎಂಜಿನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಕಚ್ಚಾ ತೈಲದಲ್ಲಿ ಸಲ್ಫರ್ನ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವುದು ಅದರ ದಹನದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಹಾನಿಕಾರಕ ಆರೋಗ್ಯ ಮತ್ತು ಪರಿಸರ ಪರಿಣಾಮಗಳ ಪ್ರಮುಖ ಮೂಲಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ತಗ್ಗಿಸಲು ಅಗತ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಅರ್ಥದಲ್ಲಿ, ಯುರೋಪಿಯನ್ ಒಕ್ಕೂಟವು ಡೀಸೆಲ್ನಲ್ಲಿನ ಸಲ್ಫರ್ ಅಂಶವನ್ನು 10 ಪಿಪಿಎಂಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಕ್ರಮಗಳನ್ನು ಕೈಗೊಂಡಿದೆ, ಆದರೆ ಯುಎಸ್ ಡೀಸೆಲ್ ಮತ್ತು ಗ್ಯಾಸೋಲಿನ್ನಲ್ಲಿನ ಸಲ್ಫರ್ ಅಂಶವನ್ನು ಗರಿಷ್ಠ 15 ಪಿಪಿಎಂಗೆ ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲು ಪ್ರಯತ್ನಗಳನ್ನು ಮಾಡಿದೆ. ತೈಲ ಇಂಧನಗಳಲ್ಲಿನ ಗಂಧಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಕಡಿತವನ್ನು ಸಲ್ಫರೀಕರಣ ಎಂಬ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಿಂದ ಸಾಧಿಸಬಹುದು. ಸಲ್ಫರೀಕರಣಕ್ಕೆ ಬಳಸುವ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ, ಇತರವುಗಳಲ್ಲಿ, ಹೈಡ್ರೋಡಿಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್, ಆಕ್ಸಿಡೇಟಿವ್ ಡಿಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್, ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಡಿಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ಅಯಾನಿಕ್ ದ್ರವಗಳಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಸೇರಿವೆ. ಸಲ್ಫರ್ ಅಂಶವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ದಕ್ಷತೆಯ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್ ವಿಧಾನಗಳು ಕಚ್ಚಾ ತೈಲ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಗಮನಾರ್ಹ ಪ್ರಮಾಣದ CO2 ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಗೆ ಇನ್ನೂ ಕಾರಣವಾಗಿದ್ದು, ವರ್ಷಕ್ಕೆ 9000 ಮೆಟ್ರಿಕ್ ಟನ್ಗಳವರೆಗೆ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡುತ್ತವೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ ಶಕ್ತಿಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಕೈಗಾರಿಕೆಗಳಿಗೆ ಭಾರೀ ವೆಚ್ಚವಾಗುತ್ತದೆ. ಜೈವಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣವು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣ ವಿಧಾನಗಳಿಗೆ ಹಸಿರು ಮತ್ತು ಪೂರಕ ಪರ್ಯಾಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ಜೈವಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣದ ಅನುಷ್ಠಾನ ಮತ್ತು ಮಾರ್ಗಗಳು ಸಲ್ಫರ್-ಅವಲಂಬಿತ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ತಮ್ಮ ಜೀವನ ಚಕ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಸಲ್ಫರ್ ಹೊಂದಿರುವ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಲ್ಲಿ ಸಲ್ಫರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತವೆ (ಅವುಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಅಥವಾ ಚಯಾಪಚಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ), ಸಲ್ಫರ್ನಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ/ಯಾವುದೇ ಅಂಶವಿಲ್ಲದ ಅಣುಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಹೆಟೆರೊಆರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು, ಅವುಗಳೆಂದರೆ ಥಿಯೋಫೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರಮುಖ ತಲಾಧಾರಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ. ಜೈವಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣವು ಗಂಧಕವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಒಂದು ಆಕರ್ಷಕ ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಸಲ್ಫರ್ ಹೆಟೆರೊಸೈಕಲ್ಗಳು ಹೇರಳವಾಗಿರುವ ಕಚ್ಚಾ ತೈಲ ಭಾಗಗಳಲ್ಲಿ. ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ, ಕೈಗಾರಿಕಾ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳಿಗಾಗಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರಯತ್ನಗಳು ಸಂಪೂರ್ಣ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಆಶ್ರಯಿಸಿವೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಜೈವಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣವು ವಿವಿಧ ಕಿಣ್ವಗಳ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಅನುಕ್ರಮ ಕ್ಯಾಸ್ಕೇಡ್ ಮತ್ತು ಸಲ್ಫರ್ ಪರಮಾಣು ಅಥವಾ ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕದೊಂದಿಗೆ ರೆಡಾಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ಭಾಗವಹಿಸುವ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಒಟ್ಟಾರೆ ಕಡಿಮೆ ಕಿಣ್ವ ದಕ್ಷತೆ, ಉತ್ಪನ್ನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ನಿರೋಧಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ವಿಷತ್ವ ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಬೆಳವಣಿಗೆಗೆ ಅಸಮರ್ಪಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಿಂದಾಗಿ ಅವು ಕೈಗಾರಿಕಾ ಸೆಟಪ್ಗೆ ಅಪೇಕ್ಷಿತವಾದ ಸ್ಕೇಲೆಬಿಲಿಟಿ ಹೊಂದಿರಲಿಲ್ಲ. ಜೀವಕೋಶ-ಮುಕ್ತ ರಿಕಾಂಬಿನೆಂಟ್ ಕಿಣ್ವಗಳು ಅಪೇಕ್ಷಣೀಯವಾಗಿದ್ದರೂ, ತಿಳಿದಿರುವ ಅನುಷ್ಠಾನಗಳು ಇನ್ನೂ ಸಂಪೂರ್ಣ ಜೀವಕೋಶದ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿವೆ. ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಸಲ್ಫರ್-ಹೊಂದಿರುವ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಿಂದ ಸಲ್ಫರ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವ ಎರಡು ಪ್ರಮುಖ ಮಾರ್ಗಗಳಿವೆಃ ರಿಂಗ್ ವಿನಾಶಕಾರಿ ಮಾರ್ಗಗಳು ಮತ್ತು ಸಲ್ಫರ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾರ್ಗಗಳು. ವರ್ತುಲ ವಿನಾಶಕಾರಿ ಮಾರ್ಗವು ಸುತ್ತಮುತ್ತಲಿನ ಜಲೀಯ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಕರಗುವ ಸಣ್ಣ ಸಾವಯವ ಸಲ್ಫೈಡ್ಗಳ ಬಿಡುಗಡೆಯೊಂದಿಗೆ ಇಂಗಾಲ-ಇಂಗಾಲದ ಬಂಧಗಳ ಆಯ್ದ ಸೀಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಸಲ್ಫರ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾರ್ಗಗಳು ಸಲ್ಫರ್ ಅನ್ನು ಸಲ್ಫೈಡ್ ಅಥವಾ ಸಲ್ಫೈಟ್ ಅಯಾನುಗಳಾಗಿ ಉಪಉತ್ಪನ್ನಗಳಾಗಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲು ಸತತ ಸಲ್ಫರ್ ರೆಡಾಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿವೆ. ಹೀಗಾಗಿ ಎರಡನೆಯದನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕ್ಯಾಲೋರಿ ಅಂಶವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಗಂಧಕ-ಮುಕ್ತ ಸಂಯುಕ್ತಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಬಹಳ ಭರವಸೆಯ ಮಾರ್ಗವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಹುಳಿ ಕಚ್ಚಾ ತೈಲ ಭಿನ್ನರಾಶಿಗಳಲ್ಲಿ ಹೇರಳವಾಗಿರುವ ಸಲ್ಫರ್ ಹೆಟೆರೊಸೈಕಲ್ಗಳ ಸಲ್ಫರೀಕರಣದಲ್ಲಿ. ಅತ್ಯಂತ ಹೆಚ್ಚು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾದ ರಿಂಗ್ ವಿಧ್ವಂಸಕ ಮಾರ್ಗವೆಂದರೆ ಕೊಡಮಾ ಮಾರ್ಗ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಸ್ಯೂಡೋಮೊನಸ್ ಅಬಿಕೊನೆನ್ಸಿಸ್ ಮತ್ತು ಸ್ಯೂಡೋಮೊನಸ್ ಜಿಜಾನಿಯಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಮಾರ್ಗವು ನಾಲ್ಕು ಪ್ರಮುಖ ಹಂತಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆಃ i) ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ರಿಂಗ್ಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾದ ಕಾರ್ಬನ್ಗಳ ಎನ್. ಎ. ಡಿ. ಎಚ್-ಅವಲಂಬಿತ ಡೈಆಕ್ಸಿಜನೇಸ್ಗಳಿಂದ ಸತತ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಷನ್, ನಂತರ ii) ಎನ್. ಎ. ಡಿ + ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ನಿಂದ ರಿಂಗ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ಜಲೀಕರಣಗೊಳಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಮುಂದೆ iii) ರಿಂಗ್ ಸೀಳು ಮತ್ತು ಪೈರುವಿಲ್ ಶಾಖೆಯ ರಚನೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ಆಕ್ಸಿಜನೇಷನ್; iv) ಪೈರುವೇಟ್ ಮತ್ತು ಉಳಿದ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲು ಪೈರುವಿಲ್ ಸಬ್ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಯೆಂಟ್ನ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನ. ಈ ಮಾರ್ಗದ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು ಇನ್ನೂ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗುವ ಗಂಧಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಈ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಕೈಗಾರಿಕಾ ಅನ್ವಯಗಳಿಗೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ತೈಲ ಉದ್ಯಮವು ಆಕರ್ಷಣೀಯ ಮಾರ್ಗವೆಂದು ನಿರ್ಲಕ್ಷಿಸಿದೆ. ಅತ್ಯಂತ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾದ ಸಲ್ಫರ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾರ್ಗವು 4S ಮಾರ್ಗವಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಮೊದಲು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಂ ರೋಡೋಕೋಕಸ್ ಎರಿಥ್ರೋಪೋಲಿಸ್ (ಸ್ಟ್ರೈನ್ ಐಜಿಟಿಎಸ್ 8) ನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು, ಇದು ಡೈಬೆನ್ಜೋಥಿಯೋಫೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಂದ ಸಲ್ಫರ್ ಅನ್ನು ಮೂರು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆಃ i) ಸಲ್ಫರ್ನ ಡಬಲ್ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣವನ್ನು (ಸಲ್ಫಾಕ್ಸೈಡ್ ಮತ್ತು ಸಲ್ಫೋನ್ಗೆ) ಫ್ಲೇವಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಮೊನೊಕ್ಸಿಜನೇಸ್ನಿಂದ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ii) ಎರಡನೇ ಫ್ಲೇವಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಮೊನೊಕ್ಸಿಜನೇಸ್ನಿಂದ ಕಾರ್ಬನ್-ಸಲ್ಫರ್ ಬಂಧದ ಸೀಳು ಮತ್ತು iii) 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಬೈಫಿನೈಲ್ ಮತ್ತು ಸಲ್ಫೈಟ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಡೀಸಲ್ಫನೇಶನ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ. ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ, ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೆ ನಾಲ್ಕು ಕಿಣ್ವಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆಃ ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಮೂರು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಎಬಿಸಿ ವಂಶವಾಹಿಗಳಲ್ಲಿ (ಫ್ಲೇವಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಮೊನೊಕ್ಸಿಜೆನೇಸ್ಗಳು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಎ ಮತ್ತು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಸಿ, ಮತ್ತು ಡಿಸಲ್ಫಿನೇಸ್ ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಬಿ) ಎನ್ಕೋಡ್ ಮಾಡಲ್ಪಟ್ಟಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ನಾಲ್ಕನೇ ಕ್ರೋಮೋಸೋಮ್ ಎನ್ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಿಣ್ವ, ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಡಿ, ಇದು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಎ ಮತ್ತು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಸಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಫ್ಲೇವಿನ್ ಮೊನೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ನ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ಪೂರೈಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಕೆಲವು ಆಮ್ಲಜನಕರಹಿತ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ಸಲ್ಫೈಡ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಪರ್ಯಾಯ ಸಲ್ಫರ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು ಎಂದು ಸಹ ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ, ಬಿಟುಮೆನ್, ನಿರ್ವಾತ ಅನಿಲ ತೈಲ ಅಥವಾ ಡಾಂಬರು ಹಾಕಿದ ತೈಲದಂತಹ ಭಿನ್ನರಾಶಿಗಳ ಸಲ್ಫರೀಕರಣವನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ ಏರೋಬಿಕ್ 4S ಮಾರ್ಗವು ಡೈಬೆನ್ಜೋಥಿಯೋಫೀನ್ (ಡಿಬಿಟಿ) ಅನ್ನು 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಬಿಫಿನೈಲ್ ಮತ್ತು ಸಲ್ಫೈಟ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುವ ಆಕ್ಸಿಡೇಟಿವ್ ಡಿಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್ನ ಸಲ್ಫರ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಚಯಾಪಚಯ ಮಾರ್ಗವಾಗಿದೆ. ಇದು ಒಟ್ಟು ನಾಲ್ಕು ಎನ್. ಎ. ಡಿ. ಎಚ್ ಅಣುಗಳನ್ನು (ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್. ಎಚ್. 2 ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಡಿ. ಎಸ್. ಜೆಡ್. ಡಿ. ಗೆ ಮೂರು ಮತ್ತು ಡಿ. ಎಸ್. ಜೆಡ್. ಎ. ಯ ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್-ಆಕ್ಸೈಡ್ ಉಪಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸಲು ನಾಲ್ಕನೇ ಅಗತ್ಯ) ಮತ್ತು ಆಮ್ಲಜನಕದ ಮೂರು ಅಣುಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ, ಹೀಗೆ ಎನ್. ಎ. ಡಿ. + ಮತ್ತು ನೀರನ್ನು ಉಪಉತ್ಪನ್ನಗಳಾಗಿ ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಸಿ ಎರಡು ಅನುಕ್ರಮ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿ ಮಧ್ಯಪ್ರವೇಶಿಸುವ ಮೊದಲ ಕಿಣ್ವವಾಗಿದ್ದು, ಡಿಬಿಟಿಯ ಡಬಲ್ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣವನ್ನು ಮೊದಲು ಡಿಬಿಟಿ-ಸಲ್ಫಾಕ್ಸೈಡ್ಗೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಡಿಬಿಟಿ-ಸಲ್ಫೋನ್ಗೆ ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್. ಎಚ್. 2 ಸಹಘಟಕವಾಗಿ ಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಡಿ. ಎಸ್. ಝಡ್. ಡಿ. ಮತ್ತು ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕವು ಪೂರೈಸುತ್ತದೆ. ಆ ಕಾರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಈ ಕಿಣ್ವದ ದಕ್ಷತೆಯು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಡಿಯ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಪರಿಸರದ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿದೆ. ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಸಿ ಯಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಮೂರು ಹಂತಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆಃ 1) ಹೈಡ್ರೋಪೆರಾಕ್ಸಿಫ್ಲಾವಿನ್-ಮಧ್ಯಂತರ (ಸಿ4ಎಒಒಹೆಚ್) ರಚನೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆ; 2) ಡಿಬಿಟಿಯು ಡಿಬಿಟಿಒಗೆ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ; ಮತ್ತು 3) ಎಫ್ಎಂಎನ್ ನಿರ್ಜಲೀಕರಣ. ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಸಿ ಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿ ಎರಡನೇ ಅತ್ಯಂತ ಕಡಿಮೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾದ ಕಿಣ್ವವಾಗಿದ್ದು, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಕೆಕ್ಯಾಟ್ 1.6 ± 0.3 ನಿಮಿಷ−1 ಆಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಎಚ್. ಪಿ. ಬಿ. ಎಸ್ ಮತ್ತು 2-ಎಚ್. ಬಿ. ಪಿ, ಕ್ರಮವಾಗಿ ಡಿ. ಎಸ್. ಝಡ್. ಎ ಮತ್ತು ಡಿ. ಎಸ್. ಝಡ್. ಬಿ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರತಿಬಂಧದಿಂದ ಇದು ತೀವ್ರವಾಗಿ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ, ಆ ಕಾರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಇದು ಕಿಣ್ವ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ಗೆ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ. ಮಾರ್ಗದ ಮೂರನೇ ಹಂತಕ್ಕೆ ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಎ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಇದು ಮೊದಲ ಇಂಗಾಲ-ಸಲ್ಫರ್ ಬಂಧದ ಸೀಳನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ, ಡಿಬಿಟಿ-ಸಲ್ಫೋನ್ ಅನ್ನು 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಬೈಫಿನೈಲ್-2-ಸಲ್ಫೈನೇಟ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. DszCಯಂತೆ, DszAಗೂ ಅದರ ವೇಗವರ್ಧಕ ಚಕ್ರಕ್ಕೆ DszD ಒದಗಿಸಿದ FMNH2 ಮತ್ತು ಆಣ್ವಿಕ ಆಮ್ಲಜನಕದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಎಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರಮಾಣವು ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಸಿಗಿಂತ ಸುಮಾರು ಏಳು ಪಟ್ಟು ವೇಗವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಡಿಎಸ್ಜೆಡಿಸಿಯಂತೆ, ಇದು ಮಾರ್ಗದ ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವಾದ 2-ಎಚ್. ಬಿ. ಪಿ. ಯಿಂದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರತಿಬಂಧವನ್ನು ಅನುಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಡೆಸಲ್ಫಿನೇಸ್ (ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಬಿ) ಉಳಿದ ಇಂಗಾಲ-ಸಲ್ಫರ್ ಬಂಧವನ್ನು 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಬೈಫಿನೈಲ್-2-ಸಲ್ಫಿನೇಟ್ನಲ್ಲಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಎರಡು ಹಂತದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಸಲ್ಫರ್ ಮುಕ್ತ 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಬೈಫಿನೈಲ್ ಆಗಿ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ಮೊದಲ ಮತ್ತು ದರ-ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸುವ ಹಂತದಲ್ಲಿ, 2-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಬೈಫಿನೈಲ್-2-ಸಲ್ಫೈನೇಟ್ ಅನ್ನು ಅದರ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಇಂಗಾಲದಲ್ಲಿ ಸಿಸ್27 ಪ್ರೊಟೋನೇಟ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಇಂಗಾಲ-ಸಲ್ಫರ್ ಬಂಧದ ಸೀಳು ಮತ್ತು ಎಸ್. ಓ. 2 ಸ್ಥಳಾಂತರಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಎರಡನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ನೀರಿನ ಅಣುವನ್ನು ಸಿಸ್ 27 ನಿಂದ ಡಿಪ್ರೋಟೋನೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸೈಡ್ ಎಸ್. ಓ. 2 ಗೆ ದಾಳಿ ಮಾಡಿ ಎಚ್. ಎಸ್. ಓ. 3-ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎಸ್ಝಡ್ ಬಿ ಅತ್ಯಂತ ಕಡಿಮೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾದ ಕಿಣ್ವವಾಗಿದ್ದು, ಇದು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ವರ್ಧನೆಗೆ ಆಕರ್ಷಕ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ. NADH-FMN ಆಕ್ಸಿಡೊರೆಡಕ್ಟೇಸ್ (DszD) ಎರಡು ಹಂತದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದಲ್ಲಿ NADH ಅನ್ನು NAD + ಗೆ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ DszC ಮತ್ತು DszA ಯಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ FMNH2 ಕೋಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಅನ್ನು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ. ಮೊದಲ ಹಂತವು ಎನ್. ಎ. ಡಿ. ಎಚ್. ನ ನಿಕೋಟಿನಾಮೈಡ್ ಭಾಗದಿಂದ ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್. ಎಚ್. ಅನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಿಸಿದ ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್. ನ ಐಸೊಅಲಾಕ್ಸಾಜಿನ್ ಭಾಗದಲ್ಲಿನ ಕೇಂದ್ರ ಸಾರಜನಕಕ್ಕೆ ಹೈಡ್ರೈಡ್ ವರ್ಗಾವಣೆಗೆ ಅನುರೂಪವಾಗಿದೆ. ಎರಡನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ನೀರಿನ ಅಣುವು ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್. ಎಚ್. ನ ಎನ್1 ಪರಮಾಣುವನ್ನು ಪ್ರೊಟೋನೇಟ್ ಮಾಡಿ ಎಫ್. ಎಂ. ಎನ್. ಎಚ್. 2 ಅನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. 4S ಮಾರ್ಗ ಕಿಣ್ವಗಳ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಕೈಗಾರಿಕಾ ವಲಯದಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯವಾದ ಅನ್ವಯಕ್ಕಾಗಿ ಸಾಧಿಸಬೇಕಾದ ದರಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ವೈಲ್ಡ್-ಟೈಪ್ 4S ಮಾರ್ಗ ಕಿಣ್ವಗಳ ಡೀಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್ ದರವು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ. ಈ ಜೈವಿಕ ಸಲ್ಫರೀಕರಣ ವಿಧಾನದ ಸಮರ್ಥ ಅನ್ವಯಕ್ಕೆ ಮಾರ್ಗದ ಒಟ್ಟಾರೆ ದರದಲ್ಲಿ 500 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಳವು ಅಗತ್ಯವಾದ ಸುಧಾರಣೆಯಾಗಿದೆ. ನಿರ್ದೇಶಿತ ವಿಕಸನ, ತರ್ಕಬದ್ಧ ವಿನ್ಯಾಸ ಅಥವಾ ಎರಡೂ ತಂತ್ರಗಳ ಸಂಯೋಜನೆಯು 4S ಕಿಣ್ವಗಳ ವೇಗವರ್ಧಕ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರತೆಯ ಕೊರತೆಯನ್ನು ನಿಭಾಯಿಸಲು ಅನ್ವಯಿಸಲಾದ ಕೆಲವು ವಿಧಾನಗಳಾಗಿವೆ. ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗಿನ 4S ಮಾರ್ಗದ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸುಧಾರಣೆಯನ್ನು ನಿರ್ದೇಶಿತ ವಿಕಾಸದ ವಿಧಾನದಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ರೋಡೋಕೋಕಸ್ ತಳಿಗಳನ್ನು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಎನ್ಕೋಡಿಂಗ್ನೊಂದಿಗೆ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ dsz ಒಪೆರಾನ್ (ಇದು DszA, DszB ಮತ್ತು DszC ಗಾಗಿ ಎನ್ಕೋಡ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ). ಡಿಬಿಟಿ ಏಕೈಕ ಗಂಧಕದ ಮೂಲವಾಗಿದ್ದ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ 40 ಉಪಸಂಸ್ಕರಣೆಯ ಘಟನೆಗಳ ನಂತರ, ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ರೋಡೋಕೋಕಸ್ ತಳಿಗಳು 35 ಪಟ್ಟು ಸುಧಾರಣೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಿದವು. 