Floxing
ಜೆನೆಟಿಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ, ಫ್ಲೋಕ್ಸಿಂಗ್ ಎನ್ನುವುದು ಎರಡು ಲಾಕ್ಸ್ ಪಿ ಸೈಟ್ಗಳ ನಡುವೆ ಡಿಎನ್ಎ ಅನುಕ್ರಮದ ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ (ಇದನ್ನು ನಂತರ ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ). ಈ ಪದಗಳನ್ನು "ಎಲ್. ಓ. ಎಸ್. ಪಿ. ಯಿಂದ ಸುತ್ತುವರೆದಿರುವ/ಸುತ್ತುವರೆದಿರುವ" ಪದಗುಚ್ಛದ ಮೇಲೆ ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎಲ್. ಓ. ಎಕ್ಸ್. ಪಿ ತಾಣಗಳ ನಡುವಿನ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಯು ಕ್ರೀ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಯಿಂದ ವೇಗವರ್ಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಅದನ್ನು ಅಳಿಸಲು (ನಾಕ್ ಔಟ್), ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸಲು ಅಥವಾ ಕ್ರೀ-ಲಾಕ್ಸ್ ಮರುಸಂಯೋಜನೆ ಎಂಬ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ತಲೆಕೆಳಗಾಗಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಮಾದರಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಜೀನ್ಗಳ ಫ್ಲೋಕ್ಸಿಂಗ್ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಸಂಶೋಧಕರಿಗೆ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಮತ್ತು ತಾತ್ಕಾಲಿಕ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಹೊಂದಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಇಲಿಗಳಂತಹ ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಮಾನವ ರೋಗವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಮಾದರಿಗಳಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ, ಮಾನವನ ರೋಗಗಳು ಮತ್ತು ಔಷಧ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಕುಶಲತೆಯಿಂದ ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಕ್ರೀ-ಲಾಕ್ಸ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕ್ರೀ-ಲಾಕ್ಸ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು, ಸಂಶೋಧಕರು ಆಂಕೊಜೆನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಟ್ಯೂಮರ್ ನಿರೋಧಕ ವಂಶವಾಹಿಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಇಲಿಗಳ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ನ ಬೆಳವಣಿಗೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಗತಿಯಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಬಹುದು. ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿನ ಉಪಯೋಗಗಳು ವಂಶವಾಹಿಯನ್ನು ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಅದನ್ನು ಅಳಿಸಲು (ನಾಕ್ ಔಟ್), ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸಲು ಅಥವಾ ಸೇರಿಸಲು (ಕ್ರೀ-ಲಾಕ್ಸ್ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿನ ವಿವಿಧ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ) ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಮಾದರಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಜೀನ್ಗಳ ಫ್ಲೋಕ್ಸಿಂಗ್ ಅತ್ಯಗತ್ಯವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಮತ್ತು ತಾತ್ಕಾಲಿಕ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ ಪದಗಳಲ್ಲಿ, ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿದ ಯಾವುದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ವಿವೊದಲ್ಲಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಂಗಾಂಶದಲ್ಲಿ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ನಾಕ್-ಔಟ್ ಮಾಡಬಹುದು (ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಬಹುದು). ವಿಜ್ಞಾನಿ ನಂತರ ನಾಕ್-ಔಟ್ ಜೀನ್ನ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಬಹುದು ಮತ್ತು ಜೀನ್ನ ಸಾಮಾನ್ಯ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಗುರುತಿಸಬಹುದು. ಇದು ಗರ್ಭಧಾರಣೆಯ ಆರಂಭದಿಂದ ಜೀನ್ ಇಲ್ಲದಿರುವುದಕ್ಕಿಂತ ಭಿನ್ನವಾಗಿದೆ, ಆ ಮೂಲಕ ಜೀವಿಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಜೀನ್ಗಳ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯತೆ ಅಥವಾ ನಷ್ಟವು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಾಮಾನ್ಯ ಕಾರ್ಯಕ್ಕೆ ಅಡ್ಡಿಯಾಗಬಹುದು ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯವಾದ ಸಂತತಿಯ ಉತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ತಡೆಯಬಹುದು. ಅಳಿಸುವಿಕೆಯ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನ ಅಳಿಸುವಿಕೆಯ ಘಟನೆಗಳು ಜೀನ್ಗಳ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಅಥವಾ ಸಂಪೂರ್ಣ ಜೀನ್ಗಳನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಸಂಪಾದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಜೀನ್ ಎಡಿಟಿಂಗ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿವೆ. ಅಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಅದೇ ದಿಕ್ಕನ್ನು ಎದುರಿಸುವ ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ಸೈಟ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಆಸಕ್ತಿಯ ವಿಭಾಗವನ್ನು ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಮಾಡುವ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಏಕ ದಿಕ್ಕಿನ ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ತಾಣಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್ಎಯ ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಮಾಡಲಾದ ಭಾಗವನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯುತ್ತದೆ. ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಸಂಪಾದಿಸಲಾದ ತದ್ರೂಪುಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾರ್ಕರ್ ಬಳಸಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು, ಅದನ್ನು ಅದೇ ಕ್ರೀ-ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು. ಎಫ್ಆರ್ಟಿ/ಎಫ್ಎಲ್ಪಿ ತಾಣವನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವ ಮೂಲಕ ಷರತ್ತುಬದ್ಧ ಆಲೀಲ್ಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲು ಅದೇ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು, ಅದು ಅದೇ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಸಾಧಿಸುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಬೇರೆ ಕಿಣ್ವದೊಂದಿಗೆ. ವಿಲೋಮ ಘಟನೆಗಳ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಆನುವಂಶಿಕ ವಸ್ತುಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ. ತಲೆಕೆಳಗಾದ ವಂಶವಾಹಿಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಅಸಹಜ ಫಿನೋಟೈಪ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ, ಅಂದರೆ ತಲೆಕೆಳಗಾದ ವಂಶವಾಹಿಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಒಳಸೇರಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಕ್ರೀ-ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಗೆ ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ತಾಣಗಳು ಆಸಕ್ತಿಯ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ, ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ತಾಣಗಳು ಪರಸ್ಪರ ಆಧಾರಿತವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಕ್ರೀ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಗೆ ಒಳಗಾಗುವ ಮೂಲಕ, ಲಾಕ್ಸ್ಪಿ ತಾಣಗಳಿಂದ ಹಾನಿಗೊಳಗಾದ ಪ್ರದೇಶವು ತಲೆಕೆಳಗಾಗುತ್ತದೆ, ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಶಾಶ್ವತವಲ್ಲ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಹಿಂತಿರುಗಿಸಬಹುದು. ಲೊಕ್ಸ್ಪಿ ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುಗಳ ಮೇಲೆ ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ ಜೀನ್ಗಳನ್ನು ಏಕ ದಿಕ್ಕಿನ ದೃಷ್ಟಿಕೋನದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿದಾಗ ಸ್ಥಳಾಂತರದ ಸ್ಥಳಾಂತರದ ಘಟನೆಗಳ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಎರಡು ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುಗಳ ನಡುವೆ ಸ್ಥಳಾಂತರವನ್ನು ಸೃಷ್ಟಿಸಲು ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಒಂದು ಡಿಎನ್ಎ ಅಣುವಿನಿಂದ ಇನ್ನೊಂದಕ್ಕೆ ಆನುವಂಶಿಕ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ವಿನಿಮಯ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಎರಡೂ ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ಡ್ ಜೀನ್ಗಳ ಏಕಕಾಲಿಕ ಸ್ಥಳಾಂತರವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತದೆ. ಕಾರ್ಡಿಯೊಮಿಯೊಸೈಟ್ಸ್ (ಹೃದಯ ಸ್ನಾಯು ಅಂಗಾಂಶ) ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿನ ಸಾಮಾನ್ಯ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು ಕಾರ್ಡಿಯೊಮಿಯೊಸೈಟ್ಸ್ಗೆ ಹೆಚ್ಚು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಒಂದು ರೀತಿಯ ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಸಂಶೋಧಕರು ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ಇದನ್ನು ಒಂದು ರೀತಿಯ ಕ್ರೀ ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯು-ಮಯೋಸಿನ್ ಹೆವಿ ಚೈನ್ ಪ್ರಮೋಟರ್ರಿಂದ (-ಮೈಹೆಚ್ಸಿ) ನಡೆಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಈ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಗಳು ವಿವೋದಲ್ಲಿನ ಹೃದಯದ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಗೆ ಮಾತ್ರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಜೀನ್ಗಳನ್ನು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಾಗಿ ಬಳಸಲು ಹೃದಯದ ಷರತ್ತುಬದ್ಧ ನಾಕ್ಔಟ್ಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ,-ಮೈಹೆಚ್ಸಿ ಪ್ರವರ್ತಕದೊಂದಿಗೆ ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವುದರಿಂದ ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ಡ್ ಜೀನ್ ಹೃದಯದಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಈ ನಾಕ್ಔಟ್ಗಳು ಇಂಡ್ಯೂಸಿಬಲ್ ಆಗಿರಬಹುದು. ಹಲವಾರು ಇಲಿಗಳ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ, ಟಾಮೋಕ್ಸಿಫೆನ್ ಅನ್ನು ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಅನ್ನು ಮೌಸ್ ಈಸ್ಟ್ರೊಜೆನ್ ಗ್ರಾಹಕದ (ಇಆರ್) ಒಂದು ಭಾಗಕ್ಕೆ ಬೆಸೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಅದರ ಲಿಗಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಡೊಮೇನ್ (ಎಲ್ಬಿಡಿ) ಒಳಗೆ ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ರೂಪಾಂತರವು ಗ್ರಾಹಕವನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೀಟ್ ಶಾಕ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ 70 ಮತ್ತು 90 (ಎಚ್ಎಸ್ಪಿ 70 ಮತ್ತು ಎಚ್ಎಸ್ಪಿ 90) ನಂತಹ ಚಾಪೆರೋನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಮೂಲಕ ತಪ್ಪಾದ ಸ್ಥಳೀಕರಣಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಟಾಮೋಕ್ಸಿಫೆನ್ ಕ್ರೀ-ಇಆರ್ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಚಾಪೆರೋನ್ಗಳೊಂದಿಗಿನ ಅದರ ಸಂವಹನವನ್ನು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಕ್ರೀ-ಇಆರ್ ಸಮ್ಮಿಳನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸಲು ಮತ್ತು ಫ್ಲೋಕ್ಸ್ಡ್ ಜೀನ್ನ ಮೇಲೆ ಮರುಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಮಾಡಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಶಾಖ ಆಘಾತ ಅಂಶಗಳ (ಎಚ್. ಎಸ್. ಇ. ಗಳು) ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿದ್ದಾಗ ಕ್ರೀ ರಿಕಾಂಬಿನೇಸ್ ಅನ್ನು ಶಾಖದಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಬಹುದು. ಉಲ್ಲೇಖಗಳು ಡಿಎನ್ಎ ಜೆನೆಟಿಕ್ಸ್ ತಂತ್ರಗಳು