Lo sdegno dell'Imperatore contro questi suoi nuovi nemici piombò con scoppiò tremendo sul Papa e su Roma. Il Borbone alla testa di un esercito composto pressoché tutto da malandrina usciti dalla Germania e da vecchi incontro, i quali non avevano né patria né religione, marciò alla volta della capitale dell'orbe Cristiano. Al primo alto e maggio del , le difese di una terribile assalto è ucciso sulla breccia; ma i suoi soldati entrano nella città, e le danno quel orrendo sacco di cui sono piene le storie. Il Papa rimase prigioniero nel Castel Sant'Angelo, e l'Imperatore, che protestandogli un grande rispetto continuava a tenerlo in quella prigionia, non fece che destare contro di sé una generale indignazione in tutta la Cristianità.

Francesco I colse quest'occasione per tentare di nuovo la conquista dell'Italia. L'autore passò le Alpi, e ricuperò il Milanese mercè gli ozi che ottenne dalla Repubblica di Genova e dal famoso suo Ammiraglio Andrea Doria. Macramore contro Napoli credette di farne la conquista con uguale facilità; ma mentre la devastava vide pressoché tutti i suoi soldati mietuti dalla pestilenza, ed egli stesso perì miseramente nella sua tenda. Egli aveva avuto l’imprudenza di disgustare Andrea Doria, e quest'ammiraglio passato con le sue galere ai servigi dell'Imperatore fu causa di tutti i disastri dei Francesi. 