4ಎಸ್ ಮಾರ್ಗ ಉತ್ಪನ್ನವಾದ ಎಚ್. ಬಿ. ಪಿ. ಗೆ ಡಿ. ಎಸ್. ಜೆಡ್. ಸಿ. ಯನ್ನು ಸಂವೇದನಾಶೂನ್ಯಗೊಳಿಸಲು ನಿರ್ದೇಶಿತ ವಿಕಸನ ಮತ್ತು ತರ್ಕಬದ್ಧ ವಿನ್ಯಾಸ ವಿಧಾನದ ಸಂಯೋಜನೆಯಿಂದ ಡಿ. ಎಸ್. ಜೆಡ್. ಸಿ. ಯ ಬಲವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರತಿಬಂಧವನ್ನು ಸಹ ನಿಭಾಯಿಸಲಾಯಿತು. DszC A101K ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರಭೇದವು ಕಾಡು-ರೀತಿಯ ಪ್ರಭೇದಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗೆ ಎಚ್. ಬಿ. ಪಿ. ಯ ಡಾಕಿಂಗ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಎಚ್. ಬಿ. ಪಿ. ಯು ಟಿ. ಆರ್. ಪಿ. 327 ನೊಂದಿಗೆ π-ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಡಿ. ಎಸ್. ಜೆಡ್. ಸಿ. ಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಎ101ಕೆ/ಡಬ್ಲ್ಯು327ಸಿ (ಎಕೆಡಬ್ಲ್ಯೂಸಿ) ಡಬಲ್ ಮ್ಯುಟೆಂಟ್ ಕಡಿಮೆ ಎಚ್. ಬಿ. ಪಿ ಸಾಂದ್ರತೆಗೆ ಸಂವೇದನಾಶೂನ್ಯವಾಗಿದೆ ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಎಕೆಡಬ್ಲ್ಯೂಸಿ ಡಿಎಸ್ಝಿಸಿಯನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ತಳಿ ಕಾಡು-ರೀತಿಯ ತಳಿಗಿಂತ 14 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿದೆ. ಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿನ ಅಂತಿಮ ಕಿಣ್ವವಾದ ಡಿಎಸ್ಝಿಬಿ, 1.7 ± 0.2 ನಿಮಿಷ−1 ವಹಿವಾಟು ದರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಅತ್ಯಂತ ನಿಧಾನವಾದ ಕಿಣ್ವಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ, ಇದು 4ಎಸ್ ಮಾರ್ಗದ ಪ್ರಮುಖ ಅಡಚಣೆಯಾಗಿದೆ. ಕಂಪ್ಯೂಟೇಶನಲ್ ತರ್ಕಬದ್ಧ ವಿನ್ಯಾಸದ ವಿಧಾನವು ರೂಪಾಂತರಗಳ ಒಂದು ಗುಂಪನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಡಿಎಸ್ಝಿಬಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಕ್ರಿಯ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುವ ಚಾರ್ಜ್ ವರ್ಗಾವಣೆಯನ್ನು ವೇಗಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅದರ ವಹಿವಾಟು ದರವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಡಿಎಸ್ಝಿಬಿ ಯ ವೇಗವರ್ಧಕ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಥರ್ಮೋಸ್ಟೆಬಿಲಿಟಿಯನ್ನು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಮ್ಯುಟಜೆನೆಸಿಸ್ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಪರಿಹರಿಸಲಾಯಿತು, ವೈ63ಎಫ್/ಕ್ಯೂ65ಎಚ್ ಡಬಲ್ ಮ್ಯುಟೆಂಟ್ ವೇಗವರ್ಧಕ ದಕ್ಷತೆಯ ನಷ್ಟವಿಲ್ಲದೆ ಕಿಣ್ವದ ಥರ್ಮೋಸ್ಟೆಬಿಲಿಟಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿತು. ಡಿಎಸ್ಝಡ್. ಡಿ. ಯು ಥರ್62 ಅವಶೇಷಗಳ ಮೇಲೆ ಉತ್ಪರಿವರ್ತನದ ದರವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಗುರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಅಸ್ನ್ ಮತ್ತು ಅಲಾ ಅವಶೇಷಗಳಿಂದ Thr62ನ ರೂಪಾಂತರವು ಅದರ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ 5 ಮತ್ತು 7 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿಸುವಲ್ಲಿ ಯಶಸ್ವಿಯಾಯಿತು. ಡಿಎಸ್ಝಡ್ಡಿ ಅನುಕ್ರಮದ 62ನೇ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿರುವ ಬದಲಿಗಳು ಎನ್ಎಡಿಎಚ್ನಿಂದ ಎಫ್ಎಡಿಗೆ ಹೈಡ್ರೈಡ್ ವರ್ಗಾವಣೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಶಕ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಬೀರುತ್ತವೆ ಎಂದು ಕಂಪ್ಯೂಟೇಶನಲ್ ಅಧ್ಯಯನವು ತೋರಿಸಿದೆ. ಆಸ್ಪಿ ಶೇಷದಿಂದ ಥರ್62 ರೂಪಾಂತರವು ಆಸ್ಪಿ ಋಣಾತ್ಮಕ ಚಾರ್ಜ್ನಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪರಿಣಾಮದಿಂದಾಗಿ ಈ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಎಲ್ಲಾ ಸಂಭವನೀಯ ರೂಪಾಂತರಗಳಿಂದ ಕಡಿಮೆ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಹಿಂದಿರುಗಿಸುತ್ತದೆ. ಸಲ್ಫರೈಸೇಶನ್ ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ರಾಸಾಯನಿಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳು ಸಲ್ಫರ್ ಅನ್ನು ಸಹ ನೋಡಿ